વાયરસ સેમ્પલિંગ ટ્યુબ પર કેટલાક વિચારો

૧. વાયરસ સેમ્પલિંગ ટ્યુબના ઉત્પાદન વિશે
વાયરસ સેમ્પલિંગ ટ્યુબ મેડિકલ ડિવાઇસ પ્રોડક્ટ્સમાંથી આવે છે. મોટાભાગના સ્થાનિક ઉત્પાદકો પ્રથમ-વર્ગના ઉત્પાદનો અનુસાર નોંધાયેલા છે, અને થોડી કંપનીઓ બીજા-વર્ગના ઉત્પાદનો અનુસાર નોંધાયેલા છે. તાજેતરમાં, વુહાન અને અન્ય સ્થળોની કટોકટીની જરૂરિયાતોને પહોંચી વળવા માટે, ઘણી કંપનીઓએ "ઇમરજન્સી ચેનલ" "પ્રથમ-વર્ગના રેકોર્ડ પરવાનગી માટે અરજી કરો" અપનાવી છે. વાયરસ સેમ્પલિંગ ટ્યુબ સેમ્પલિંગ સ્વેબ, વાયરસ સંરક્ષણ સોલ્યુશન અને બાહ્ય પેકેજિંગથી બનેલી છે. કોઈ એકીકૃત રાષ્ટ્રીય ધોરણ અથવા ઉદ્યોગ ધોરણ ન હોવાથી, વિવિધ ઉત્પાદકોના ઉત્પાદનો મોટા પ્રમાણમાં બદલાય છે.

1. સેમ્પલિંગ સ્વેબ: સેમ્પલિંગ સ્વેબ સીધો સેમ્પલિંગ સાઇટનો સંપર્ક કરે છે, અને સેમ્પલિંગ હેડની સામગ્રી અનુગામી શોધ સાથે ગાઢ રીતે સંબંધિત છે. સેમ્પલિંગ સ્વેબ હેડ પોલિએસ્ટર (PE) સિન્થેટિક ફાઇબર અથવા રેયોન (માનવસર્જિત ફાઇબર) નું બનેલું હોવું જોઈએ. કેલ્શિયમ અલ્જીનેટ સ્પોન્જ અથવા લાકડાની લાકડીના સ્વેબ (વાંસની લાકડીઓ સહિત) નો ઉપયોગ કરી શકાતો નથી, અને સ્વેબ હેડની સામગ્રી કપાસના ઉત્પાદનો હોઈ શકતી નથી. કારણ કે કોટન ફાઇબરમાં પ્રોટીનનું મજબૂત શોષણ હોય છે, તે પછીના સ્ટોરેજ સોલ્યુશનમાં પ્રવેશવું સરળ નથી; અને જ્યારે કેલ્શિયમ અલ્જીનેટ અને લાકડાના ઘટકો ધરાવતી લાકડાની લાકડી અથવા વાંસની લાકડી તૂટી જાય છે, ત્યારે સ્ટોરેજ સોલ્યુશનમાં પલાળવાથી પ્રોટીન પણ શોષાય છે, અને તે પછીની PCR પ્રતિક્રિયાને પણ અટકાવી શકે છે. સ્વેબ હેડની સામગ્રી માટે PE ફાઇબર, પોલિએસ્ટર ફાઇબર અને પોલીપ્રોપીલીન ફાઇબર જેવા કૃત્રિમ ફાઇબરનો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે. કપાસ જેવા કુદરતી ફાઇબરની ભલામણ કરવામાં આવતી નથી. નાયલોન ફાઇબરની પણ ભલામણ કરવામાં આવતી નથી કારણ કે નાયલોન ફાઇબર (ટૂથબ્રશ હેડ જેવા) પાણીને શોષી લે છે. ખરાબ, પરિણામે અપૂરતી સેમ્પલિંગ વોલ્યુમ થાય છે, જે શોધ દરને અસર કરે છે. કેલ્શિયમ અલ્જીનેટ સ્પોન્જ સ્વેબ સામગ્રીના નમૂના લેવા માટે પ્રતિબંધિત છે! સ્વેબ હેન્ડલ બે પ્રકારના હોય છે: તૂટેલા અને બિલ્ટ-ઇન. સેમ્પલિંગ પછી તૂટેલા સ્વેબને સ્ટોરેજ ટ્યુબમાં મૂકવામાં આવે છે, અને સેમ્પલિંગ હેડની નજીકની સ્થિતિથી તૂટ્યા પછી ટ્યુબ કેપ તૂટી જાય છે; બિલ્ટ-ઇન સ્વેબ સેમ્પલિંગ પછી સેમ્પલિંગ સ્વેબને સીધા સ્ટોરેજ ટ્યુબમાં મૂકે છે, અને સ્ટોરેજ ટ્યુબ ટ્યુબ કવર હેન્ડલની ટોચ સાથે નાના છિદ્રને સંરેખિત કરો અને ટ્યુબ કવરને કડક કરો. બે પદ્ધતિઓની તુલના કરીએ તો, બાદમાં પ્રમાણમાં સલામત છે. જ્યારે તૂટેલા સ્વેબનો ઉપયોગ નાના કદના સ્ટોરેજ ટ્યુબ સાથે કરવામાં આવે છે, ત્યારે તે તૂટવા પર ટ્યુબમાં પ્રવાહી છાંટાનું કારણ બની શકે છે, અને ઉત્પાદનના અયોગ્ય ઉપયોગને કારણે દૂષણના જોખમ પર સંપૂર્ણ ધ્યાન આપવું જોઈએ. સ્વેબ હેન્ડલની સામગ્રી માટે હોલો પોલિસ્ટરીન (PS) એક્સટ્રુડેડ ટ્યુબ અથવા પોલીપ્રોપીલીન (PP) ઇન્જેક્શન ક્રીઝિંગ ટ્યુબનો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે. ગમે તે સામગ્રીનો ઉપયોગ કરવામાં આવે, કેલ્શિયમ અલ્જીનેટ એડિટિવ્સ ઉમેરી શકાતા નથી; લાકડાની લાકડીઓ અથવા વાંસની લાકડીઓ. ટૂંકમાં, સેમ્પલિંગ સ્વેબમાં સેમ્પલિંગની માત્રા અને રિલીઝની માત્રાની ખાતરી કરવી જોઈએ, અને પસંદ કરેલી સામગ્રીમાં એવા પદાર્થો ન હોવા જોઈએ જે અનુગામી પરીક્ષણને અસર કરે.

2. વાયરસ જાળવણી સોલ્યુશન: બજારમાં બે પ્રકારના વાયરસ જાળવણી સોલ્યુશનનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે, એક પરિવહન માધ્યમના આધારે સુધારેલ વાયરસ જાળવણી સોલ્યુશન છે, અને બીજું ન્યુક્લિક એસિડ નિષ્કર્ષણ લાયસેટ માટે સુધારેલ સોલ્યુશન છે.
પહેલાનું મુખ્ય ઘટક ઇગલનું બેઝિક કલ્ચર મીડિયમ (MEM) અથવા હેન્કનું સંતુલિત મીઠું છે, જે વાયરસના અસ્તિત્વ માટે જરૂરી ક્ષાર, એમિનો એસિડ, વિટામિન, ગ્લુકોઝ અને પ્રોટીન સાથે ઉમેરવામાં આવે છે. આ સંગ્રહ દ્રાવણમાં ફિનોલ લાલ સોડિયમ મીઠું સૂચક અને દ્રાવણ તરીકે વપરાય છે. જ્યારે pH મૂલ્ય 6.6-8.0 હોય છે, ત્યારે દ્રાવણ ગુલાબી રંગનું હોય છે. જરૂરી ગ્લુકોઝ, L-ગ્લુટામાઇન અને પ્રોટીન પ્રિઝર્વેશન દ્રાવણમાં ઉમેરવામાં આવે છે. પ્રોટીન ફેટલ બોવાઇન સીરમ અથવા બોવાઇન સીરમ આલ્બ્યુમિનના સ્વરૂપમાં પૂરું પાડવામાં આવે છે, જે વાયરસના પ્રોટીન શેલને સ્થિર કરી શકે છે. કારણ કે પ્રિઝર્વેશન દ્રાવણ પોષક તત્વોથી ભરપૂર છે, તે વાયરસના અસ્તિત્વ માટે અનુકૂળ છે પણ બેક્ટેરિયાના વિકાસ માટે પણ ફાયદાકારક છે. જો પ્રિઝર્વેશન દ્રાવણ બેક્ટેરિયાથી દૂષિત હોય, તો તે મોટી માત્રામાં ગુણાકાર કરશે. તેના મેટાબોલાઇટ્સમાં કાર્બન ડાયોક્સાઇડ પ્રિઝર્વેશન દ્રાવણના pHને ગુલાબી રંગથી પીળો કરી દેશે. તેથી, મોટાભાગના ઉત્પાદકોએ તેમના ફોર્મ્યુલેશનમાં એન્ટીબેક્ટેરિયલ ઘટકો ઉમેર્યા છે. ભલામણ કરાયેલા એન્ટીબેક્ટેરિયલ એજન્ટો પેનિસિલિન, સ્ટ્રેપ્ટોમાસીન, જેન્ટામિસિન અને પોલિમિક્સિન બી છે. સોડિયમ એઝાઇડ અને 2-મિથાઈલ 4-મિથાઈલ-4-આઇસોથિયાઝોલિન-3-વન (MCI) અને 5-ક્લોરો-2-મિથાઈલ-4-આઇસોથિયાઝોલિન-3-વન (CMCI) જેવા અવરોધકોની ભલામણ કરવામાં આવતી નથી કારણ કે આ ઘટકો PCR પ્રતિક્રિયા પર અસર કરે છે. આ જાળવણી દ્રાવણ દ્વારા આપવામાં આવેલ નમૂના મૂળભૂત રીતે જીવંત વાયરસ હોવાથી, નમૂનાની મૌલિકતા મહત્તમ હદ સુધી રાખી શકાય છે, અને તેનો ઉપયોગ ફક્ત વાયરસ ન્યુક્લિક એસિડના નિષ્કર્ષણ અને શોધ માટે જ નહીં, પરંતુ વાયરસના સંવર્ધન અને અલગતા માટે પણ થઈ શકે છે. જો કે, એ નોંધવું જોઈએ કે જ્યારે શોધ માટે ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, ત્યારે નિષ્ક્રિયતા પછી ન્યુક્લિક એસિડ નિષ્કર્ષણ અને શુદ્ધિકરણ કરવું આવશ્યક છે.
ન્યુક્લિક એસિડ નિષ્કર્ષણ લાયસેટ પર આધારિત અન્ય પ્રકારનું જાળવણી દ્રાવણ, મુખ્ય ઘટકો સંતુલિત ક્ષાર, EDTA ચેલેટીંગ એજન્ટ, ગુઆનિડાઇન મીઠું (જેમ કે ગુઆનિડાઇન આઇસોથિઓસાયનેટ, ગુઆનિડાઇન હાઇડ્રોક્લોરાઇડ, વગેરે), એનિઓનિક સર્ફેક્ટન્ટ (જેમ કે ડોડેકેન સોડિયમ સલ્ફેટ), કેશનિક સર્ફેક્ટન્ટ્સ (જેમ કે ટેટ્રાડેસિલટ્રાઇમિથિલેમોનિયમ ઓક્સાલેટ), ફિનોલ, 8-હાઇડ્રોક્સીક્વિનોલિન, ડિથિઓથ્રેઇટોલ (DTT), પ્રોટીનેઝ K અને અન્ય ઘટકો છે. આ સંગ્રહ દ્રાવણ ન્યુક્લિક એસિડ મુક્ત કરવા અને RNase ને દૂર કરવા માટે વાયરસને સીધા જ તોડવા માટે છે. જો ફક્ત RT-PCR માટે ઉપયોગ કરવામાં આવે, તો તે વધુ યોગ્ય છે, પરંતુ લાયસેટ વાયરસને નિષ્ક્રિય કરી શકે છે. આ પ્રકારના નમૂનાનો ઉપયોગ વાયરસ સંસ્કૃતિ અલગ કરવા માટે કરી શકાતો નથી.

વાયરસ પ્રિઝર્વેશન સોલ્યુશનમાં વપરાતા મેટલ આયન ચેલેટીંગ એજન્ટને EDTA ક્ષાર (જેમ કે ડીપોટેશિયમ એથિલેનેડીઆમાઇનટેટ્રાએસેટિક એસિડ, ડિસોડિયમ એથિલેનેડીઆમાઇનટેટ્રાએસેટિક એસિડ, વગેરે) નો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે, અને પીસીઆર શોધને અસર ન થાય તે માટે હેપરિન (જેમ કે સોડિયમ હેપરિન, લિથિયમ હેપરિન) નો ઉપયોગ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવતી નથી.
૩. પ્રિઝર્વેશન ટ્યુબ: પ્રિઝર્વેશન ટ્યુબની સામગ્રી કાળજીપૂર્વક પસંદ કરવી જોઈએ. એવા ડેટા છે જે સૂચવે છે કે પોલીપ્રોપીલીન (પોલીપ્રોપીલીન) ન્યુક્લિક એસિડના શોષણ સાથે સંબંધિત છે, ખાસ કરીને ઉચ્ચ તાણ આયન સાંદ્રતા પર, પોલીપ્રોપીલીન (પોલીપ્રોપીલીન) કરતાં પોલીપ્રોપીલીન (પોલીપ્રોપીલીન) વધુ પસંદ કરવામાં આવે છે. ડીએનએ/આરએનએને સરળતાથી પકડી શકાય છે. પોલીપ્રોપીલીન-પોલીપ્રોપીલીન પોલિમર (પોલીપ્રોપીલીન) પ્લાસ્ટિક અને કેટલાક ખાસ પ્રોસેસ્ડ પોલીપ્રોપીલીન (પોલીપ્રોપીલીન) પ્લાસ્ટિક કન્ટેનર ડીએનએ/આરએનએ સંગ્રહ માટે વધુ યોગ્ય છે. વધુમાં, ભાંગી શકાય તેવા સ્વેબનો ઉપયોગ કરતી વખતે, સ્ટોરેજ ટ્યુબે 8 સે.મી.થી વધુ ઊંચાઈવાળા કન્ટેનર પસંદ કરવાનો પ્રયાસ કરવો જોઈએ જેથી સ્વેબ તૂટે ત્યારે સામગ્રી છાંટા ન પડે અને દૂષિત ન થાય.

4. ઉત્પાદન જાળવણી દ્રાવણ માટે પાણી: ઉત્પાદન જાળવણી દ્રાવણ માટે વપરાતા અલ્ટ્રાપ્યોર પાણીને 13,000 ના પરમાણુ વજનવાળા અલ્ટ્રાફિલ્ટરેશન મેમ્બ્રેન દ્વારા ફિલ્ટર કરવું જોઈએ જેથી RNase, DNase અને એન્ડોટોક્સિન જેવા જૈવિક સ્ત્રોતોમાંથી પોલિમર અશુદ્ધિઓ દૂર થાય અને સામાન્ય શુદ્ધિકરણની ભલામણ કરવામાં આવતી નથી. પાણી અથવા નિસ્યંદિત પાણી.

2. વાયરસ સેમ્પલિંગ ટ્યુબનો ઉપયોગ

વાયરસ સેમ્પલિંગ ટ્યુબનો ઉપયોગ કરીને નમૂના લેવાનું મુખ્યત્વે ઓરોફેરિંજલ સેમ્પલિંગ અને નેસોફેરિંજલ સેમ્પલિંગમાં વિભાજિત થાય છે:

1. ઓરોફેરિંજલ સેમ્પલિંગ: પહેલા જીભને જીભ ડિપ્રેસરથી દબાવો, પછી સેમ્પલિંગ સ્વેબના માથાને ગળામાં લંબાવો જેથી દ્વિપક્ષીય ફેરીંજલ કાકડા અને પશ્ચાદવર્તી ફેરીંજલ દિવાલ સાફ થાય, અને પશ્ચાદવર્તી ફેરીંજલ દિવાલને હળવા બળથી સાફ કરો, જીભ એકમને સ્પર્શ કરવાનું ટાળો.

2. નાસોફેરિંજલ સેમ્પલિંગ: નાકના છેડાથી કાનના લોબ સુધીનું અંતર સ્વેબ વડે માપો અને આંગળી વડે ચિહ્નિત કરો, સેમ્પલિંગ સ્વેબને નાકના પોલાણમાં ઊભી નાક (ચહેરા) ની દિશામાં દાખલ કરો, સ્વેબ કાનના લોબની નાકની ટોચ સુધીની લંબાઈના ઓછામાં ઓછા અડધા ભાગ સુધી લંબાવવો જોઈએ, સ્વેબને નાકમાં 15-30 સેકન્ડ માટે છોડી દો, ધીમેધીમે 3-5 વખત ફેરવો, અને સ્વેબ પાછો ખેંચો.
ઉપયોગની પદ્ધતિ પરથી એ સમજવું મુશ્કેલ નથી કે તે ઓરોફેરિંજલ સ્વેબ છે કે નેસોફેરિંજલ સ્વેબ, નમૂના લેવાનું એક તકનીકી કાર્ય છે, જે મુશ્કેલ અને દૂષિત છે. એકત્રિત નમૂનાની ગુણવત્તા સીધી રીતે અનુગામી શોધ સાથે સંબંધિત છે. જો એકત્રિત નમૂનામાં વાયરલ લોડ ઓછો હોય, ખોટા નકારાત્મક પરિણામો સરળતાથી આવે, નિદાનની પુષ્ટિ કરવી મુશ્કેલ હોય.