वायरस सैंपलिंग ट्यूब पर कई विचार

1. वायरस सैंपलिंग ट्यूब के निर्माण के बारे में
वायरस सैंपलिंग ट्यूब चिकित्सा उपकरण उत्पादों से संबंधित हैं। अधिकांश घरेलू निर्माता प्रथम श्रेणी के उत्पादों के अनुसार पंजीकृत हैं, और कुछ कंपनियां द्वितीय श्रेणी के उत्पादों के अनुसार पंजीकृत हैं। हाल ही में, वुहान और अन्य स्थानों की आपातकालीन जरूरतों को पूरा करने के लिए, कई कंपनियों ने "आपातकालीन चैनल" "प्रथम श्रेणी रिकॉर्ड अनुमति के लिए आवेदन करें" लिया है। वायरस सैंपलिंग ट्यूब एक सैंपलिंग स्वैब, वायरस संरक्षण समाधान और बाहरी पैकेजिंग से बनी होती है। चूँकि कोई एकीकृत राष्ट्रीय मानक या उद्योग मानक नहीं है, विभिन्न निर्माताओं के उत्पाद बहुत भिन्न होते हैं।

1. सैंपलिंग स्वैब: सैंपलिंग स्वैब सीधे सैंपलिंग साइट से संपर्क करता है, और सैंपलिंग हेड की सामग्री बाद की पहचान से निकटता से संबंधित होती है। सैंपलिंग स्वैब हेड पॉलिएस्टर (पीई) सिंथेटिक फाइबर या रेयॉन (मानव निर्मित फाइबर) से बना होना चाहिए। कैल्शियम एल्गिनेट स्पंज या लकड़ी की छड़ी के स्वाब (बांस की छड़ियों सहित) का उपयोग नहीं किया जा सकता है, और स्वाब हेड की सामग्री कपास उत्पाद नहीं हो सकती है। क्योंकि कपास के रेशे में प्रोटीन का मजबूत अवशोषण होता है, इसलिए इसे बाद के भंडारण समाधान में शामिल करना आसान नहीं होता है; और जब कैल्शियम एल्गिनेट और लकड़ी के घटकों वाली लकड़ी की छड़ी या बांस की छड़ी टूट जाती है, तो भंडारण समाधान में भिगोने से प्रोटीन भी सोख लिया जाएगा, और यहां तक ​​कि यह बाद की पीसीआर प्रतिक्रिया को भी रोक सकता है। स्वैब हेड की सामग्री के लिए पीई फाइबर, पॉलिएस्टर फाइबर और पॉलीप्रोपाइलीन फाइबर जैसे सिंथेटिक फाइबर का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है। कपास जैसे प्राकृतिक रेशों की अनुशंसा नहीं की जाती है। नायलॉन फाइबर की भी अनुशंसा नहीं की जाती है क्योंकि नायलॉन फाइबर (टूथब्रश हेड के समान) पानी को अवशोषित करते हैं। ख़राब, जिसके परिणामस्वरूप अपर्याप्त नमूना मात्रा होती है, जिससे पता लगाने की दर प्रभावित होती है। स्वाब सामग्री के नमूने के लिए कैल्शियम एल्गिनेट स्पंज निषिद्ध है! स्वाब हैंडल दो प्रकार के होते हैं: टूटा हुआ और अंतर्निर्मित। नमूना लेने के बाद टूटे हुए स्वाब को भंडारण ट्यूब में रखा जाता है, और नमूना सिर के पास की स्थिति से टूटने के बाद ट्यूब कैप को तोड़ दिया जाता है; बिल्ट-इन स्वैब सैंपलिंग के बाद सैंपलिंग स्वैब को सीधे स्टोरेज ट्यूब में डाल देता है, और स्टोरेज ट्यूब ट्यूब कवर को हैंडल के शीर्ष के साथ छोटे छेद में संरेखित करें और ट्यूब कवर को कस लें। दोनों तरीकों की तुलना करने पर, बाद वाला अपेक्षाकृत सुरक्षित है। जब टूटे हुए स्वाब का उपयोग छोटे आकार की भंडारण ट्यूब के साथ किया जाता है, तो टूटने पर ट्यूब में तरल पदार्थ के छींटे पड़ सकते हैं, और उत्पाद के अनुचित उपयोग के कारण होने वाले संदूषण के जोखिम पर पूरा ध्यान दिया जाना चाहिए। स्वैब हैंडल की सामग्री के लिए खोखली पॉलीस्टाइनिन (पीएस) एक्सट्रूडेड ट्यूब या पॉलीप्रोपाइलीन (पीपी) इंजेक्शन क्रीजिंग ट्यूब का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है। इससे कोई फर्क नहीं पड़ता कि किस सामग्री का उपयोग किया जाता है, कैल्शियम एल्गिनेट एडिटिव्स नहीं जोड़े जा सकते; लकड़ी की छड़ें या बांस की छड़ें। संक्षेप में, नमूना स्वाब को नमूने की मात्रा और रिलीज की मात्रा सुनिश्चित करनी चाहिए, और चयनित सामग्रियों में ऐसे पदार्थ नहीं होने चाहिए जो बाद के परीक्षण को प्रभावित करते हों।

2. वायरस संरक्षण समाधान: बाजार में दो प्रकार के वायरस संरक्षण समाधान व्यापक रूप से उपयोग किए जाते हैं, एक परिवहन माध्यम के आधार पर संशोधित वायरस रखरखाव समाधान है, और दूसरा न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण लाइसेट के लिए एक संशोधित समाधान है।
पूर्व का मुख्य घटक ईगल का मूल संस्कृति माध्यम (एमईएम) या हैंक का संतुलित नमक है, जिसमें वायरस के अस्तित्व के लिए आवश्यक लवण, अमीनो एसिड, विटामिन, ग्लूकोज और प्रोटीन मिलाया जाता है। यह भंडारण समाधान एक संकेतक और समाधान के रूप में फिनोल लाल सोडियम नमक का उपयोग करता है। जब pH मान 6.6-8.0 हो तो घोल गुलाबी होता है। संरक्षण समाधान में आवश्यक ग्लूकोज, एल-ग्लूटामाइन और प्रोटीन मिलाया जाता है। प्रोटीन भ्रूण गोजातीय सीरम या गोजातीय सीरम एल्बुमिन के रूप में प्रदान किया जाता है, जो वायरस के प्रोटीन शेल को स्थिर कर सकता है। क्योंकि संरक्षण समाधान पोषक तत्वों से भरपूर है, यह वायरस के अस्तित्व के लिए अनुकूल है लेकिन बैक्टीरिया के विकास के लिए भी फायदेमंद है। यदि संरक्षण समाधान बैक्टीरिया से दूषित है, तो यह बड़ी मात्रा में गुणा हो जाएगा। इसके मेटाबोलाइट्स में मौजूद कार्बन डाइऑक्साइड संरक्षण समाधान पीएच को गुलाबी से घटाकर पीला कर देगा। इसलिए, अधिकांश निर्माताओं ने अपने फॉर्मूलेशन में जीवाणुरोधी तत्व शामिल किए हैं। अनुशंसित जीवाणुरोधी एजेंट पेनिसिलिन, स्ट्रेप्टोमाइसिन, जेंटामाइसिन और पॉलीमीक्सिन बी हैं। सोडियम एजाइड और 2-मिथाइल की सिफारिश नहीं की जाती है। 4-मिथाइल-4-आइसोथियाज़ोलिन-3-वन (एमसीआई) और 5-क्लोरो-2-मिथाइल-4 जैसे अवरोधकों की सिफारिश नहीं की जाती है। -आइसोथियाज़ोलिन-3-वन (सीएमसीआई) क्योंकि इन घटकों का पीसीआर प्रतिक्रिया पर प्रभाव पड़ता है। चूंकि इस संरक्षण समाधान द्वारा प्रदान किया गया नमूना मूल रूप से एक जीवित वायरस है, इसलिए नमूने की मौलिकता को सबसे बड़ी सीमा तक रखा जा सकता है, और इसका उपयोग न केवल वायरस न्यूक्लिक एसिड के निष्कर्षण और पता लगाने के लिए किया जा सकता है, बल्कि खेती के लिए भी किया जा सकता है। वायरस का अलगाव. हालाँकि, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि जब पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, तो न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और शुद्धिकरण निष्क्रियता के बाद किया जाना चाहिए।
न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण लाइसेट के आधार पर तैयार किया गया एक अन्य प्रकार का संरक्षण समाधान, मुख्य घटक संतुलित लवण, ईडीटीए चेलेटिंग एजेंट, गुआनिडीन नमक (जैसे गुआनिडीन आइसोथियोसाइनेट, गुआनिडीन हाइड्रोक्लोराइड, आदि), आयनिक सर्फेक्टेंट (जैसे डोडेकेन सोडियम सल्फेट), धनायनिक हैं। सर्फेक्टेंट (जैसे कि टेट्राडेसिलट्रिमिथाइलमोनियम ऑक्सालेट), फिनोल, 8-हाइड्रॉक्सीक्विनोलिन, डाइथियोथेरिटोल (डीटीटी), प्रोटीनएज़ के और अन्य घटक, यह भंडारण समाधान न्यूक्लिक एसिड को मुक्त करने और आरएनज़ को खत्म करने के लिए वायरस को सीधे विभाजित करने के लिए है। यदि केवल आरटी-पीसीआर के लिए उपयोग किया जाता है, तो यह अधिक उपयुक्त है, लेकिन लाइसेट वायरस को निष्क्रिय कर सकता है। इस प्रकार के नमूने का उपयोग वायरस कल्चर पृथक्करण के लिए नहीं किया जा सकता है।

वायरस संरक्षण समाधान में उपयोग किए जाने वाले धातु आयन चेलेटिंग एजेंट को EDTA लवण (जैसे कि डिपोटेशियम एथिलीनडायमिनेटेट्राएसेटिक एसिड, डिसोडियम एथिलीनडायमिनेटेट्राएसेटिक एसिड, आदि) का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है, और हेपरिन (जैसे सोडियम हेपरिन, लिथियम हेपरिन) का उपयोग करने की अनुशंसा नहीं की जाती है। ताकि पीसीआर जांच प्रभावित न हो।
3. संरक्षण ट्यूब: संरक्षण ट्यूब की सामग्री का चयन सावधानी से किया जाना चाहिए। ऐसे डेटा हैं जो सुझाव देते हैं कि पॉलीप्रोपाइलीन (पॉलीप्रोपाइलीन) न्यूक्लिक एसिड के सोखने से संबंधित है, विशेष रूप से उच्च तनाव आयन एकाग्रता पर, पॉलीइथाइलीन (पॉलीइथाइलीन) को पॉलीप्रोपाइलीन (पॉलीप्रोपाइलीन) की तुलना में अधिक पसंद किया जाता है, डीएनए/आरएनए को समझना आसान है। पॉलीइथाइलीन-प्रोपलीन पॉलिमर (पॉलीलोमर) प्लास्टिक और कुछ विशेष रूप से संसाधित पॉलीप्रोपाइलीन (पॉलीप्रोपाइलीन) प्लास्टिक कंटेनर डीएनए/आरएनए भंडारण के लिए अधिक उपयुक्त हैं। इसके अलावा, टूटने योग्य स्वाब का उपयोग करते समय, भंडारण ट्यूब को 8 सेमी से अधिक ऊंचाई वाले कंटेनर का चयन करने का प्रयास करना चाहिए ताकि स्वाब टूटने पर सामग्री को छिड़कने और दूषित होने से बचाया जा सके।

4. उत्पादन संरक्षण समाधान के लिए पानी: उत्पादन संरक्षण समाधान के लिए उपयोग किए जाने वाले अल्ट्राप्योर पानी को 13,000 के आणविक भार के साथ एक अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्ली के माध्यम से फ़िल्टर किया जाना चाहिए ताकि जैविक स्रोतों, जैसे कि RNase, DNase और एंडोटॉक्सिन से बहुलक अशुद्धियों को हटाया जा सके। सामान्य शुद्धिकरण की अनुशंसा नहीं की जाती है. जल या आसुत जल.

2. वायरस सैम्पलिंग ट्यूब का उपयोग

वायरस सैंपलिंग ट्यूब का उपयोग करके सैंपलिंग को मुख्य रूप से ऑरोफरीन्जियल सैंपलिंग और नासोफेरींजल सैंपलिंग में विभाजित किया गया है:

1. ऑरोफरीन्जियल सैंपलिंग: सबसे पहले जीभ को टंग डिप्रेसर से दबाएं, फिर द्विपक्षीय ग्रसनी टॉन्सिल और पीछे की ग्रसनी दीवार को पोंछने के लिए सैंपलिंग स्वाब के सिर को गले में फैलाएं, और पीछे की ग्रसनी दीवार को हल्के बल से पोंछें, जीभ को छूने से बचें इकाई।

2. नासॉफिरिन्जियल सैंपलिंग: नाक की नोक से कान की लोब तक की दूरी को स्वैब से मापें और उंगली से निशान लगाएं, सैंपल स्वैब को ऊर्ध्वाधर नाक (चेहरे) की दिशा में नाक गुहा में डालें, स्वैब का विस्तार होना चाहिए नाक की नोक तक कान की लोब की कम से कम आधी लंबाई, स्वाब को 15-30 सेकंड के लिए नाक में छोड़ दें, धीरे से 3-5 बार घुमाएं, और स्वाब को वापस ले लें।
उपयोग की विधि से यह देखना मुश्किल नहीं है कि यह ऑरोफरीन्जियल स्वैब है या नासॉफिरिन्जियल स्वैब, नमूना लेना एक तकनीकी कार्य है, जो कठिन और दूषित है। एकत्र किए गए नमूने की गुणवत्ता सीधे बाद की जांच से संबंधित है। यदि एकत्र किए गए नमूने में वायरल लोड कम है, तो गलत नकारात्मक परिणाम देना आसान है, निदान की पुष्टि करना मुश्किल है।