1. Sobre a fabricación de tubos de mostraxe de virus
Os tubos de mostraxe de virus pertencen a produtos de dispositivos médicos. A maioría dos fabricantes domésticos están rexistrados segundo os produtos de primeira clase e poucas empresas están rexistradas segundo os produtos de segunda clase. Recentemente, para satisfacer as necesidades de emerxencia de Wuhan e outros lugares, moitas empresas tomaron a "canle de emerxencia" "Solicitar o permiso de rexistro de primeira clase.
1. Stone de mostraxe: o tamaño de mostraxe contacta directamente co sitio de mostraxe e o material da cabeza de mostraxe está intimamente relacionado coa detección posterior. A cabeza de tampón debe estar feita de fibra sintética de poliéster (PE) ou rayón (fibra feita polo home). Non se poden usar a esponxa de alginato de calcio ou os cotonetes de pau de madeira (incluídos os paus de bambú) e o material da cabeza non pode ser produtos de algodón. Debido a que a fibra de algodón ten unha forte adsorción de proteínas, non é fácil elutar na solución de almacenamento posterior; E cando se rompe un pau de madeira ou un pau de bambú que contén alginato de calcio e compoñentes de madeira, empaparse na solución de almacenamento tamén adsorbirá a proteína, e incluso pode inhibir a reacción posterior de PCR. Recoméndase empregar fibras sintéticas como fibra PE, fibra de poliéster e fibra de polipropileno para o material da cabeza. Non se recomenda fibras naturais como o algodón. Tampouco se recomenda fibras de nylon porque as fibras de nylon (similares ás cabezas do cepillo de dentes) absorben a auga. Pobre, obtendo un volume de mostraxe insuficiente, afectando a taxa de detección. Está prohibida a esponxa de alginato de calcio por mostras de material de tampón. O mango do hisopo ten dous tipos: roto e incorporado. O tampón roto colócase no tubo de almacenamento despois da mostraxe, e a tapa do tubo rompe despois de romperse da posición preto da cabeza de mostraxe; O tampón incorporado coloca directamente o cotonete no tubo de almacenamento despois da mostraxe, e a tapa do tubo de almacenamento está construída en aliñar o pequeno burato coa parte superior do mango e apertar a tapa do tubo. Comparando os dous métodos, este último é relativamente seguro. Cando o tampón roto se usa xunto cun tubo de almacenamento de tamaño menor, pode causar salpicaduras líquidas no tubo cando se rompe e debe prestarlle unha atención completa ao risco de contaminación causada polo uso inadecuado do produto. Recoméndase empregar tubo extruído de poliestireno oco (PS) ou tubo de inxección de inxección de polipropileno (PP) para o material do mango do hisopo. Non importa o material que se use, non se poden engadir aditivos de alginato de calcio; Patas de madeira ou paus de bambú. En resumo, o tamaño de mostraxe debe asegurar a cantidade de mostraxe e a cantidade de liberación, e os materiais seleccionados non deben ter substancias que afecten a probas posteriores.
2. Solución de conservación do virus: Hai dous tipos de solucións de conservación de virus moi utilizadas no mercado, unha é unha solución de mantemento de virus modificada en función do medio de transporte, e a outra é unha solución modificada para o lisato de extracción de ácido nucleico.
O compoñente principal do primeiro é o medio de cultura básica de Eagle (MEM) ou o sal equilibrado de Hank, que se engade coas sales, aminoácidos, vitaminas, glicosa e proteína necesaria para a supervivencia do virus. Esta solución de almacenamento usa sal de sodio vermello fenol como indicador e solución. Cando o valor de pH é 6,6-8,0, a solución é rosa. A solución de conservación engádese a glicosa, a glutamina e a proteína necesaria. A proteína ofrécese en forma de soro bovino fetal ou albúmina sérica bovina, que pode estabilizar a cuncha proteica do virus. Debido a que a solución de conservación é rica en nutrientes, é propicio para a supervivencia do virus, pero tamén beneficioso para o crecemento das bacterias. Se a solución de conservación está contaminada con bacterias, multiplicarase en grandes cantidades. O dióxido de carbono nos seus metabolitos fará que a solución de preservación do pH caia do rosa de cor amarela. Polo tanto, a maioría dos fabricantes engadiron ingredientes antibacterianos ás súas formulacións. Os axentes antibacterianos recomendados son penicilina, estreptomicina, gentamicina e polimixina B. Azida sódica e 2-metil non son inhibidores recomendados como 4-metil-4-isotiazolina-3-one (MCI) e 5-cloro-2-metil-4-isotiazolin-3 (cmci) a estes componentes. reacción. Dado que a mostra proporcionada por esta solución de conservación é basicamente un virus vivo, a orixinalidade da mostra pódese manter en maior medida, e pódese usar non só para a extracción e detección de ácidos nucleicos do virus, senón tamén para o cultivo e o illamento de virus. Non obstante, cabe sinalar que cando se usa para a detección, a extracción e a purificación do ácido nucleico deben realizarse despois da inactivación.
Outro tipo de solución de preservación preparada baseada no lisato de extracción de ácido nucleico, os compoñentes principais son sales equilibradas, axente quelante EDTA, sal guanidina (como isotiocianato de guanidina, clorhidrato de guanidina, etc.), turfactantes aniónicos (como o sulfato de dodecane), o turfactante aniónico (como como o sulfato de dodecane), como o turfactante cationico (como como como como como como como como un turfactante cationico (como como como como como como o como o cationico (como como como como o como o cationico. Oxalato de tetradeciltrimetilamonio), fenol, 8-hidroxquinolina, ditiotreitol (DTT), proteína K e outros compoñentes, esta solución de almacenamento é frear directamente o virus para liberar o ácido nucleico e eliminar a RNase. Se só se usa para RT-PCR, é máis adecuado, pero o lisato pode inactivar o virus. Este tipo de mostra non se pode usar para a separación do cultivo de virus.
Recoméndase o axente quelante de ións metálicos usado na solución de conservación do virus para usar sales EDTA (como o ácido etilendiametaminetetraacético de Dipotassium, o ácido etilendiametaminetetraacético de disodio, etc.), e non se recomenda usar heparina (como heparina de sodio, litio heparina), polo que non afecta a detección de pcr..
3. Tubo de conservación: o material do tubo de conservación debe seleccionarse con coidado. Hai datos que suxiren que o polipropileno (polipropileno) está relacionado coa adsorción de ácido nucleico, especialmente coa concentración de ión de alta tensión, o polietileno (polietileno) é máis preferido que o polipropileno (polipropileno) fácil de comprender o ADN/ARN. O plástico de polietileno-propileno (polialomero) de plástico e algúns envases de plástico de polipropileno (polipropileno) especialmente procesados son máis adecuados para o almacenamento de ADN/ARN. Ademais, cando se usa un cotonete rompible, o tubo de almacenamento debería intentar seleccionar un recipiente cunha altura superior a 8 cm para evitar que o contido estea salpicado e contaminado cando se rompe o tampón.
4. A auga para a solución de conservación da produción: a auga ultrapura empregada para a solución de conservación da produción debe filtrarse a través dunha membrana de ultrafiltración cun peso molecular de 13.000 para garantir a eliminación de impurezas de polímeros de fontes biolóxicas, como RNase, DNase e endotoxina, e a purificación común. Auga ou auga destilada.
2. Uso de tubos de mostraxe de virus
A mostraxe mediante o tubo de mostraxe de virus divídese principalmente en mostraxe orofaríngea e mostraxe nasofaríngea:
1. Mostraxe orofaringe: Primeiro prema a lingua co depresor da lingua e, a continuación, estende a cabeza do cotelo de mostraxe na gorxa para limpar as amígdalas faríngicas bilaterais e a parede faríngea posterior e limpar a parede farínxica posterior con forza de luz, evitar a unidade de linguaxe.
. retirar o cotonete.
Non é difícil ver no método de uso, xa sexa un hisopo orofaringe ou un hisopo nasofarínge, a mostraxe é unha tarefa técnica, difícil e contaminada. A calidade da mostra recollida está directamente relacionada coa detección posterior. Se a mostra recollida ten unha carga viral baixa, fácil de causar falsos negativos, difícil de confirmar o diagnóstico.
Tempo de publicación: xuño-21-2020