1. Oor die vervaardiging van virusmonsterbuisies
Virusmonsterbuisies behoort aan produkte vir mediese toestelle. Die meeste binnelandse vervaardigers is volgens die eersteklasprodukte geregistreer, en min maatskappye is volgens die tweedeklasprodukte geregistreer. Onlangs, om aan die noodbehoeftes van Wuhan en ander plekke te voldoen, het baie maatskappye die "noodkanaal" geneem "Doen aansoek om die eersteklas rekordtoestemming. Die virusmonsterbuis bestaan uit 'n monsterdepper, virusbewaringsoplossing en buiteverpakking. Aangesien daar geen verenigde nasionale standaard of industriestandaard is nie, verskil die produkte van verskeie vervaardigers baie.
1. Monsternemingsdepper: Die monsternemingsdepper maak direk kontak met die monsternemingsplek, en die materiaal van die monsterkop is nou verwant aan die daaropvolgende opsporing. Die steekproefkop moet gemaak word van Polyester (PE) sintetiese vesel of Rayon (mensgemaakte vesel). Kalsiumalginaat-spons of houtstokkies (insluitend bamboesstokkies) kan nie gebruik word nie, en die materiaal van die depperkop kan nie katoenprodukte wees nie. Omdat katoenvesel 'n sterk adsorpsie van proteïen het, is dit nie maklik om in die daaropvolgende bergingsoplossing te elueer nie; en wanneer 'n houtstok of bamboesstok wat kalsiumalginaat en houtkomponente bevat, gebreek word, sal deurweek in die stooroplossing ook proteïen adsorbeer, en selfs sal Dit die daaropvolgende PCR-reaksie inhibeer. Dit word aanbeveel om sintetiese vesels soos PE-vesel, poliëstervesel en polipropileenvesel vir die materiaal van die depperkop te gebruik. Natuurlike vesels soos katoen word nie aanbeveel nie. Nylonvesels word ook nie aanbeveel nie omdat nylonvesels (soortgelyk aan tandeborselkoppe) water absorbeer. Swak, wat lei tot onvoldoende monsternemingsvolume, wat die opsporingstempo beïnvloed. Kalsiumalginaat-spons is verbode om deppermateriaal te monster! Depperhandvatsel het twee tipes: gebreek en ingebou. Die gebreekte depper word in die opbergbuis geplaas na monsterneming, en die buisdop word gebreek nadat dit van die posisie naby die monsterkop gebreek is; die ingeboude depper plaas die monsternemingsdepper direk in die stoorbuis na monsterneming, en die stoorbuisbuis se deksel is ingebou. Belyn die klein gaatjie met die bokant van die handvatsel en trek die buisdeksel vas. Deur die twee metodes te vergelyk, is laasgenoemde relatief veilig. Wanneer die gebreekte depper saam met 'n kleiner grootte stoorbuis gebruik word, kan dit vloeistofspatsels in die buis veroorsaak wanneer dit gebreek word, en volle aandag moet gegee word aan die risiko van kontaminasie wat veroorsaak word deur onbehoorlike gebruik van die produk. Dit word aanbeveel om hol polistireen (PS) geëxtrudeerde buis of polipropileen (PP) inspuiting plooibuis te gebruik vir die materiaal van die depperhandvatsel. Maak nie saak watter materiaal gebruik word nie, kalsiumalginaat bymiddels kan nie bygevoeg word nie; houtstokke of bamboesstokkies. Kortom, die monsternemingsdepper moet die hoeveelheid monsterneming en die hoeveelheid vrystelling verseker, en die geselekteerde materiale moet nie stowwe hê wat daaropvolgende toetsing beïnvloed nie.
2. Virusbewaringsoplossing: Daar is twee soorte virusbewaringsoplossings wat wyd in die mark gebruik word, een is 'n virusonderhoudsoplossing wat gemodifiseer is op grond van die vervoermedium, en die ander is 'n gemodifiseerde oplossing vir nukleïensuurekstraksie-lisaat.
Die hoofkomponent van eersgenoemde is Eagle se basiese kultuurmedium (MEM) of Hank se gebalanseerde sout, wat bygevoeg word met die soute, aminosure, vitamiene, glukose en proteïene wat nodig is vir virusoorlewing. Hierdie bergingsoplossing gebruik fenolrooi natriumsout as 'n aanwyser en oplossing. Wanneer die pH-waarde 6,6-8,0 is, is die oplossing pienk. Die nodige glukose, L-glutamien en proteïen word by die preserveringsoplossing gevoeg. Die proteïen word verskaf in die vorm van fetale bees serum of bees serum albumien, wat die proteïen dop van die virus kan stabiliseer. Omdat die preserveringsoplossing ryk is aan voedingstowwe, is dit bevorderlik vir die oorlewing van die virus, maar ook voordelig vir die groei van bakterieë. As die preserveringsoplossing met bakterieë besmet is, sal dit in groot hoeveelhede vermeerder. Die koolstofdioksied in sy metaboliete sal veroorsaak dat die preserveeroplossing se pH van pienk val. Word geel. Daarom het die meeste vervaardigers antibakteriese bestanddele by hul formulerings gevoeg. Die aanbevole antibakteriese middels is penisillien, streptomisien, gentamisien en polimiksien B. Natriumasied en 2-metiel word nie aanbeveel nie. Inhibeerders soos 4-metiel-4-isotiazolin-3-on (MCI) en 5-chloor-2-metiel-4 -isotiazolin-3-one (CMCI) omdat hierdie komponente 'n effek op die PCR-reaksie het. Aangesien die monster wat deur hierdie bewaringsoplossing verskaf word basies 'n lewende virus is, kan die oorspronklikheid van die monster tot die grootste mate behou word, en dit kan nie net vir die ekstraksie en opsporing van virusnukleïensure gebruik word nie, maar ook vir die verbouing en isolasie van virusse. Daar moet egter op gelet word dat wanneer dit vir opsporing gebruik word, nukleïensuurekstraksie en suiwering uitgevoer moet word na inaktivering.
Nog 'n soort preserveringsoplossing wat voorberei is op grond van nukleïensuur-ekstraksie-lisaat, die hoofkomponente is gebalanseerde soute, EDTA-chelaatvormer, guanidiensout (soos guanidien-isotiosianaat, guanidienhidrochloried, ens.), anioniese oppervlakaktiewe middel (soos dodekaannatriumsulfaat), kationies oppervlakaktiewe middels (soos tetradesieltrimetielammoniumoksalaat), fenol, 8-hidroksikinolien, dithiotreitol (DTT), proteïenase K en ander komponente, Hierdie bergingsoplossing is om die virus direk te splits om die nukleïensuur vry te stel en die RNase uit te skakel. As dit slegs vir RT-PCR gebruik word, is dit meer geskik, maar die lysaat kan die virus deaktiveer. Hierdie soort monster kan nie vir viruskultuurskeiding gebruik word nie.
Die metaalioon-chelaatvormende middel wat in die viruspreserveringsoplossing gebruik word, word aanbeveel om EDTA-soute te gebruik (soos dikalium-etileendiamientetra-asynsuur, dinatriumetileendiamientetra-asynsuur, ens.), en dit word nie aanbeveel om heparien (soos natriumheparien, litiumheparien) te gebruik nie. om nie PCR-opsporing te beïnvloed nie.
3. Bewaringsbuis: Die materiaal van die bewaringsbuis moet versigtig gekies word. Daar is data wat daarop dui dat polipropileen (polipropileen) verband hou met die adsorpsie van nukleïensuur, veral by hoë spanning ioonkonsentrasie, is poliëtileen (polipropileen) meer verkies as polipropileen (polipropileen) Maklik om DNA/RNA te begryp. Poliëtileen-propileen polimeer (poliallomeer) plastiek en 'n paar spesiaal verwerkte polipropileen (polipropileen) plastiekhouers is meer geskik vir DNA/RNA berging. Daarbenewens, wanneer 'n breekbare depper gebruik word, moet die opbergbuis probeer om 'n houer met 'n hoogte van meer as 8 cm te kies om te verhoed dat die inhoud gespat en besoedel word wanneer die depper gebreek word.
4. Water vir produksie bewaring oplossing: Die ultrasuiwer water wat gebruik word vir produksie bewaring oplossing moet gefiltreer word deur 'n ultrafiltrasie membraan met 'n molekulêre gewig van 13,000 om die verwydering van polimeer onsuiwerhede van biologiese bronne, soos RNase, DNase, en endotoksien te verseker, en gewone suiwering word nie aanbeveel nie. Water of gedistilleerde water.
2. Gebruik van virusmonsterbuisies
Monsterneming met behulp van die virusmonsterbuis word hoofsaaklik verdeel in orofaryngeale monsterneming en nasofaryngeale monsterneming:
1. Orofaryngeale monsterneming: Druk eers die tong met die tongdepressor, steek dan die kop van die monsternemingsdepper in die keel om die bilaterale faringeale mangels en posterior faringeale wand af te vee, en vee die posterior faringeale wand af met ligte krag, vermy aanraking aan die tong eenheid.
2. Nasofaryngeale steekproefneming: meet die afstand van die punt van die neus tot by die oorlel met 'n depper en merk met 'n vinger, steek die steekproef depper in die neusholte in die rigting van die vertikale neus (gesig), die depper moet uitsteek ten minste die helfte van die lengte van die oorlel tot by die punt van die neus, Laat die depper in die neus vir 15-30 sekondes, draai liggies 3-5 keer, en trek die depper terug.
Dit is nie moeilik om uit die gebruiksmetode te sien nie, of dit 'n orofaryngeale depper of 'n nasofaryngeale depper is, monsterneming is 'n tegniese taak, wat moeilik en besmet is. Die kwaliteit van die versamelde monster hou direk verband met die daaropvolgende opsporing. As die versamelde monster 'n virale lading het Lae, maklik om vals negatiewe te veroorsaak, moeilik om die diagnose te bevestig.
Plaas tyd: Jun-21-2020
