1. Babagan pembuatan tabung sampling virus
Tabung sampling virus kalebu produk piranti medis. Umume pabrikan domestik didaftar miturut produk kelas siji, lan sawetara perusahaan sing kadhaptar miturut produk kelas loro. Bubar, kanggo nyukupi kabutuhan darurat ing Wuhan lan papan liya, akeh perusahaan sing njupuk "saluran darurat" "Njaluk ijin rekaman kelas pertama. Tabung sampling virus kasusun saka swab sampling, solusi pengawetan virus lan kemasan njaba. Amarga ora ana standar nasional utawa standar industri sing manunggal, produk saka macem-macem manufaktur beda-beda.
1. Sampling swab: Sampling swab langsung kontak situs sampling, lan materi saka sirah sampling raket related kanggo deteksi sakteruse. Kepala swab sampling kudu digawe saka serat sintetik Polyester (PE) utawa Rayon (serat buatan manungsa). Calcium alginate spons utawa swab tongkat kayu (kalebu teken pring) ora bisa digunakake, lan bahan saka sirah swab ora bisa dadi produk katun. Amarga serat katun nduweni adsorpsi protein sing kuwat, ora gampang dilebokake menyang solusi panyimpenan sabanjure; lan nalika kelet kayu utawa pring kelet ngemot calcium alginate lan komponen kayu bejat, soaking ing solusi panyimpenan uga bakal adsorb protein, lan malah bakal bisa nyandhet reaksi PCR sakteruse. Disaranake nggunakake serat sintetik kayata serat PE, serat poliester lan serat polipropilena kanggo bahan sirah swab. Serat alam kayata katun ora dianjurake. Serat nilon uga ora dianjurake amarga serat nilon (padha karo sirah sikat untu) nyerep banyu. Miskin, nyebabake volume sampling ora cukup, mengaruhi tingkat deteksi. Kalsium alginate spons dilarang kanggo sampling bahan swab! Pegangan swab duwe rong jinis: rusak lan dibangun. Swab rusak diselehake ing tabung panyimpenan sawise sampling, lan tutup tabung bejat sawise bejat saka posisi cedhak sirah sampling; swab dibangun ing langsung nempatno swab sampling menyang tabung panyimpenan sawise sampling, lan tutup tabung panyimpenan dibangun ing Align bolongan cilik karo ndhuwur nangani lan ngencengi tutup tabung. Mbandhingake rong cara, sing terakhir relatif aman. Nalika swab rusak digunakake magepokan karo tabung panyimpenan ukuran cilik, iku bisa nimbulaké cipratan Cairan ing tabung nalika bejat, lan manungsa waé lengkap kudu mbayar kanggo risiko ketularan disebabake nggunakake prodhuk sing ora bener. Dianjurake kanggo nggunakake polystyrene kothong (PS) tabung extruded utawa polypropylene (PP) injeksi creasing tabung kanggo materi saka swab nangani. Apa wae materi sing digunakake, aditif kalsium alginat ora bisa ditambahake; teken kayu utawa bambu. Singkatnya, swab sampling kudu njamin jumlah sampling lan jumlah sing diluncurake, lan bahan sing dipilih kudu ora duwe zat sing mengaruhi tes sabanjure.
2. Solusi pengawetan virus: Ana rong jinis solusi pengawetan virus sing akeh digunakake ing pasar, siji yaiku solusi pangopènan virus sing diowahi adhedhasar medium transportasi, lan liyane minangka solusi sing dimodifikasi kanggo lysate ekstraksi asam nukleat.
Komponen utama saka mantan yaiku medium budaya dhasar Eagle (MEM) utawa uyah imbang Hank, sing ditambahake karo uyah, asam amino, vitamin, glukosa lan protein sing perlu kanggo urip virus. Solusi panyimpenan iki nggunakake uyah natrium abang fenol minangka indikator lan solusi. Nalika nilai pH 6.6-8.0, solusi kasebut dadi jambon. Glukosa, L-glutamin lan protein sing dibutuhake ditambahake ing solusi pengawetan. Protein kasebut diwenehake kanthi bentuk serum sapi janin utawa albumin serum sapi, sing bisa nyetabilake cangkang protein virus. Amarga solusi pengawetan iku sugih ing gizi, iku kondusif kanggo kaslametané virus nanging uga ono gunane kanggo wutah saka bakteri. Yen solusi pengawetan kasebut kena kontaminasi bakteri, bakal tambah akeh. Karbon dioksida ing metabolit kasebut bakal nyebabake pH larutan pengawetan mudhun saka jambon Dadi kuning. Mulane, umume manufaktur nambahake bahan antibakteri ing formulasi kasebut. Agen antibakteri sing disaranake yaiku penisilin, streptomisin, gentamicin lan polymyxin B. Natrium azida lan 2-metil ora dianjurake Inhibitor kayata 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) lan 5-chloro-2-methyl-4 -isothiazolin-3-one (CMCI) amarga komponen kasebut duweni efek ing reaksi PCR. Wiwit sampel sing diwenehake dening solusi pengawetan iki sejatine minangka virus urip, keaslian sampel bisa disimpen nganti paling akeh, lan bisa digunakake ora mung kanggo ekstraksi lan deteksi asam nukleat virus, nanging uga kanggo budidaya lan isolasi virus. Nanging, kudu dicathet yen nalika digunakake kanggo deteksi, ekstraksi lan pemurnian asam nukleat kudu ditindakake sawise ora aktif.
Solusi pengawetan liyane sing disiapake adhedhasar lysate ekstraksi asam nukleat, komponen utama yaiku uyah sing seimbang, agen chelating EDTA, uyah guanidine (kayata guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, lan liya-liyane), surfaktan anionik (kayata dodecane Sodium sulfate), kationik. surfaktan (kayata tetradesiltrimetilammonium oksalat), fenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K lan komponen liyane, Solusi panyimpenan iki langsung mecah virus kanggo ngeculake asam nukleat lan ngilangi RNase. Yen mung digunakake kanggo RT-PCR, luwih cocok, nanging lysate bisa mateni virus. Sampel jinis iki ora bisa digunakake kanggo misahake kultur virus.
Agen chelating ion logam sing digunakake ing solusi pengawetan virus dianjurake kanggo nggunakake uyah EDTA (kayata asam dipotassium ethylenediaminetetraacetic, asam disodium ethylenediaminetetraacetic, etc.), lan ora dianjurake kanggo nggunakake heparin (kayata sodium heparin, lithium heparin), supaya ora mengaruhi deteksi PCR.
3. Tabung pengawetan: Materi tabung pengawetan kudu dipilih kanthi teliti. Ana data sing nuduhake yen polipropilena (Polypropylene) ana hubungane karo adsorpsi asam nukleat, utamane ing konsentrasi ion tegangan dhuwur, polietilena (Polyethylene) luwih disenengi tinimbang polipropilena (Polypropylene) Gampang nangkep DNA/RNA. Polyethylene-propylene polymer (Polyallomer) plastik lan sawetara wadhah plastik polypropylene (Polypropylene) sing diproses khusus luwih cocok kanggo panyimpenan DNA/RNA. Kajaba iku, nalika nggunakake swab sing bisa pecah, tabung panyimpenan kudu nyoba milih wadhah sing dhuwure luwih saka 8 cm kanggo nyegah isi saka cipratan lan kontaminasi nalika swab rusak.
4. Banyu kanggo solusi pengawetan produksi: Banyu ultrapure sing digunakake kanggo solusi pengawetan produksi kudu disaring liwat membran ultrafiltrasi kanthi bobot molekul 13.000 kanggo mesthekake ngilangi impurities polimer saka sumber biologi, kayata RNase, DNase, lan endotoksin, lan pemurnian biasa ora dianjurake. Banyu utawa banyu suling.
2. Gunakake tabung sampling virus
Sampling nggunakake tabung sampling virus utamane dipérang dadi sampling oropharyngeal lan sampling nasopharyngeal:
1. Sampling oropharyngeal: Pisanan pencet ilat nganggo depressor ilat, banjur ngluwihi sirah swab sampling menyang tenggorokan kanggo ngilangke amandel pharyngeal bilateral lan tembok pharyngeal posterior, lan ngilangke tembok pharyngeal posterior kanthi kekuwatan cahya, supaya ora ndemek ilat. unit.
2. Nasopharyngeal sampling: ngukur jarak saka pucuk irung menyang cuping kuping kanthi swab lan tandha nganggo driji, lebokake swab sampling menyang rongga irung ing arah irung vertikal (pasuryan), swab kudu ngluwihi paling sethithik setengah dawa cuping kuping nganti pucuk irung, ninggalake swab ing irung kanggo 15-30 detik, alon-alon muter 3-5 kaping, lan mbatalake swab.
Ora angel dideleng saka cara panggunaan, yaiku swab oropharyngeal utawa swab nasopharyngeal, sampling minangka tugas teknis, sing angel lan terkontaminasi. Kualitas sampel sing diklumpukake langsung ana hubungane karo deteksi sabanjure. Yen sampel sing diklumpukake nduweni viral load Low, gampang nyebabake negatif palsu, angel konfirmasi diagnosis.
Wektu kirim: Jun-21-2020
