Մի քանի մտքեր վիրուսի նմուշառման խողովակի վերաբերյալ

1. Վիրուսի նմուշառման խողովակների արտադրության մասին
Վիրուսի նմուշառման խողովակները պատկանում են բժշկական սարքերի արտադրանքին: Ներքին արտադրողների մեծ մասը գրանցված է ըստ առաջին կարգի ապրանքների, իսկ քիչ ընկերություններ գրանցված են ըստ երկրորդ կարգի ապրանքների։ Վերջերս, Ուհանի և այլ վայրերի արտակարգ կարիքները բավարարելու համար, շատ ընկերություններ վերցրել են «արտակարգ իրավիճակների ալիքը» «Դիմել առաջին կարգի ռեկորդային թույլտվության համար»: Վիրուսի նմուշառման խողովակը կազմված է նմուշառման շվաբրից, վիրուսի պահպանման լուծույթից և արտաքին փաթեթավորումից: Քանի որ չկա միասնական ազգային ստանդարտ կամ արդյունաբերության ստանդարտ, տարբեր արտադրողների արտադրանքները մեծապես տարբերվում են:

1. Նմուշառման շվաբր. Նմուշառման շվաբրն ուղղակիորեն շփվում է նմուշառման վայրի հետ, և նմուշառման գլխի նյութը սերտորեն կապված է հետագա հայտնաբերման հետ: Նմուշառման շվաբրի գլուխը պետք է պատրաստված լինի պոլիեսթեր (PE) սինթետիկ մանրաթելից կամ ռայոնից (տեխնածին մանրաթելից): Կալցիումի ալգինատե սպունգի կամ փայտե փայտի շվաբրերը (այդ թվում՝ բամբուկի ձողիկներ) չեն կարող օգտագործվել, իսկ շվաբրի գլխի նյութը չի կարող լինել բամբակյա արտադրանք: Քանի որ բամբակյա մանրաթելն օժտված է սպիտակուցի ուժեղ կլանմամբ, այն հեշտ չէ զտել հետագա պահպանման լուծույթի մեջ. և երբ կալցիումի ալգինատ և փայտե բաղադրիչներ պարունակող փայտե ձողիկը կամ բամբուկի փայտիկը կոտրվում է, պահեստային լուծույթում ներծծվելը նաև կլանում է սպիտակուցը, և նույնիսկ այն կարող է արգելակել հետագա PCR ռեակցիան: Շվաբրի գլխի նյութի համար խորհուրդ է տրվում օգտագործել սինթետիկ մանրաթելեր, ինչպիսիք են PE մանրաթելը, պոլիեսթեր մանրաթելը և պոլիպրոպիլենային մանրաթելը: Խորհուրդ չի տրվում օգտագործել բնական մանրաթելեր, ինչպիսիք են բամբակը: Նեյլոնե մանրաթելերը նույնպես խորհուրդ չեն տրվում, քանի որ նեյլոնե մանրաթելերը (նման ատամի խոզանակի գլխիկներին) կլանում են ջուրը: Վատ, ինչը հանգեցնում է նմուշառման անբավարար ծավալի, որը ազդում է հայտնաբերման արագության վրա: Կալցիումի ալգինատ սպունգը արգելված է շվաբրի նյութի նմուշառման համար: Շվաբրի բռնակն ունի երկու տեսակի՝ կոտրված և ներկառուցված: Կոտրված շվաբրը նմուշառումից հետո տեղադրվում է պահեստային խողովակի մեջ, իսկ խողովակի գլխարկը կոտրվում է նմուշառման գլխի մոտ դիրքից կոտրվելուց հետո. ներկառուցված շվաբրը նմուշառումից հետո ուղղակիորեն դնում է նմուշառման շվաբրը պահեստային խողովակի մեջ, և պահեստավորման խողովակի կափարիչը կառուցված է: Հավասարեցրեք փոքր անցքը բռնակի վերին մասի հետ և ամրացրեք խողովակի կափարիչը: Համեմատելով երկու մեթոդները՝ վերջինս համեմատաբար անվտանգ է։ Երբ կոտրված շվաբրն օգտագործվում է ավելի փոքր չափսի պահեստավորման խողովակի հետ համատեղ, այն կարող է առաջացնել հեղուկի շաղ տալ խողովակի մեջ, երբ կոտրվել է, և պետք է լիարժեք ուշադրություն դարձնել արտադրանքի ոչ պատշաճ օգտագործման հետևանքով առաջացած աղտոտման ռիսկին: Շվաբրի բռնակի նյութի համար խորհուրդ է տրվում օգտագործել խոռոչ պոլիստիրոլի (PS) էքստրուդացված խողովակ կամ պոլիպրոպիլենային (PP) ներարկման ծալքավոր խողովակ: Անկախ նրանից, թե ինչ նյութ է օգտագործվում, կալցիումի ալգինատ հավելումները չեն կարող ավելացվել. փայտե ձողիկներ կամ Բամբուկե ձողիկներ: Մի խոսքով, նմուշառման շվաբրը պետք է ապահովի նմուշառման քանակությունը և արտազատման քանակը, և ընտրված նյութերը չպետք է ունենան նյութեր, որոնք ազդում են հետագա փորձարկման վրա:

2. Վիրուսների պահպանման լուծույթ. Շուկայում լայնորեն օգտագործվում են վիրուսների պահպանման երկու լուծույթներ, մեկը վիրուսի պահպանման լուծույթ է, որը ձևափոխված է տրանսպորտային միջոցի հիման վրա, իսկ մյուսը փոփոխված լուծույթ է նուկլեինաթթվի արդյունահանման լիզատի համար:
Առաջինի հիմնական բաղադրիչը Eagle-ի հիմնական մշակման միջավայրն է (MEM) կամ Հենքի հավասարակշռված աղը, որն ավելացվում է վիրուսի գոյատևման համար անհրաժեշտ աղերի, ամինաթթուների, վիտամինների, գլյուկոզայի և սպիտակուցի հետ: Պահպանման այս լուծույթը որպես ցուցիչ և լուծույթ օգտագործում է ֆենոլ կարմիր նատրիումի աղ: Երբ pH արժեքը 6,6-8,0 է, լուծումը վարդագույն է։ Պահպանման լուծույթին ավելացնում են անհրաժեշտ գլյուկոզա, L-գլուտամին և սպիտակուց։ Սպիտակուցը տրամադրվում է պտղի տավարի շիճուկի կամ տավարի շիճուկի ալբումինի տեսքով, որը կարող է կայունացնել վիրուսի սպիտակուցային շերտը։ Քանի որ պահպանման լուծույթը հարուստ է սննդանյութերով, այն նպաստում է վիրուսի գոյատևմանը, բայց նաև օգտակար է բակտերիաների աճին: Եթե ​​պահպանման լուծույթը աղտոտված է բակտերիայով, այն կբազմապատկվի մեծ քանակությամբ: Ածխածնի երկօքսիդը իր մետաբոլիտներում կհանգեցնի պահպանման լուծույթի pH-ի անկմանը վարդագույնից Դառնում է դեղին: Հետեւաբար, արտադրողների մեծամասնությունը հակաբակտերիալ բաղադրիչներ են ավելացրել իրենց ձեւակերպումներում: Առաջարկվող հակաբակտերիալ միջոցներն են՝ պենիցիլինը, ստրեպտոմիցինը, գենտամիցինը և պոլիմիքսին B-ն: Նատրիումի ազիդը և 2-մեթիլը խորհուրդ չեն տրվում արգելակիչներ, ինչպիսիք են 4-մեթիլ-4-իզոթիազոլին-3-ոնը (MCI) և 5-քլորո-2-մեթիլ-4-ը: -isothiazolin-3-one (CMCI), քանի որ այս բաղադրիչները ազդում են PCR ռեակցիայի վրա: Քանի որ այս պահպանման լուծույթով տրամադրված նմուշը հիմնականում կենդանի վիրուս է, նմուշի ինքնատիպությունը կարող է պահպանվել առավելագույն չափով, և այն կարող է օգտագործվել ոչ միայն վիրուսի նուկլեինաթթուների արդյունահանման և հայտնաբերման, այլև մշակման և մշակման համար: վիրուսների մեկուսացում. Այնուամենայնիվ, հարկ է նշել, որ երբ օգտագործվում է հայտնաբերման համար, նուկլեինաթթվի արդյունահանումը և մաքրումը պետք է իրականացվի ապաակտիվացումից հետո:
Մեկ այլ տեսակի պահպանման լուծույթ, որը պատրաստված է նուկլեինաթթվի արդյունահանման լիզատի հիման վրա, հիմնական բաղադրիչներն են հավասարակշռված աղերը, EDTA քելատային նյութը, գուանիդինային աղը (օրինակ՝ գուանիդինի իզոթիոցիանատ, գուանիդինի հիդրոքլորիդ և այլն), անիոնային մակերևութային ակտիվ նյութ (օրինակ՝ նատրիումի դոդեկանի սուլֆատ), կատիոն։ Մակերեւութային ակտիվ նյութեր (օրինակ՝ տետրադեցիլտրիմեթիլամոնիում օքսալատ), ֆենոլ, 8-հիդրօքսիկինոլին, դիթիոթրեիտոլ (DTT), պրոտեինազ K և այլ բաղադրիչներ: Պահպանման այս լուծույթը ուղղակիորեն կտրում է վիրուսը՝ նուկլեինաթթուն ազատելու և RNase-ը վերացնելու համար: Եթե ​​օգտագործվում է միայն RT-PCR-ի համար, ապա այն ավելի հարմար է, բայց լիզատը կարող է ապաակտիվացնել վիրուսը: Այս տեսակի նմուշը չի կարող օգտագործվել վիրուսային մշակույթի առանձնացման համար:

Վիրուսի պահպանման լուծույթում օգտագործվող մետաղական իոնային քելատացնող նյութը խորհուրդ է տրվում օգտագործել EDTA աղեր (օրինակ՝ դիկալիումի էթիլենդիամինետրաքացախաթթու, դինատրիումի էթիլենդիամինտետրաքացախաթթու և այլն), և խորհուրդ չի տրվում օգտագործել հեպարին (օրինակ՝ նատրիումի հեպարին, լիթիումի հեպարին): որպեսզի չազդի PCR հայտնաբերման վրա:
3. Պահպանման խողովակ. Պահպանման խողովակի նյութը պետք է ուշադիր ընտրվի: Կան տվյալներ, որոնք ենթադրում են, որ պոլիպրոպիլենը (Պոլիպրոպիլեն) կապված է նուկլեինաթթվի կլանման հետ, հատկապես բարձր լարվածության իոնների կոնցենտրացիայի դեպքում, պոլիէթիլենը (պոլիէթիլեն) ավելի նախընտրելի է, քան պոլիպրոպիլենը (պոլիպրոպիլեն) Հեշտ ընկալելի ԴՆԹ/ՌՆԹ: Պոլիէթիլեն-պրոպիլենային պոլիմերային (Polyallomer) պլաստիկ և որոշ հատուկ մշակված պոլիպրոպիլենային (պոլիպրոպիլեն) պլաստիկ տարաներ ավելի հարմար են ԴՆԹ/ՌՆԹ պահպանման համար: Բացի այդ, կոտրվող շվաբր օգտագործելիս պահեստային խողովակը պետք է փորձի ընտրել 8 սմ-ից ավելի բարձրություն ունեցող կոնտեյներ՝ կանխելու համար պարունակությունը շաղ տալ և աղտոտել, երբ շվաբրը կոտրվում է:

4. Ջուր արտադրության պահպանման լուծույթ. Արտադրության պահպանման լուծույթի համար օգտագործվող գերմաքուր ջուրը պետք է զտվի 13000 մոլեկուլային քաշով ուլտրաֆիլտրացիոն թաղանթով, որպեսզի ապահովի պոլիմերային կեղտերի հեռացումը կենսաբանական աղբյուրներից, ինչպիսիք են RNase, DNase և endotoxin, և սովորական մաքրումը խորհուրդ չի տրվում: Ջուր կամ թորած ջուր:

2. Վիրուսի նմուշառման խողովակների օգտագործումը

Վիրուսի նմուշառման խողովակի միջոցով նմուշառումը հիմնականում բաժանվում է օրոֆարինգային և քթանցքային նմուշառման.

1. Օրոֆարինգիալ նմուշառում. նախ լեզուն սեղմեք լեզուն սեղմող սարքով, այնուհետև նմուշառման շվաբրի գլուխը երկարացրեք կոկորդի մեջ՝ սրբելու երկկողմանի կեղևի նշագեղձերը և հետևի ֆարինգիսի պատը, իսկ հետևի ֆարինգիսի պատը սրբեք թեթև ուժով, խուսափեք լեզվին դիպչելուց: միավոր.

2. Քթանցքից նմուշառում. քթի ծայրից մինչև ականջի բլիթ հեռավորությունը չափեք շվաբրով և նշեք մատով, նմուշառման շվաբրը մտցրեք քթի խոռոչի մեջ՝ ուղղահայաց քթի (դեմքի) ուղղությամբ, շվաբրը պետք է տարածվի: ականջի բլթի երկարության առնվազն կեսը մինչև քթի ծայրը, շամպուն թողեք քթի մեջ 15-30 վայրկյան, նրբորեն պտտել 3-5 անգամ և հանել շվաբրը:
Օգտագործման եղանակից դժվար չէ հասկանալ՝ դա բերանային շվաբր է, թե քթանցք, նմուշառումը տեխնիկական խնդիր է, որը բարդ է և աղտոտված։ Հավաքված նմուշի որակն ուղղակիորեն կապված է հետագա հայտնաբերման հետ: Եթե ​​հավաքված նմուշն ունի վիրուսային ծանրաբեռնվածություն Ցածր, հեշտ է առաջացնել կեղծ բացասական, դժվար է հաստատել ախտորոշումը: