1. Um framleiðslu á vírussýnisrörum
Vírussýnisrör tilheyra lækningatækjum. Flestir innlendir framleiðendur eru skráðir samkvæmt fyrsta flokks vörum og fá fyrirtæki eru skráð samkvæmt annars flokks vörum. Nýlega, til að mæta neyðarþörfum Wuhan og annarra staða, hafa mörg fyrirtæki tekið „neyðarrásina“ „Sæktu um fyrsta flokks metleyfi. Veirusýnisglasið er samsett úr sýnatökuþurrku, veiruvarnarlausn og ytri umbúðum. Þar sem enginn samræmdur landsstaðall eða iðnaðarstaðall er til eru vörur ýmissa framleiðenda mjög mismunandi.
1. Sýnatökuþurrkur: Sýnatökuþurrkan snertir sýnatökustaðinn beint og efnið í sýnatökuhausnum er nátengt síðari greiningu. Sýnatökuhausinn ætti að vera úr gervitrefjum úr pólýester (PE) eða Rayon (tilbúnum trefjum). Ekki er hægt að nota kalsíumalgínatsvamp eða trépinnaþurrkur (þar á meðal bambusstafir) og efnið í þurrkuhausnum getur ekki verið bómullarvörur. Vegna þess að bómullartrefjar hafa sterka frásog próteina er ekki auðvelt að skola út í síðari geymslulausnina; og þegar tréstafur eða bambusstafur sem inniheldur kalsíumalgínat og tréhluta er brotinn, mun bleyting í geymslulausninni einnig aðsogast prótein, og jafnvel mun það geta hindrað síðari PCR viðbrögð. Mælt er með því að nota tilbúnar trefjar eins og PE trefjar, pólýester trefjar og pólýprópýlen trefjar fyrir efni þurrkuhaussins. Ekki er mælt með náttúrulegum trefjum eins og bómull. Nælontrefjar eru heldur ekki ráðlagðar vegna þess að nælontrefjar (svipað og tannburstahausar) gleypa vatn. Lélegt, sem leiðir til ófullnægjandi sýnatöku, sem hefur áhrif á greiningarhraða. Kalsíumalgínat svampur er bannaður til að taka sýni úr þurrkuefni! Þurrkuhandfang er af tveimur gerðum: brotið og innbyggt. Brotna þurrkurinn er settur í geymslurörið eftir sýnatöku og rörhettan er brotin eftir að hafa verið brotin úr stöðu nálægt sýnatökuhausnum; innbyggði þurrkurinn setur sýnatökuþurrku beint í geymslurörið eftir sýnatöku og lok geymslurörsins er innbyggður. Stilltu litla gatið saman við toppinn á handfanginu og hertu slöngulokið. Með því að bera saman þessar tvær aðferðir er sú síðarnefnda tiltölulega örugg. Þegar brotna þurrkurinn er notaður ásamt minni geymsluröri getur það valdið því að vökvi skvettist í rörið þegar það er brotið, og huga skal að hættunni á mengun af völdum óviðeigandi notkunar vörunnar. Mælt er með því að nota holt pólýstýren (PS) pressað rör eða pólýprópýlen (PP) innspýtingarrör fyrir efnið á þurrkuhandfanginu. Sama hvaða efni er notað er ekki hægt að bæta við kalsíumalgínati; tré prik eða bambus prik. Í stuttu máli ætti sýnatökuþurrkan að tryggja magn sýnatöku og magn losunar og valin efni mega ekki innihalda efni sem hafa áhrif á síðari prófun.
2. Veiruvarnarlausn: Það eru tvenns konar vírusvörnunarlausnir sem eru mikið notaðar á markaðnum, önnur er vírusviðhaldslausn sem er breytt á grundvelli flutningsmiðilsins og hin er breytt lausn fyrir kjarnsýruútdráttarlýsat.
Aðalhluti þess fyrrnefnda er Eagle's basic culture medium (MEM) eða Hank's balanced salt, sem er bætt við söltum, amínósýrum, vítamínum, glúkósa og próteinum sem nauðsynleg eru til að lifa af veirum. Þessi geymslulausn notar fenólrautt natríumsalt sem vísbendingu og lausn. Þegar pH gildið er 6,6-8,0 er lausnin bleik. Nauðsynlegum glúkósa, L-glútamíni og próteini er bætt við varðveislulausnina. Próteinið er útvegað í formi nautgripasermis fósturs eða nautgripasermisalbúmíns, sem getur komið á stöðugleika í próteinskel veirunnar. Vegna þess að varðveislulausnin er rík af næringarefnum er hún til þess fallin að lifa af vírusinn en einnig gagnleg fyrir vöxt baktería. Ef varðveislulausnin er menguð af bakteríum mun hún fjölga sér í miklu magni. Koltvísýringurinn í umbrotsefnum þess mun valda því að sýrustigslausnin fellur úr bleiku. Gulur. Þess vegna hafa flestir framleiðendur bætt bakteríudrepandi innihaldsefnum við samsetningar sínar. Sýklalyf sem mælt er með eru penicillín, streptómýsín, gentamísín og pólýmyxín B. Natríumazíð og 2-metýl eru ekki ráðlögð. Hemlar eins og 4-metýl-4-ísóþíasólín-3-ón (MCI) og 5-klór-2-metýl-4 -ísóþíasólín-3-ón (CMCI) vegna þess að þessir þættir hafa áhrif á PCR viðbrögðin. Þar sem sýnishornið sem þessi varðveislulausn gefur er í grundvallaratriðum lifandi veira, er hægt að halda frumleika sýnisins að mestu leyti og það er ekki aðeins hægt að nota til útdráttar og greiningar á veirukjarnsýrum, heldur einnig til ræktunar og einangrun vírusa. Hins vegar skal tekið fram að þegar það er notað til greiningar verður að framkvæma kjarnsýruútdrátt og hreinsun eftir óvirkjun.
Önnur tegund af varðveislulausn unnin byggð á kjarnsýruútdráttarlýsati, helstu þættirnir eru jafnvægissölt, EDTA klóbindandi efni, gúanidínsalt (eins og gúanidínísóþíósýanat, gúanidínhýdróklóríð osfrv.), anjónísk yfirborðsvirk efni (eins og dódekan natríumsúlfat), katjónísk. yfirborðsvirk efni (eins og tetradecýltrímetýlammoníumoxalat), fenól, 8-hýdroxýkínólín, dítíóþrítól (DTT), próteinasa K og aðrir þættir, Þessi geymslulausn er til að kljúfa veiruna beint til að losa kjarnsýruna og útrýma RNasanum. Ef það er aðeins notað fyrir RT-PCR hentar það betur, en lýsatið getur gert vírusinn óvirkan. Ekki er hægt að nota þessa tegund sýnis til að aðskilja veirurækt.
Mælt er með málmjóna klóbindiefninu sem notað er í veiruvarnarlausnina til að nota EDTA sölt (eins og díkalíumetýlendíamíntetraediksýra, tvínatríumetýlendíamíntetraediksýra o.s.frv.), og ekki er mælt með því að nota heparín (eins og natríumheparín, litíumheparín), til að hafa ekki áhrif á PCR uppgötvun.
3. Varðveislurör: Efni varðveislurörsins ætti að velja vandlega. Það eru gögn sem benda til þess að pólýprópýlen (pólýprópýlen) tengist frásog kjarnsýru, sérstaklega við háspennujónastyrk, pólýetýlen (pólýetýlen) er ákjósanlegri en pólýprópýlen (pólýprópýlen) Auðvelt að átta sig á DNA/RNA. Pólýetýlen-própýlen fjölliða (pólýallómer) plast og sum sérunnin pólýprópýlen (pólýprópýlen) plastílát henta betur fyrir DNA/RNA geymslu. Að auki, þegar notaður er brotinn þurrkur, ætti geymslurörið að reyna að velja ílát sem er meira en 8 cm á hæð til að koma í veg fyrir að innihaldið skvettist og mengist þegar þurrkurinn er brotinn.
4. Vatn til framleiðslu varðveislu lausn: Ofurhreint vatn sem notað er til framleiðslu varðveislu lausn ætti að sía í gegnum ofsíunar himnu með mólþunga 13.000 til að tryggja að fjölliða óhreinindi séu fjarlægð úr líffræðilegum uppsprettum, svo sem RNase, DNase og endotoxín, og Ekki er mælt með venjulegri hreinsun. Vatn eða eimað vatn.
2. Notkun vírussýnisglasa
Sýnatöku með því að nota vírussýnatökuglasið er aðallega skipt í munnkokssýni og nefkokssýni:
1. Sýnataka úr munnkoki: Þrýstu fyrst tungunni með tunguþrýstibúnaðinum, teygðu síðan höfuð sýnatökuþurrkunnar út í hálsinn til að þurrka af tvíhliða kokhálskirtla og aftari kokvegg og þurrkaðu aftari kokveggnum með léttum krafti, forðastu að snerta tunguna eining.
2. Sýnataka úr nefkoki: mæliðu fjarlægðina frá nefoddinum að eyrnasneplinum með þurrku og merktu með fingri, stingdu sýnatökuþurrkunni inn í nefholið í átt að lóðrétta nefinu (andliti), strokinn ætti að ná að minnsta kosti helmingi lengdar eyrnasnepils að nefbroddi, Látið strokið liggja í nefinu í 15-30 sekúndur, snúið varlega 3-5 sinnum og dragðu strokið til baka.
Ekki er erfitt að sjá af notkunaraðferð, hvort um er að ræða munnkok eða nefkok, sýnatöku er tæknilegt verkefni, sem er erfitt og mengað. Gæði sýnisins sem safnað er er í beinu sambandi við síðari greiningu. Ef safnað sýni er með veirumagn Lágt, auðvelt að valda fölskum neikvæðum, erfitt að staðfesta greininguna.
Birtingartími: 21. júní 2020
