1. Ynglŷn â chynhyrchu tiwbiau samplu firws
Mae tiwbiau samplu firws yn perthyn i gynhyrchion dyfeisiau meddygol. Mae'r rhan fwyaf o wneuthurwyr domestig wedi'u cofrestru yn unol â'r cynhyrchion dosbarth cyntaf, ac ychydig o gwmnïau sydd wedi'u cofrestru yn ôl y cynhyrchion ail ddosbarth. Yn ddiweddar, er mwyn diwallu anghenion brys Wuhan a lleoedd eraill, mae llawer o gwmnïau wedi cymryd y “sianel argyfwng” ”yn berthnasol am y caniatâd record dosbarth cyntaf.
1. SAMPLING SWAB: Mae'r swab samplu yn cysylltu'n uniongyrchol â'r safle samplu, ac mae cysylltiad agos rhwng deunydd y pen samplu â'r canfod dilynol. Dylai'r pen swab samplu gael ei wneud o ffibr synthetig polyester (PE) neu rayon (ffibr o waith dyn). Ni ellir defnyddio sbwng alginad calsiwm neu swabiau ffon bren (gan gynnwys ffyn bambŵ), ac ni all deunydd pen y swab fod yn gynhyrchion cotwm. Oherwydd bod gan ffibr cotwm arsugniad cryf o brotein, nid yw'n hawdd elute i'r toddiant storio dilynol; a phan fydd ffon bren neu ffon bambŵ sy'n cynnwys alginad calsiwm a chydrannau pren wedi torri, bydd socian yn y toddiant storio hefyd yn adsorbio protein, a hyd yn oed a all atal yr adwaith PCR dilynol. Argymhellir defnyddio ffibrau synthetig fel ffibr AG, ffibr polyester a ffibr polypropylen ar gyfer deunydd y pen swab. Ni argymhellir ffibrau naturiol fel cotwm. Nid yw ffibrau neilon hefyd yn cael eu hargymell oherwydd bod ffibrau neilon (tebyg i bennau brws dannedd) yn amsugno dŵr. Yn wael, gan arwain at gyfaint samplu annigonol, gan effeithio ar y gyfradd ganfod. Mae sbwng alginad calsiwm wedi'i wahardd ar gyfer samplu deunydd swab! Mae gan handlen swab ddau fath: wedi torri ac wedi'i ymgorffori. Rhoddir y swab toredig yn y tiwb storio ar ôl samplu, ac mae cap y tiwb yn cael ei dorri ar ôl cael ei dorri o'r safle ger y pen samplu; Mae'r swab adeiledig yn rhoi'r swab samplu yn uniongyrchol yn y tiwb storio ar ôl samplu, ac mae'r gorchudd tiwb tiwb storio wedi'i adeiladu yn unol â'r twll bach â thop yr handlen ac yn tynhau gorchudd y tiwb. Gan gymharu'r ddau ddull, mae'r olaf yn gymharol ddiogel. Pan ddefnyddir y swab toredig ar y cyd â thiwb storio maint llai, gall achosi tasgu hylif yn y tiwb pan fydd wedi'i dorri, a dylid rhoi sylw llawn i'r risg o halogi a achosir gan ddefnydd amhriodol o'r cynnyrch. Argymhellir defnyddio tiwb allwthiol polystyren gwag (PS) neu diwb crebachu pigiad polypropylen (pp) ar gyfer deunydd handlen y swab. Ni waeth pa ddeunydd a ddefnyddir, ni ellir ychwanegu ychwanegion calsiwm alginad; ffyn pren neu ffyn bambŵ. Yn fyr, dylai'r swab samplu sicrhau faint o samplu a faint o ryddhau, a rhaid i'r deunyddiau a ddewiswyd beidio â bod â sylweddau sy'n effeithio ar brofion dilynol.
2. Datrysiad Cadw Feirws: Mae dau fath o ddatrysiadau cadw firws a ddefnyddir yn helaeth yn y farchnad, mae un yn ddatrysiad cynnal a chadw firws wedi'i addasu yn seiliedig ar y cyfrwng trafnidiaeth, ac mae'r llall yn ddatrysiad wedi'i addasu ar gyfer lysate echdynnu asid niwclëig.
Prif gydran y cyntaf yw cyfrwng diwylliant sylfaenol Eagle (MEM) neu halen cytbwys Hank, sy'n cael ei ychwanegu gyda'r halwynau, asidau amino, fitaminau, glwcos a phrotein sy'n angenrheidiol ar gyfer goroesi firws. Mae'r datrysiad storio hwn yn defnyddio halen sodiwm coch ffenol fel dangosydd a datrysiad. Pan fydd y gwerth pH yn 6.6-8.0, mae'r toddiant yn binc. Mae'r glwcos, L-glutamin a phrotein angenrheidiol yn cael eu hychwanegu at yr hydoddiant cadwraeth. Darperir y protein ar ffurf serwm buchol y ffetws neu serwm albwmin buchol, a all sefydlogi cragen brotein y firws. Oherwydd bod yr ateb cadwraeth yn llawn maetholion, mae'n ffafriol i oroesiad y firws ond hefyd yn fuddiol i dwf bacteria. Os yw'r toddiant cadwraeth wedi'i halogi â bacteria, bydd yn lluosi mewn symiau mawr. Bydd y carbon deuocsid yn ei fetabolion yn achosi i'r toddiant cadw pH ddisgyn o binc yn troi'n felyn. Felly, mae'r rhan fwyaf o wneuthurwyr wedi ychwanegu cynhwysion gwrthfacterol at eu fformwleiddiadau. The recommended antibacterial agents are penicillin, streptomycin, gentamicin and polymyxin B. Sodium azide and 2-methyl are not recommended Inhibitors such as 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) and 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one (CMCI) because these components have an effect on the PCR ymateb. Gan fod y sampl a ddarperir gan yr ateb cadwraeth hwn yn firws byw yn y bôn, gellir cadw gwreiddioldeb y sampl i'r graddau mwyaf, a gellir ei ddefnyddio nid yn unig ar gyfer echdynnu a chanfod asidau niwcleig firws, ond hefyd ar gyfer tyfu ac ynysu firysau. Fodd bynnag, dylid nodi, wrth ei ddefnyddio ar gyfer canfod, bod yn rhaid perfformio echdynnu asid niwclëig a phuro ar ôl anactifadu.
Math arall o ddatrysiad cadwraeth a baratowyd yn seiliedig ar lysate echdynnu asid niwclëig, y prif gydrannau yw halwynau cytbwys, asiant chelating EDTA, halen guanidine (fel guanidine isothiocyanate, hydroclorid guanidine, ac ati), syrffactydd anionig (fel sodmetige sulfacete), culfacet Oxalate), ffenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K a chydrannau eraill, yr hydoddiant storio hwn yw clirio'r firws yn uniongyrchol i ryddhau'r asid niwclëig a dileu'r RNase. Os mai dim ond ar gyfer RT-PCR y mae'n cael ei ddefnyddio, mae'n fwy addas, ond gall y lysate anactifadu'r firws. Ni ellir defnyddio'r math hwn o sampl ar gyfer gwahanu diwylliant firws.
Argymhellir bod yr asiant chelating ïon metel a ddefnyddir yn y toddiant cadw firws yn defnyddio halwynau EDTA (fel asid dipotasiwm ethylenediaminetetraacetig, asid disodiwm ethylenediaminetetraacetig, ac ati), ac ni argymhellir defnyddio heparin (fel heparin sodiwm.
3. Tiwb Cadwraeth: Dylid dewis deunydd y tiwb cadwraeth yn ofalus. Mae yna ddata sy'n awgrymu bod polypropylen (polypropylen) yn gysylltiedig ag arsugniad asid niwclëig, yn enwedig ar grynodiad ïon tensiwn uchel, mae polyethylen (polyethylen) yn fwy ffafriol na polypropylen (polypropylen) hawdd ei amgyffred DNA/RNA. Mae plastig polymer polyethylen-propylen (polyallomer) a rhai cynwysyddion plastig polypropylen (polypropylen) wedi'u prosesu'n arbennig yn fwy addas ar gyfer storio DNA/RNA. Yn ogystal, wrth ddefnyddio swab y gellir ei dorri, dylai'r tiwb storio geisio dewis cynhwysydd ag uchder sy'n fwy nag 8 cm i atal y cynnwys rhag cael ei dasgu a'i halogi pan fydd y swab wedi torri.
4. Dŵr ar gyfer Datrysiad Cadw Cynhyrchu: Dylid hidlo'r dŵr ultrapure a ddefnyddir ar gyfer toddiant cadw cynhyrchu trwy bilen ultrafiltration gyda phwysau moleciwlaidd o 13,000 i sicrhau bod amhureddau polymer yn tynnu o ffynonellau biolegol, megis RNase, DNase, ac endotoxin, ac ni argymhellir puro puro cyffredin. Dŵr neu ddŵr distyll.
2. Defnyddio tiwbiau samplu firws
Mae samplu gan ddefnyddio'r tiwb samplu firws wedi'i rannu'n bennaf yn samplu oropharyngeal a samplu nasopharyngeal:
1. Samplu Oropharyngeal: Yn gyntaf, pwyswch y tafod â iselder y tafod, yna ymestyn pen y swab samplu i'r gwddf i sychu'r tonsiliau pharyngeal dwyochrog a'r wal pharyngeal posterior, a sychu'r wal pharyngeal posterior â grym ysgafn, osgoi cyffwrdd â'r uned dafod.
2. Nasopharyngeal sampling: measure the distance from the tip of the nose to the ear lobe with a swab and mark with a finger, insert the sampling swab into the nasal cavity in the direction of the vertical nose (face), the swab should extend at least half the length of the ear lobe to the tip of the nose, Leave the swab in the nose for 15-30 seconds, gently rotate 3-5 times, and withdraw y swab.
Nid yw'n anodd gweld o'r dull defnyddio, p'un a yw'n swab oropharyngeal neu'n swab nasopharyngeal, mae samplu yn dasg dechnegol, sy'n anodd ac yn halogedig. Mae ansawdd y sampl a gasglwyd yn uniongyrchol gysylltiedig â'r canfod dilynol. Os oes gan y sampl a gasglwyd lwyth firaol isel, hawdd ei achosi negatifau ffug, mae'n anodd cadarnhau'r diagnosis.
Amser Post: Mehefin-21-2020
