1. O izradi epruveta za uzorkovanje virusa
Cijevi za uzorkovanje virusa pripadaju proizvodima medicinskih uređaja. Većina domaćih proizvođača registrirana je prema prvoklasnim proizvodima, a malo je tvrtki registrirano u skladu s proizvodima druge klase. Nedavno, kako bi se zadovoljile hitne potrebe Wuhana i drugih mjesta, mnoge su tvrtke preuzele "hitni kanal", a prijave se za prvorazrednu evidenciju.
1. Uzorkovanje brisa: Uzorkovanje brisa izravno kontaktira mjesto uzorkovanja, a materijal glave za uzorkovanje usko je povezan s naknadnom detekcijom. Glava za uzorkovanje mora biti izrađena od sintetičkog vlakana poliestera (PE) ili rajona (vlakna stvorena od čovjeka). Kalcijev alginata spužva ili drvene štapiće (uključujući bambusove štapiće) ne mogu se koristiti, a materijal glave brisa ne može biti pamučni proizvodi. Budući da pamučno vlakno ima jaku adsorpciju proteina, nije lako eluirati u sljedeću otopinu za skladištenje; A kada se drveni štapić ili bambusov štap koji sadrži kalcijev alginat i drvene komponente, natapanje u otopini za skladištenje također će adsorb protein, pa čak i hoće li inhibirati naknadnu PCR reakciju. Preporučuje se korištenje sintetičkih vlakana poput PE vlakana, poliesterskog vlakana i polipropilen vlakana za materijal glave za brisanje. Ne preporučuju se prirodna vlakna poput pamuka. Najlonska vlakna također se ne preporučuju jer najlonska vlakna (slično glavama četkice za zube) apsorbiraju vodu. Loš, što rezultira nedovoljnim volumenom uzorkovanja, što utječe na brzinu otkrivanja. Kalcijev alginat spužva zabranjena je za uzorkovanje brisnog materijala! Ručka za brisa ima dvije vrste: slomljena i ugrađena. Razbijeni bris se stavlja u cijev za odlaganje nakon uzorkovanja, a poklopac cijevi je slomljen nakon što je razbijen iz položaja u blizini glave za uzorkovanje; Ugrađeni bris izravno stavlja bris za uzorkovanje u cijev za odlaganje nakon uzorkovanja, a poklopac cijevi za odlaganje cijevi je ugrađen u poravnaj malu rupu s vrhom ručke i zategnite poklopac cijevi. Uspoređujući dvije metode, potonje je relativno sigurno. Kad se slomljeni bris koristi zajedno s cijevi za skladištenje manje veličine, to može uzrokovati prskanje tekućine u cijevi kada se razbije, a punu pažnju treba posvetiti riziku od onečišćenja uzrokovanog nepravilnom uporabom proizvoda. Preporučuje se korištenje šupljeg polistirena (PS) ekstrudirane cijevi ili polipropilena (PP) ubrizgavajuće cijevi za materijal ručke za bris. Bez obzira na to koji se materijal koristi, ne mogu se dodati aditivi za kalcijeve algine; Drveni štapići ili bambusovi štapići. Ukratko, bris za uzorkovanje trebao bi osigurati količinu uzorkovanja i količinu oslobađanja, a odabrani materijali ne smiju imati tvari koje utječu na naknadna ispitivanja.
2. Otopina očuvanja virusa: Na tržištu postoje dvije vrste otopina za očuvanje virusa, jedna je otopina za održavanje virusa modificirana na temelju transportnog medija, a druga je modificirana otopina za ekstrakciju nukleinske kiseline lizat.
Glavna komponenta prvog je Eagleov osnovni kulturni medij (MEM) ili Hank -ova uravnotežena sol, koja se dodaje sa solima, aminokiselinama, vitaminima, glukozom i proteinima potrebnim za preživljavanje virusa. Ova otopina za skladištenje koristi fenol crvenu natrijevu sol kao indikator i otopinu. Kad je vrijednost pH 6,6-8,0, otopina je ružičasta. U otopinu za očuvanje dodaju se potrebna glukoza, L-glutamin i protein. Protein je predviđen u obliku fetalnog serumskog albumina goveda ili goveđeg seruma, koji može stabilizirati proteinsku školjku virusa. Budući da je otopina očuvanja bogata hranjivim tvarima, pogoduje preživljavanju virusa, ali i korisno za rast bakterija. Ako je otopina očuvanja zagađena bakterijama, ona će se množiti u velikim količinama. Ugljični dioksid u njegovim metabolitima uzrokovat će da pH otopine očuvanja padne iz ružičaste žute boje. Stoga je većina proizvođača dodala antibakterijske sastojke u svoje formulacije. Preporučeni antibakterijski agensi su penicilin, streptomicin, gentamicin i polimiksin B. Natrijev azid i 2-metil se ne preporučuju inhibitori poput 4-metil-4-izotiazolina-3-one (MCI) i 5-klor-2-metil-4-izotil-3-asothiazolin-asothiazolin-4-a. Budući da je uzorak pruženo ovom otopinom za očuvanje u osnovi živi virus, originalnost uzorka može se zadržati u najvećoj mjeri, a može se koristiti ne samo za ekstrakciju i otkrivanje nukleinskih kiselina virusa, već i za uzgoj i izolaciju virusa. Međutim, treba napomenuti da se nakon inaktivacije kada se koristi za otkrivanje, ekstrakcija nukleinske kiseline i pročišćavanje.
Druga vrsta otopine očuvanja pripremljena na temelju lizata za ekstrakciju nukleinskih kiselina, glavne komponente su uravnotežene soli, sredstva za helaciju EDTA, gvanidinska sol (poput gvanidina izotiocijanata, gvanidin hidroklorida, itd.), Anionskog namiltana), kao što je nadij na nadiju), poput tetacije, poput tetacije, poput tetekana, poput tetekana na nadiju) Fenol, 8-hidroksikinolin, ditiotriitol (DTT), proteinaza K i druge komponente, ova otopina za skladištenje je da izravno cijepa virus kako bi se oslobodila nukleinska kiselina i eliminirala RNaza. Ako se koristi samo za RT-PCR, prikladniji je, ali lizat može inaktivirati virus. Ovakav uzorak ne može se koristiti za odvajanje kulture virusa.
Metalno ionsko helacijsko sredstvo koje se koristi u otopini za očuvanje virusa preporučuje se za korištenje EDTA soli (poput dipotasijska etilendiaminetetraoctena kiselina, disodijacija etilendiaminetraoctena kiselina, itd.), A ne preporučuje se upotreba heparina (poput natrij heparina, litij -heparina), pamljenja), pamljenja.
3. Očuvanje cijevi: materijal cijevi za očuvanje treba odabrati pažljivo. Postoje podaci koji sugeriraju da je polipropilen (polipropilen) povezan s adsorpcijom nukleinske kiseline, posebno pri koncentraciji visoke napetosti iona, polietilen (polietilen) je preferiraniji od polipropilena (polipropilen), lako shvaćajući DNA/RNA. Polimer-propilen-propilen (poliallomer) plastika i neki posebno prerađeni polipropilen (polipropilen) plastični spremnici prikladniji su za skladištenje DNA/RNA. Osim toga, kada koristite lomljivu bris, cijev za pohranu treba pokušati odabrati spremnik s visinom većom od 8 cm kako bi se spriječilo da se sadržaj rasprsne i kontaminira kada se bris razbije.
4. Voda za proizvodnju otopine za očuvanje: Ultrapurna voda koja se koristi za proizvodnju otopine za očuvanje treba filtrirati kroz ultrafiltracijsku membranu s molekulskom težinom od 13.000 kako bi se osiguralo uklanjanje nečistoća polimera iz bioloških izvora, poput RNase, DNaze i endotoksina, i uobičajenog pročišćavanja. Voda ili destilirana voda.
2. Upotreba epruveta za uzorkovanje virusa
Uzorkovanje pomoću epruvete za uzorkovanje virusa uglavnom je podijeljeno na uzorkovanje orofaringea i uzorkovanje nazofaringela:
1. Orofaringealno uzorkovanje: Prvo pritisnite jezik depresorom jezika, a zatim ispružite glavu uzorkovanja ugusava u grlo kako biste obrisali bilateralni faringealni tonsi i stražnji zid faringealnog zida i obrišite stražnju žarišnu zid laganom silom, izbjegavajući dodirnik jezika.
2. Nazofaringealno uzorkovanje: Izmjerite udaljenost od vrha nosa do ušnog režnja s brisanjem i oznakom prstom, umetnite uzorkovanje u uzorkovanje u uzorkovanje u nosnu šupljinu u smjeru vertikalnog nosa (lice), bris bi se trebao protezati najmanje polovicu dužine uha, na vrh nosa, nosa, u nosu u nosu, u nosu u nosu u nosu u nosu u nosu, nos u nosu, nos u nosu, nosa u nosu u nosu u nosu u nosu u nosu u nosu
Nije teško vidjeti iz metode upotrebe, bilo da se radi o orofaringealnom brisu ili nazofaringealnom brisu, uzorkovanje je tehnički zadatak, koji je teško i kontaminirano. Kvaliteta prikupljenog uzorka izravno je povezana s naknadnim otkrivanjem. Ako prikupljeni uzorak ima malo virusnog opterećenja, lako je izazvati lažne negativne, teško je potvrditi dijagnozu.
Post Vrijeme: lipnja-21-2020
