1. o výrobě zkumavek o vzorkování viru
Trubky vzorkování virů patří do produktů zdravotnických prostředků. Většina domácích výrobců je registrována podle prvotřídních produktů a jen málo společností je registrováno podle produktů druhé třídy. Nedávno, aby bylo možné uspokojit nouzové potřeby Wuhanu a dalších míst, přijalo „nouzový kanál“ „o povolení k první třídě, které se netýkají jednotného národního standardu nebo vnějšího standardu.
1. Vzorkovací výtěr: Výtěr vzorkování přímo kontaktuje místo odběru vzorků a materiál vzorkovací hlavy úzce souvisí s následnou detekcí. Vzorkovací výtěrový hlava by měla být vyrobena ze syntetického vlákna nebo rayonu polyesteru (PE) (vlákna vyrobená v člověku). Nelze použít houbu alginátu vápenatého nebo dřevěné tyčinky (včetně bambusových tyčinek) a materiál hlavy hlavy nemůže být bavlněné výrobky. Protože bavlněné vlákno má silnou adsorpci proteinu, není snadné se etutovat do následného úložného řešení; A když je rozbitá dřevěná tyčinka nebo bambusová hůl obsahující alginát vápenatý a dřevěné komponenty, namočení do skladovacího roztoku také adsorbuje protein, a dokonce bude moci inhibovat následnou reakci PCR. Doporučuje se používat syntetická vlákna, jako je PE vlákno, polyesterové vlákno a polypropylenové vlákno pro materiál hlavy výtěru. Přírodní vlákna, jako je bavlna, se nedoporučují. Nylonová vlákna se také nedoporučují, protože nylonová vlákna (podobná hlavám zubního kartáčku) absorbují vodu. Chudý, což má za následek nedostatečný objem vzorkování, což ovlivňuje rychlost detekce. Houba alginátu vápenatého je zakázána pro vzorkování materiálu výtěru! Rukojeť výtěru má dva typy: rozbité a vestavěné. Rozbitý výtěr je umístěn do skladovací trubice po odběru vzorkování a uzávěr trubice se rozbije po rozbití z polohy poblíž vzorkovací hlavy; Vestavěný výtěr přímo dává výtěr vzorkování do skladovací trubice po odběru vzorkování a kryt trubice úložné trubice je postaven v zarovnání malého otvoru s horní částí rukojeti a utáhne kryt trubice. Při porovnání těchto dvou metod je posledně jmenovaná relativně bezpečná. Když se zlomený tampon používá ve spojení s skladovací trubicí s menší velikostí, může způsobit, že při zlomení je kapalina stříkající ve trubici a plná pozornost by měla být věnována riziku kontaminace způsobené nesprávným použitím produktu. Doporučuje se použít pro materiál rukojeti výtěrku pomocí injekční trubice s dutým polystyrenem (PS) extrudovanou trubicí nebo polypropylen (PP) injekční trubici. Bez ohledu na to, jaký materiál se používá, nelze přidat přísady na alginát vápenatý; Dřevěné tyčinky nebo bambusové tyčinky. Stručně řečeno, vzorkovací výtěr by měl zajistit množství odběru vzorků a množství uvolňování a vybrané materiály nesmí mít látky, které ovlivňují následné testování.
2. Roztok pro konzervaci viru: Existují dva druhy konzervačních roztoků virů široce používaných na trhu, jeden je řešení pro údržbu viru modifikované na základě transportního média a druhý je modifikovaným roztokem pro lyzát nukleové kyseliny.
Hlavní složkou bývalého je Eagleovo základní kultivační médium (MEM) nebo Hankova vyvážená sůl, která se přidává soli, aminokyseliny, vitamíny, glukózou a proteinem nezbytným pro přežití viru. Tento roztok skladování používá fenol červenou sodnou sůl jako indikátor a roztok. Když je hodnota pH 6,6-8,0, řešení je růžové. K konzervačnímu roztoku se přidávají nezbytný glukóza, L-glutamin a protein. Protein je poskytován ve formě fetálního hovězího séra nebo hovězího sérového albuminu, který může stabilizovat proteinový skořápku viru. Vzhledem k tomu, že konzervační roztok je bohatý na živiny, vede k přežití viru, ale také prospěšný pro růst bakterií. Pokud je konzervační roztok kontaminován bakteriemi, bude se množit ve velkém množství. Oxid uhličitý ve svých metabolitech způsobí, že pH konzervačního roztoku klesne z růžové zatáčky žlutě. Většina výrobců proto do jejich formulací přidala antibakteriální složky. Doporučená antibakteriální látka jsou penicilin, streptomycin, gentamicin a polymyxin B. azid sodný a 2-methyl se nedoporučují inhibitory, jako je 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) a 5-chlor-2-methyl-4-isothiazolin-3-One), protože tyto složení na pcr-one. Protože vzorek poskytnutý tímto konzervačním roztokem je v podstatě živým virem, lze originalitu vzorku udržovat v největší míře a lze jej použít nejen pro extrakci a detekci virových nukleových kyselin, ale také pro kultivaci a izolaci virů. Je však třeba poznamenat, že při použití pro detekci musí být po inaktivaci provedena extrakce a čištění nukleových kyselin.
Dalším druhem konzervačního roztoku připraveného na základě lyzátů extrakce nukleové kyseliny, hlavními složkami jsou vyvážené soli, chelatační činidlo EDTA, guanidin sůl (jako je guanidin isothiokyanát, guanidinový hydrochlorid atd.) Fenol, 8-hydroxychinolin, dithiothreitol (DTT), proteináza K a další složky, toto řešení skladování má přímo štěpit virus, aby uvolnil nukleovou kyselinu a eliminoval RNázu. Je-li použit pouze pro RT-PCR, je vhodnější, ale lyzát může virus inaktivovat. Tento druh vzorku nelze použít pro separaci kultury viru.
Doporučuje se používat soli EDTA (jako je kyselinu dipotasium ethylendiaminetetractové, ethylendiaminetetraoctové kyseliny atd.), A nedoporučuje se používat soli EDTA (jako je heparin (jako je heparin ethylendiaminetetraoctová, a to jako heparin (jako je heparin, jako je heparin (jako je heparin, jako je heparin (jako je heparin, jako je heparin (jako je heparin, jako je heparin (jako je heparin, jako je heparin, jako je například heparin, jako je heparin, jako je například detekci pcr), se nedoporučuje používat detekci pcr.
3. konzervační trubice: Materiál konzervační trubice by měl být vybrán pečlivě. Existují data naznačující, že polypropylen (polypropylen) souvisí s adsorpcí nukleové kyseliny, zejména při koncentraci iontů s vysokým napětím, polyethylen (polyethylen) je preferován než polypropylen (polypropylen) snadno uchopitelný DNA/RNA. Polyethylen-propylen polymer (polyallomer) plast a některé speciálně zpracované polypropylen (polypropylenové) plastové nádoby jsou vhodnější pro skladování DNA/RNA. Kromě toho by se při použití rozbitelného tamponu měla skladovací trubice pokusit vybrat kontejner s výškou větší než 8 cm, aby se zabránilo rozstříknutí a kontaminovaném obsahu, když je výtěr rozbit.
4. Voda pro roztok konzervace výroby: Ultrapurová voda použitá pro roztok ochrany výroby by měla být filtrována pomocí ultrafiltrační membrány s molekulovou hmotností 13 000, aby se zajistilo odstranění polymerních nečistot z biologických zdrojů, jako je RNáza, DNáza a endotoxin a není doporučeno běžné čištění. Voda nebo destilovaná voda.
2. Použití zkumavek o vzorkování viru
Vzorkování pomocí vzorkovací trubice viru je převážně rozděleno na vzorkování orofaryngeálních vzorků a vzorkování nosofaryngeálních:
1. Orofaryngeální odběr vzorků: Nejprve stiskněte jazyk depresorem jazyka a poté natáhněte hlavu výtěru odběru do krku, aby se otřel bilaterální mandle hltanu a zadní hltanskou stěnu a otřete zadní hltanskou stěnu světlou silou, zabránili se dotknout jednotky jazyka.
2. Vzorkování nosofaryngeálního vzorku: Změřte vzdálenost od špičky nosu k ušnímu laloku pomocí výtěru a značkou prstem, vložte vzorkovací výtěr do nosní dutiny ve směru vertikálního nosu (obličej), mělo by se výměnné otočení prodloužit, aby se prodloužila 3 až 30 sekund, a řečeno, otočení 3-5-time, které by měly být nejméně otočením, a otočit se o 3-5-time, a je třeba se stáhnout 3-5-time a otočit se a otočit, a otočit se, a otočit se, a otočit se a otočit se a otočit 3-timeny.
Z způsobu použití není obtížné vidět, zda se jedná o orofaryngeální výtěr nebo nosofaryngeální výtěr, vzorkování je technický úkol, který je obtížný a kontaminovaný. Kvalita shromážděného vzorku přímo souvisí s následnou detekcí. Pokud má shromážděný vzorek nízkou virovou zátěž, snadno způsobuje falešné negativy, obtížně potvrzuje diagnózu.
Čas příspěvku:-21-2020
