1. Konsènan fabrikasyon tib echantiyon viris yo
Tib echantiyon viris fè pati pwodwi aparèy medikal. Pifò manifaktirè domestik yo anrejistre dapre pwodwi yo premye klas, ak kèk konpayi yo anrejistre dapre pwodwi yo dezyèm klas. Dènyèman, yo nan lòd yo satisfè bezwen ijans yo nan Wuhan ak lòt kote, anpil konpayi yo te pran "chanèl ijans la" "Aplike pou pèmisyon dosye premye klas la. Tib echantiyon viris la konpoze de yon prelèvman echantiyon, solisyon prezèvasyon viris ak anbalaj ekstèn. Depi pa gen okenn estanda nasyonal inifye oswa estanda endistri, pwodwi yo nan manifaktirè divès kalite varye anpil.
1. Prelèvman echantiyon: Prelèvman echantiyon an dirèkteman kontakte sit echantiyon an, ak materyèl la nan tèt echantiyon an se pre relasyon ak deteksyon an ki vin apre. Tèt prelèvman echantiyon an ta dwe fèt ak fib sentetik Polyester (PE) oswa Rayon (fib moun fè). Eponj aljinat kalsyòm oswa baton an bwa (ki gen ladan baton banbou) pa ka itilize, ak materyèl la nan tèt la prelèvman pa ka pwodwi koton. Paske fib koton gen yon absòpsyon fò nan pwoteyin, li pa fasil elite nan solisyon an depo ki vin apre; epi lè yon baton an bwa oswa yon baton banbou ki gen aljinat kalsyòm ak konpozan an bwa yo kase, tranpe nan solisyon an depo pral tou adsorb pwoteyin, e menm pral Li ka anpeche reyaksyon an PCR ki vin apre. Li rekòmande yo sèvi ak fib sentetik tankou fib PE, fib polyester ak fib polypropylène pou materyèl la nan tèt la prelèvman. Fib natirèl tankou koton yo pa rekòmande. Fib nilon yo pa rekòmande tou paske fib nilon (menm jan ak tèt bwòs dan) absòbe dlo. Pòv, sa ki lakòz volim echantiyon ensifizan, ki afekte pousantaj deteksyon an. Eponj aljinat kalsyòm entèdi pou pran echantiyon materyèl prelèvman! Manch prelèvman gen de kalite: kase ak bati-an. Yo mete prelèvman kase a nan tib depo a apre pran echantiyon, epi bouchon tib la kase apre yo te kase nan pozisyon toupre tèt echantiyon an; prelèvman an bati-an dirèkteman mete prelèvman echantiyon an nan tib la depo apre pran echantiyon, epi li se kouvèti tib depo a bati nan Aliman ti twou a ak tèt la nan manch lan epi sere boulon kouvèti a tib. Konpare de metòd yo, lèt la relativman an sekirite. Lè yo itilize prelèvman kase a ansanm ak yon tib depo gwosè ki pi piti, li ka lakòz pwojeksyon likid nan tib la lè yo kase, epi yo ta dwe peye tout atansyon sou risk pou kontaminasyon ki te koze pa itilizasyon move nan pwodwi a. Li rekòmande pou sèvi ak twou polystyrène (PS) extrudée tib oswa polypropylène (PP) piki pliye tib pou materyèl la nan manch prelèvman an. Kèlkeswa materyèl yo itilize, aditif aljinat kalsyòm pa ka ajoute; baton an bwa oswa baton Banbou. Nan ti bout tan, prelèvman echantiyon an ta dwe asire kantite echantiyon an ak kantite lajan an nan lage, ak materyèl yo chwazi pa dwe gen sibstans ki sou ki afekte tès ki vin apre.
2. Solisyon konsèvasyon viris: Gen de kalite solisyon prezèvasyon viris lajman ki itilize nan mache a, youn se yon solisyon antretyen viris modifye ki baze sou mwayen transpò a, ak lòt la se yon solisyon modifye pou lysate ekstraksyon asid nikleyik.
Eleman prensipal ansyen an se mwayen kilti debaz Eagle (MEM) oswa sèl balanse Hank, ki ajoute ak sèl, asid amine, vitamin, glikoz ak pwoteyin ki nesesè pou siviv viris la. Solisyon depo sa a sèvi ak fenol wouj sodyòm sèl kòm yon endikatè ak solisyon. Lè valè pH la se 6.6-8.0, solisyon an woz. Yo ajoute glikoz, L-glutamin ak pwoteyin ki nesesè nan solisyon an prezèvasyon. Pwoteyin yo bay nan fòm fetal serom bovin oswa albumin serom bovin, ki ka estabilize koki pwoteyin viris la. Paske solisyon an prezèvasyon se moun rich nan eleman nitritif, li se fezab nan siviv nan viris la, men tou benefisye nan kwasans lan nan bakteri. Si solisyon an prezèvasyon kontamine ak bakteri, li pral miltipliye nan gwo kantite. Gaz kabonik nan metabolit li yo pral lakòz pH solisyon an prezèvasyon tonbe soti nan woz Vire jòn. Se poutèt sa, pifò manifaktirè yo te ajoute engredyan anti-bakteri nan fòmilasyon yo. Ajan anti-bakteri rekòmande yo se penisilin, streptomycin, gentamicin ak polymyxin B. Azid sodyòm ak 2-methyl yo pa rekòmande Inibitè tankou 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) ak 5-chloro-2-methyl-4. -isothiazolin-3-one (CMCI) paske eleman sa yo gen yon efè sou reyaksyon PCR la. Piske echantiyon an bay nan solisyon prezèvasyon sa a se fondamantalman yon viris vivan, orijinalite echantiyon an ka kenbe nan pi gwo limit, epi li ka itilize pa sèlman pou fè ekstraksyon ak deteksyon viris nikleyik asid, men tou pou kiltivasyon ak izolasyon viris yo. Sepandan, li ta dwe remake ke lè yo itilize pou deteksyon, ekstraksyon asid nikleyik ak pirifikasyon dwe fèt apre inaktivasyon.
Yon lòt kalite solisyon prezèvasyon prepare ki baze sou lisat ekstraksyon asid nikleyik, eleman prensipal yo se sèl balanse, ajan chelating EDTA, sèl guanidine (tankou izotiosyanat guanidin, idroklorid guanidin, elatriye), surfactant anionik (tankou silfat sodyòm dodecan), kasyonik. Surfactants (tankou tetradecyltrimethylammonium oksalat), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K ak lòt konpozan, Solisyon depo sa a se dirèkteman koupe viris la pou libere asid nikleyik la epi elimine RNase la. Si sèlman itilize pou RT-PCR, li pi apwopriye, men lysate la ka inaktive viris la. Sa a kalite echantiyon pa ka itilize pou separasyon kilti viris.
Ajan metal iyon chelating yo itilize nan solisyon prezèvasyon viris la rekòmande pou sèvi ak sèl EDTA (tankou asid dipotasyòm etilendiaminetetraacetic, asid disodyòm etilèndiaminetetraacetic, elatriye), epi li pa rekòmande pou itilize eparin (tankou eparin sodyòm, eparin ityòm), pou yo pa afekte deteksyon PCR.
3. Tib konsèvasyon: Materyèl tib prezèvasyon yo ta dwe chwazi ak anpil atansyon. Gen done ki sijere ke polypropylène (Polypropylène) gen rapò ak adsorption nan asid nikleyik, espesyalman nan konsantrasyon ion tansyon wo, polyethylene (Polyethylene) pi pito pase polypropylène (Polypropylène) Fasil yo atrab ADN / RNA. Polyethylene-propylène polymère (Polyallomer) plastik ak kèk resipyan plastik espesyalman trete polypropylène (Polypropylène) yo pi apwopriye pou depo ADN / RNA. Anplis de sa, lè w ap itilize yon prelèvman kase, tib depo a ta dwe eseye chwazi yon veso ki gen yon wotè ki pi gran pase 8 cm pou anpeche sa ki ladan yo te pwojeksyon ak kontamine lè prelèvman an kase.
4. Dlo pou solisyon prezèvasyon pwodiksyon: Dlo ultrapure yo itilize pou solisyon prezèvasyon pwodiksyon yo ta dwe filtre atravè yon manbràn ultrafiltrasyon ak yon pwa molekilè 13,000 pou asire retire enpurte polymère nan sous byolojik, tankou RNase, DNase, ak endotoxin, ak pirifikasyon òdinè pa rekòmande. Dlo oswa dlo distile.
2. Itilizasyon tib echantiyon viris
Pran echantiyon lè l sèvi avèk tib echantiyon viris la sitou divize an echantiyon orofarinj ak echantiyon nazofarinj:
1. Oropharyngeal echantiyon: Premye peze lang lan ak depresè lang lan, Lè sa a, pwolonje tèt la nan prelèvman echantiyon an nan gòj la pou siye amidal farinj bilateral yo ak miray farinj dèyè a, epi siye miray farinj lan dèyè ak fòs limyè, evite manyen lang lan. inite.
2. Echantiyon nasopharyngeal: mezire distans ki soti nan pwent nen an rive nan lòb zòrèy la ak yon prelèvman epi make ak yon dwèt, insert prelèvman echantiyon an nan kavite nan nen an nan direksyon nen vètikal la (figi), prelèvman an ta dwe pwolonje. omwen mwatye longè lòb zòrèy la rive nan pwent nen an, Kite prelèvman an nan nen an pou 15-30 segonn, vire dousman 3-5 fwa, epi retire prelèvman an.
Li pa difisil pou wè nan metòd pou itilize a, si li se yon prelèvman oropharyngeal oswa yon prelèvman nasopharyngeal, echantiyon se yon travay teknik, ki se difisil ak kontamine. Bon jan kalite echantiyon an kolekte dirèkteman gen rapò ak deteksyon ki vin apre a. Si echantiyon an kolekte gen yon chaj viral Low, fasil lakòz fo negatif, difisil konfime dyagnostik la.
Tan poste: Jun-21-2020
