Parechji pinsamenti nantu à u tubu di campionamentu di virus

1. Circa a fabricazione di tubi di campionamentu di virus
I tubi di campionamentu di virus appartenenu à i prudutti di i dispositi medichi. A maiò parte di i pruduttori domestici sò registrati secondu i prudutti di prima classe, è pochi cumpagnie sò registrati secondu i prudutti di seconda classe. Recentemente, per risponde à i bisogni d'emergenza di Wuhan è altri posti, parechje cumpagnie anu pigliatu u "canale d'emergenza" "Applicate per u permessu di registrazione di prima classe. U tubu di campionamentu di virus hè cumpostu da un tampone di campionamentu, una soluzione di preservazione di virus è un imballaggio esternu. Siccomu ùn ci hè micca un standard naziunale unificatu o standard di l'industria, i prudutti di diversi fabricatori varianu assai.

1. Sampling swab: U tastu di campionamentu cuntattate direttamente u situ di campionamentu, è u materiale di a testa di campionamentu hè strettamente ligatu à a rilevazione sussegwente. A testa di tampone di campionamentu deve esse fatta di fibra sintetica di Poliester (PE) o Rayon (fibra artificiale). Spugna d'alginate di calcium o bastone di legnu (inclusi bastoni di bambù) ùn pò micca esse usatu, è u materiale di a testa di u swab ùn pò micca esse prudutti di cuttuni. Perchè a fibra di cuttuni hà una forte adsorzione di prutezione, ùn hè micca faciule d'eluzione in a suluzione di almacenamiento sussegwente; è quandu un bastone di legnu o un bastone di bambù chì cuntene alginate di calcium è cumpunenti di lignu hè rottu, u soaking in a suluzione d'almacenamiento adsorbe ancu a proteina, è ancu pò impedisce a reazzione PCR successiva. Hè ricumandemu d'utilizà fibre sintetiche cum'è fibra PE, fibra di poliester è fibra di polipropilene per u materiale di a testa di tampone. Fibre naturali cum'è u cuttuni ùn sò micca cunsigliatu. I fibri di nylon sò ancu micca cunsigliatu perchè e fibre di nylon (simile à i capi di spazzole di denti) assorbanu l'acqua. Poveru, risultatu in un voluminu di campionamentu insufficiente, affettendu a rata di deteczione. A spugna d'alginate di calciu hè pruibita per campionà u materiale di tampone! U manicu di swab hà dui tipi: rottu è integratu. U swab rottu hè piazzatu in u tubu di almacenamento dopu a mostra, è u tappu di u tubu hè rottu dopu à esse rottu da a pusizione vicinu à a testa di mostra; u tampone integratu mette direttamente u tampone di campionamentu in u tubu di almacenamento dopu a prova, è a tappa di u tubu di u tubu di almacenamentu hè custruitu in Align the small hole with the top of the handle and strince the tube cover. Paragunendu i dui metudi, l'ultimu hè relativamente sicuru. Quandu u tampone rottu hè adupratu in cungiunzione cù un tubu di almacenamento di dimensione più chjuca, pò causà spruzzi di liquidu in u tubu quandu si rompe, è deve esse pagatu tutta l'attenzione à u risicu di contaminazione causata da l'usu impropriu di u pruduttu. Hè cunsigliatu d'utilizà un tubu estrusu di polistirene cavi (PS) o un tubu di corrugazione di iniezione di polipropilene (PP) per u materiale di u manicu di tampone. Ùn importa micca u materiale utilizatu, l'additivi di alginate di calciu ùn ponu micca esse aghjuntu; bastoncini di legnu o bastoncini di bambù. In corta, u tampone di campionamentu deve assicurà a quantità di campionamentu è a quantità di liberazione, è i materiali selezziunati ùn deve micca esse sustanzi chì affettanu i testi successivi.

2. Soluzione di preservazione di virus: Ci sò dui tipi di suluzioni di preservazione di virus largamente utilizati in u mercatu, unu hè una suluzione di mantenimentu di virus mudificata nantu à u mediu di trasportu, è l'altru hè una suluzione mudificata per u lisatu di estrazione di l'acidu nucleicu.
U cumpunente principalu di l'antica hè u mediu di cultura basica di Eagle (MEM) o u salitu equilibratu di Hank, chì hè aghjuntu cù i sali, aminoacidi, vitamini, glucose è proteini necessarii per a sopravvivenza di virus. Questa suluzione di almacenamiento usa u salinu di sodiu rossu di fenol cum'è indicatore è suluzione. Quandu u valore di pH hè 6,6-8,0, a suluzione hè rosa. U glucose necessariu, L-glutamine è a proteina sò aghjuntu à a suluzione di preservazione. A proteina hè furnita in forma di serum bovinu fetale o albumina di serum bovinu, chì ponu stabilizzà a cunchiglia di a proteina di u virus. Perchè a suluzione di preservazione hè ricca in nutrienti, hè favurevule à a sopravvivenza di u virus, ma ancu benefica à u crescita di bacteria. Se a suluzione di preservazione hè contaminata da bacteria, si multiplica in quantità grande. U diossidu di carbonu in i so metaboliti pruvucarà u pH di a suluzione di preservazione per falà da u rosa Giallu giallu. Dunque, a maiò parte di i pruduttori anu aghjustatu ingredienti antibacterial à e so formulazioni. L'agenti antibacteriali cunsigliati sò penicillina, streptomicina, gentamicina è polymyxin B. Sodium azide è 2-methyl ùn sò micca cunsigliatu Inibitori cum'è 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) è 5-chloro-2-methyl-4 -isothiazolin-3-one (CMCI) perchè sti cumpunenti anu un effettu nantu à a reazzione PCR. Siccomu a mostra furnita da sta suluzione di preservazione hè in fondu un virus vivu, l'uriginale di a mostra pò esse guardata à a maiò parte, è pò esse usata micca solu per l'estrazione è a deteczione di l'acidi nucleici di virus, ma ancu per u cultivo è isolamentu di virus. Tuttavia, deve esse nutatu chì quandu s'utilice per a deteczione, l'estrazione di l'acidu nucleicu è a purificazione deve esse realizatu dopu l'inattivazione.
Un altru tipu di suluzione di preservazione preparatu basatu nantu à l'estrazione di l'acidu nucleicu lisatu, i cumpunenti principali sò sali equilibrati, agenti chelating EDTA, sal guanidine (cum'è guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, etc.), surfactant anionicu (cum'è dodecane Sodium sulfate), cationic. surfactants (cum'è tetradecyltrimethylammonium oxalate), fenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinasi K è altri cumpunenti, Questa suluzione di almacenamento hè di scinderà direttamente u virus per liberà l'acidu nucleicu è eliminà a RNase. Sè solu usatu per RT-PCR, hè più adattatu, ma u lisatu pò inattivà u virus. Stu tipu di mostra ùn pò micca esse usatu per a separazione di a cultura di virus.

L'agente di chelating di ioni metallici utilizatu in a suluzione di preservazione di virus hè cunsigliatu di utilizà sali EDTA (cum'è l'acidu dipotassiu etilendiaminotetraaceticu, l'acidu disodiu etilendiaminetetraaceticu, etc.), è ùn hè micca cunsigliatu per utilizà l'heparina (cum'è l'heparina di sodiu, l'heparina di lithium). per ùn affettà a deteczione di PCR.
3. Tubu di preservazione: U materiale di u tubu di preservazione deve esse sceltu cù cura. Ci sò dati chì suggerenu chì u polipropilene (Polypropylene) hè in relazione cù l'adsorption di l'acidu nucleicu, soprattuttu à a cuncentrazione di ioni d'alta tensione, u polietilene (Polypropylene) hè più preferitu ch'è u polipropilene (Polypropylene) Easy to grip DNA / RNA. Polyethylene-propylene polymer (Polyallomer) plasticu è certi cuntenituri di plastica di polipropilene (Polypropylene) processatu apposta sò più adattati per u almacenamentu di DNA / RNA. Inoltre, quandu s'utilice un swab breakable, u tubu di almacenamiento deve pruvà à selezziunà un cuntinuu cù una altezza più grande di 8 cm per impediscenu u cuntenutu di esse splashed è contaminatu quandu u swab hè rottu.

4. L'acqua per a suluzione di pruduzzione: L'acqua ultrapura utilizata per a suluzione di cunservazione di a produzzione deve esse filtrata per una membrana ultrafiltrazione cù un pesu moleculare di 13 000 per assicurà a rimozione di impurità polimeriche da fonti biologiche, cum'è RNase, DNase è endotoxin, è A purificazione ordinaria ùn hè micca cunsigliatu. Acqua o acqua distillata.

2. Usu di tubi di campionamentu di virus

U campionamentu cù u tubu di campionamentu di virus hè principalmente divisu in campioni orofaringeali è campioni nasofaringei:

1. Sampling oropharyngeal: Prima appughjà a lingua cù u depressor di lingua, poi allargà a testa di u tampone di campionamentu in a gola per pulizziari l'amigdali faringeali bilaterali è u muru faringeale posteriore, è sguassate u muru faringeale posteriore cù forza ligera, evitendu di toccu a lingua. unità.

2. Sampling nasofaringeale: misurate a distanza da a punta di u nasu à u lòbulu di l'orechja cù un tampone è marcate cù un dettu, inserite u tampone di campionamentu in a cavità nasale in a direzzione di u nasu verticale (faccia), u tampone deve estenderà. almenu a mità di a lunghezza di u lòbulu di l'orechja à a punta di u nasu, Lasciate u tampone in u nasu per 15-30 seconde, girate delicatamente 3-5 volte, è ritirate u tampone.
Ùn hè micca difficiule di vede da u metudu di usu, s'ellu hè un swab oropharyngeal o un swab nasopharyngeal, u sample hè un compitu tècnicu, chì hè difficiule è contaminatu. A qualità di a mostra raccolta hè direttamente ligata à a rilevazione successiva. Se l'esemplariu cullatu hà una carica virali Bassu, faciule per causà falsi negativi, difficiuli di cunfirmà u diagnosticu.