1. Ynglŷn â gweithgynhyrchu tiwbiau samplu firws
Mae tiwbiau samplu firws yn perthyn i gynhyrchion dyfeisiau meddygol. Mae'r rhan fwyaf o weithgynhyrchwyr domestig wedi'u cofrestru yn ôl y cynhyrchion o'r radd flaenaf, ac ychydig o gwmnïau sydd wedi'u cofrestru yn ôl y cynhyrchion ail ddosbarth. Yn ddiweddar, er mwyn diwallu anghenion brys Wuhan a lleoedd eraill, mae llawer o gwmnïau wedi cymryd y “sianel frys” “Gwneud cais am ganiatâd record o’r radd flaenaf. Mae'r tiwb samplu firws yn cynnwys swab samplu, datrysiad cadw firws a phecynnu allanol. Gan nad oes safon genedlaethol unedig na safon diwydiant, mae cynhyrchion gwahanol weithgynhyrchwyr yn amrywio'n fawr.
1. Swab samplu: Mae'r swab samplu yn cysylltu'n uniongyrchol â'r safle samplu, ac mae deunydd y pen samplu yn gysylltiedig yn agos â'r canfod dilynol. Dylai'r pen swab samplu gael ei wneud o ffibr synthetig Polyester (PE) neu Rayon (ffibr o waith dyn). Ni ellir defnyddio sbwng alginad calsiwm neu swabiau ffon bren (gan gynnwys ffyn bambŵ), ac ni all deunydd y pen swab fod yn gynhyrchion cotwm. Oherwydd bod gan ffibr cotwm arsugniad cryf o brotein, nid yw'n hawdd elutio i'r datrysiad storio dilynol; a phan fydd ffon bren neu ffon bambŵ sy'n cynnwys alginad calsiwm a chydrannau pren yn cael ei dorri, bydd socian yn yr ateb storio hefyd yn arsugniad protein, a hyd yn oed bydd yn gallu atal yr adwaith PCR dilynol. Argymhellir defnyddio ffibrau synthetig fel ffibr PE, ffibr polyester a ffibr polypropylen ar gyfer deunydd y pen swab. Nid yw ffibrau naturiol fel cotwm yn cael eu hargymell. Nid yw ffibrau neilon hefyd yn cael eu hargymell oherwydd bod ffibrau neilon (tebyg i bennau brws dannedd) yn amsugno dŵr. Gwael, gan arwain at gyfaint samplu annigonol, sy'n effeithio ar y gyfradd ganfod. Gwaherddir sbwng alginad calsiwm ar gyfer samplu deunydd swab! Mae gan handlen swab ddau fath: wedi torri ac adeiledig. Rhoddir y swab wedi'i dorri yn y tiwb storio ar ôl samplu, ac mae'r cap tiwb yn cael ei dorri ar ôl cael ei dorri o'r safle ger y pen samplu; mae'r swab adeiledig yn rhoi'r swab samplu yn uniongyrchol i'r tiwb storio ar ôl ei samplu, ac mae'r gorchudd tiwb tiwb storio wedi'i adeiladu yn Alinio'r twll bach â phen y handlen a thynhau'r clawr tiwb. O gymharu'r ddau ddull, mae'r olaf yn gymharol ddiogel. Pan ddefnyddir y swab wedi'i dorri ar y cyd â thiwb storio maint llai, gall achosi hylif yn tasgu yn y tiwb pan gaiff ei dorri, a dylid rhoi sylw llawn i'r risg o halogiad a achosir gan ddefnydd amhriodol o'r cynnyrch. Argymhellir defnyddio tiwb allwthiol polystyren (PS) gwag neu diwb crychu pigiad polypropylen (PP) ar gyfer deunydd handlen y swab. Ni waeth pa ddeunydd a ddefnyddir, ni ellir ychwanegu ychwanegion alginad calsiwm; ffyn pren neu ffyn bambŵ. Yn fyr, dylai'r swab samplu sicrhau faint o samplu a faint o ryddhad, ac ni ddylai'r deunyddiau a ddewiswyd fod â sylweddau sy'n effeithio ar brofion dilynol.
2. Datrysiad cadw firws: Mae dau fath o atebion cadw firws yn cael eu defnyddio'n eang yn y farchnad, mae un yn ateb cynnal a chadw firws wedi'i addasu yn seiliedig ar y cyfrwng cludo, a'r llall yn ddatrysiad wedi'i addasu ar gyfer echdynnu asid niwclëig lysate.
Prif gydran y cyntaf yw cyfrwng diwylliant sylfaenol Eagle (MEM) neu halen cytbwys Hank, sy'n cael ei ychwanegu gyda'r halwynau, asidau amino, fitaminau, glwcos a phrotein sy'n angenrheidiol ar gyfer goroesi firws. Mae'r ateb storio hwn yn defnyddio halen sodiwm coch ffenol fel dangosydd a datrysiad. Pan fydd y gwerth pH yn 6.6-8.0, mae'r ateb yn binc. Mae'r glwcos, L-glutamin a phrotein angenrheidiol yn cael eu hychwanegu at yr hydoddiant cadw. Darperir y protein ar ffurf serwm buchol ffetws neu albwmin serwm buchol, a all sefydlogi plisgyn protein y firws. Oherwydd bod yr hydoddiant cadwraeth yn gyfoethog o faetholion, mae'n ffafriol i oroesiad y firws ond hefyd yn fuddiol i dwf bacteria. Os yw'r hydoddiant cadw wedi'i halogi â bacteria, bydd yn lluosi mewn symiau mawr. Bydd y carbon deuocsid yn ei metabolion yn achosi i'r hydoddiant cadw pH ostwng o pinc Troi'n felyn. Felly, mae'r rhan fwyaf o weithgynhyrchwyr wedi ychwanegu cynhwysion gwrthfacterol at eu fformwleiddiadau. Yr asiantau gwrthfacterol a argymhellir yw penisilin, streptomycin, gentamicin a polymyxin B. Nid yw sodiwm azide a 2-methyl yn atalyddion fel 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) a 5-chloro-2-methyl-4 -isothiazolin-3-one (CMCI) oherwydd bod y cydrannau hyn yn cael effaith ar yr adwaith PCR. Gan mai firws byw yw'r sampl a ddarperir gan yr ateb cadw hwn yn y bôn, gellir cadw gwreiddioldeb y sampl i'r graddau mwyaf, a gellir ei ddefnyddio nid yn unig ar gyfer echdynnu a chanfod asidau niwclëig firws, ond hefyd ar gyfer tyfu a thyfu. ynysu firysau. Fodd bynnag, dylid nodi, pan gaiff ei ddefnyddio ar gyfer canfod, bod yn rhaid echdynnu a phuro asid niwclëig ar ôl anactifadu.
Math arall o ateb cadw a baratowyd yn seiliedig ar lysate echdynnu asid niwclëig, y prif gydrannau yw halwynau cytbwys, asiant chelating EDTA, halen guanidine (fel isothiocyanate guanidine, hydroclorid guanidine, ac ati), syrffactydd anionig (fel dodecane Sodiwm sylffad), cationic syrffactyddion (fel tetradecyltrimethylammonium oxalate), ffenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K a chydrannau eraill, Yr ateb storio hwn yw hollti'r firws yn uniongyrchol i ryddhau'r asid niwclëig a dileu'r RNase. Os caiff ei ddefnyddio ar gyfer RT-PCR yn unig, mae'n fwy addas, ond gall y lysate anactifadu'r firws. Ni ellir defnyddio'r math hwn o sampl ar gyfer gwahanu diwylliant firws.
Argymhellir defnyddio'r asiant chelating ïon metel a ddefnyddir yn yr ateb cadw firws i ddefnyddio halwynau EDTA (fel asid dipotasiwm ethylenediaminetetraacetig, asid ethylenediaminetetraacetic disodium, ac ati), ac ni argymhellir defnyddio heparin (fel sodiwm heparin, heparin lithiwm), er mwyn peidio ag effeithio ar ganfod PCR.
3. tiwb cadw: Dylid dewis deunydd y tiwb cadw yn ofalus. Mae data'n awgrymu bod polypropylen (Polypropylen) yn gysylltiedig ag arsugniad asid niwclëig, yn enwedig ar grynodiad ïon tensiwn uchel, mae polyethylen (Polyethylen) yn fwy ffafriol na polypropylen (Polypropylen) Hawdd i'w amgyffred DNA / RNA. Mae plastig polyethylen-propylen polymer (Polyallomer) a rhai cynwysyddion plastig polypropylen (Polypropylen) wedi'u prosesu'n arbennig yn fwy addas ar gyfer storio DNA / RNA. Yn ogystal, wrth ddefnyddio swab y gellir ei dorri, dylai'r tiwb storio geisio dewis cynhwysydd ag uchder mwy nag 8 cm i atal y cynnwys rhag cael ei dasgu a'i halogi pan fydd y swab wedi'i dorri.
4. Dŵr ar gyfer toddiant cadwraeth cynhyrchu: Dylid hidlo'r dŵr ultrapure a ddefnyddir ar gyfer toddiant cadwraeth cynhyrchu trwy bilen ultrafiltration â phwysau moleciwlaidd o 13,000 i sicrhau bod amhureddau polymer yn cael eu tynnu o ffynonellau biolegol, megis RNase, DNase, ac endotoxin, a ni argymhellir puro arferol. Dŵr neu ddŵr distyll.
2. Defnyddio tiwbiau samplu firws
Rhennir samplu gan ddefnyddio'r tiwb samplu firws yn bennaf yn samplu oroffaryngeal a samplu nasopharyngeal:
1. Samplu oroffaryngeal: Yn gyntaf pwyswch y tafod gyda'r iselydd tafod, yna estynnwch ben y swab samplu i'r gwddf i sychu'r tonsiliau pharyngeal dwyochrog a wal pharyngeal posterior, a sychwch y wal pharyngeal posterior gyda grym ysgafn, osgoi cyffwrdd â'r tafod. uned.
2. Samplu nasopharyngeal: mesurwch y pellter o flaen y trwyn i'r lobe clust gyda swab a'i farcio â bys, mewnosodwch y swab samplu i'r ceudod trwynol i gyfeiriad y trwyn fertigol (wyneb), dylai'r swab ymestyn o leiaf hanner hyd y llabed clust i flaen y trwyn, Gadewch y swab yn y trwyn am 15-30 eiliad, cylchdroi yn ysgafn 3-5 gwaith, a thynnu'r swab.
Nid yw'n anodd gweld o'r dull defnyddio, boed yn swab oropharyngeal neu swab nasopharyngeal, mae samplu yn dasg dechnegol, sy'n anodd ac yn halogedig. Mae ansawdd y sampl a gasglwyd yn uniongyrchol gysylltiedig â'r canfod dilynol. Os oes gan y sampl a gasglwyd lwyth firaol Isel, hawdd achosi negatifau ffug, anodd cadarnhau'r diagnosis.
Amser postio: Mehefin-21-2020
