1. ვირუსის სინჯის მილების დამზადების შესახებ
ვირუსის სინჯის მილები მიეკუთვნება სამედიცინო მოწყობილობის პროდუქტებს. ადგილობრივი მწარმოებლების უმეტესობა რეგისტრირებულია პირველი კლასის პროდუქციის მიხედვით, ხოლო რამდენიმე კომპანია რეგისტრირებულია მეორე კლასის პროდუქციის მიხედვით. ცოტა ხნის წინ, ვუჰანის და სხვა ადგილების გადაუდებელი საჭიროებების დასაკმაყოფილებლად, ბევრმა კომპანიამ აიღო "გადაუდებელი არხი" "მიმართეთ პირველი კლასის ჩანაწერის ნებართვისთვის". ვირუსის აღების მილი შედგება სინჯის აღების ნაცხის, ვირუსის შესანარჩუნებელი ხსნარისა და გარე შეფუთვისგან. იმის გამო, რომ არ არსებობს ერთიანი ეროვნული სტანდარტი ან ინდუსტრიის სტანდარტი, სხვადასხვა მწარმოებლის პროდუქტები მნიშვნელოვნად განსხვავდება.
1. სინჯის აღების ტამპონი: სინჯის აღების ტამპონი პირდაპირ კონტაქტშია სინჯის აღების ადგილთან და სინჯის თავისებური მასალა მჭიდროდ არის დაკავშირებული შემდგომ აღმოჩენასთან. სინჯის ტამპონის თავი უნდა იყოს დამზადებული პოლიესტერის (PE) სინთეტიკური ბოჭკოს ან რაიონის (ხელნაკეთი ბოჭკოებისგან). კალციუმის ალგინატის ღრუბლის ან ხის ჯოხის ტამპონების (მათ შორის ბამბუკის ჩხირების) გამოყენება არ შეიძლება, ხოლო ტამპონის თავის მასალა არ შეიძლება იყოს ბამბის ნაწარმი. იმის გამო, რომ ბამბის ბოჭკოს აქვს ცილის ძლიერი ადსორბცია, მისი შემდგომი შესანახი ხსნარში გამორეცხვა ადვილი არ არის; და როდესაც ხის ჯოხი ან ბამბუკის ჯოხი, რომელიც შეიცავს კალციუმის ალგინატს და ხის კომპონენტებს, გატეხილია, შესანახ ხსნარში გაჟღენთვა ასევე შთანთქავს პროტეინს და შეიძლება დათრგუნოს შემდგომი PCR რეაქცია. ნაცხის თავის მასალისთვის რეკომენდებულია ისეთი სინთეზური ბოჭკოების გამოყენება, როგორიცაა PE ბოჭკო, პოლიესტერი და პოლიპროპილენის ბოჭკო. ბუნებრივი ბოჭკოები, როგორიცაა ბამბა, არ არის რეკომენდებული. ასევე არ არის რეკომენდებული ნეილონის ბოჭკოები, რადგან ნეილონის ბოჭკოები (კბილის ჯაგრისის თავების მსგავსი) შთანთქავს წყალს. ცუდი, რის შედეგადაც ხდება ნიმუშის არასაკმარისი მოცულობა, რაც გავლენას ახდენს გამოვლენის სიჩქარეზე. კალციუმის ალგინატის ღრუბელი აკრძალულია ნაცხის მასალის აღებისას! ტამპონის სახელური არის ორი ტიპის: გატეხილი და ჩაშენებული. გატეხილი ტამპონი სინჯის აღების შემდეგ თავსდება შესანახ მილში, ხოლო მილის თავსახური ტყდება სინჯის სათავესთან მდებარე პოზიციიდან გატეხვის შემდეგ; ჩამონტაჟებული ტამპონი სინჯის აღების შემდეგ პირდაპირ ათავსებს სინჯის საცობში შესანახ მილში და ჩაშენებულია შესანახი მილის საფარი. ამ ორი მეთოდის შედარება, ეს უკანასკნელი შედარებით უსაფრთხოა. როდესაც გატეხილი ტამპონი გამოიყენება უფრო მცირე ზომის შესანახ მილთან ერთად, ამან შეიძლება გამოიწვიოს მილში სითხის დაღვრა, როდესაც გატეხილია და სრული ყურადღება უნდა მიექცეს პროდუქტის არასათანადო გამოყენების შედეგად გამოწვეულ დაბინძურების რისკს. ნაცხის სახელურის მასალისთვის რეკომენდებულია ღრუ პოლისტიროლის (PS) წნეხილი მილის ან პოლიპროპილენის (PP) საინექციო საინექციო მილის გამოყენება. რა მასალაც არ უნდა იყოს გამოყენებული, კალციუმის ალგინატის დანამატები არ შეიძლება დაემატოს; ხის ჩხირები ან ბამბუკის ჩხირები. მოკლედ, სინჯის ტამპონმა უნდა უზრუნველყოს სინჯის აღების რაოდენობა და გამოშვების რაოდენობა, ხოლო შერჩეულ მასალებს არ უნდა ჰქონდეს ნივთიერებები, რომლებიც გავლენას ახდენენ შემდგომ ტესტირებაზე.
2. ვირუსის შესანარჩუნებელი ხსნარი: არსებობს ორი სახის ვირუსის შესანარჩუნებელი ხსნარი, რომელიც ფართოდ გამოიყენება ბაზარზე, ერთი არის ვირუსის შესანარჩუნებელი ხსნარი, რომელიც შეცვლილია სატრანსპორტო საშუალების საფუძველზე და მეორე არის შეცვლილი ხსნარი ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციის ლიზატისთვის.
პირველის მთავარი კომპონენტია Eagle-ის ძირითადი კულტურის გარემო (MEM) ან ჰენკის დაბალანსებული მარილი, რომელსაც ემატება მარილები, ამინომჟავები, ვიტამინები, გლუკოზა და ცილა, რომელიც აუცილებელია ვირუსის გადარჩენისთვის. ეს შესანახი ხსნარი იყენებს ფენოლის წითელ ნატრიუმის მარილს, როგორც ინდიკატორს და ხსნარს. როდესაც pH არის 6.6-8.0, ხსნარი ვარდისფერია. კონსერვაციის ხსნარს ემატება საჭირო გლუკოზა, L-გლუტამინი და ცილა. ცილა მოწოდებულია ნაყოფის მსხვილფეხა რქოსანი შრატის ან მსხვილფეხა რქოსანი შრატის ალბუმინის სახით, რომელსაც შეუძლია ვირუსის ცილის გარსის სტაბილიზაცია. იმის გამო, რომ კონსერვაციის ხსნარი მდიდარია ნუტრიენტებით, ის ხელს უწყობს ვირუსის გადარჩენას, მაგრამ ასევე სასარგებლოა ბაქტერიების ზრდისთვის. თუ კონსერვაციის ხსნარი დაბინძურებულია ბაქტერიებით, ის გამრავლდება დიდი რაოდენობით. ნახშირორჟანგი მის მეტაბოლიტებში გამოიწვევს კონსერვაციული ხსნარის pH-ის დაცემას ვარდისფერიდან ყვითლდება. აქედან გამომდინარე, მწარმოებლების უმეტესობამ დაამატა ანტიბაქტერიული ინგრედიენტები მათ ფორმულებში. რეკომენდებული ანტიბაქტერიული საშუალებებია პენიცილინი, სტრეპტომიცინი, გენტამიცინი და პოლიმიქსინი B. ნატრიუმის აზიდი და 2-მეთილი არ არის რეკომენდებული ინჰიბიტორები, როგორიცაა 4-მეთილ-4-იზოთიაზოლინ-3-ონი (MCI) და 5-ქლორო-2-მეთილ-4. -isothiazolin-3-one (CMCI), რადგან ეს კომპონენტები გავლენას ახდენენ PCR რეაქციაზე. ვინაიდან ამ კონსერვაციის ხსნარით მოწოდებული ნიმუში ძირითადად ცოცხალი ვირუსია, ნიმუშის ორიგინალურობა შეიძლება შენარჩუნდეს მაქსიმალურად და ის შეიძლება გამოყენებულ იქნას არა მხოლოდ ვირუსის ნუკლეინის მჟავების მოპოვებისა და გამოვლენისთვის, არამედ კულტივირებისთვის და ვირუსების იზოლაცია. თუმცა, უნდა აღინიშნოს, რომ გამოვლენისთვის გამოყენებისას ნუკლეინის მჟავას მოპოვება და გაწმენდა უნდა განხორციელდეს ინაქტივაციის შემდეგ.
ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციის ლიზატზე მომზადებული სხვა სახის კონსერვაციული ხსნარი, ძირითადი კომპონენტებია დაბალანსებული მარილები, EDTA ქელატის აგენტი, გუანიდინის მარილი (როგორიცაა გუანიდინის იზოთიოციანატი, გუანიდინის ჰიდროქლორიდი და ა. სურფაქტანტები (როგორიცაა ტეტრადეცილტრიმეთილამონიუმი ოქსალატი), ფენოლი, 8-ჰიდროქსიქინოლინი, დითიოთრეიტოლი (DTT), პროტეინაზა K და სხვა კომპონენტები, ეს შესანახი ხსნარი არის უშუალოდ ვირუსის გაყოფა ნუკლეინის მჟავის გასათავისუფლებლად და RNase-ის აღმოსაფხვრელად. თუ გამოიყენება მხოლოდ RT-PCR-სთვის, ის უფრო შესაფერისია, მაგრამ ლიზატს შეუძლია ვირუსის ინაქტივაცია. ამ ტიპის ნიმუში არ შეიძლება გამოყენებულ იქნას ვირუსის კულტურის გამოყოფისთვის.
ვირუსის შემანარჩუნებელ ხსნარში გამოყენებული ლითონის იონური ქელატაციური აგენტი რეკომენდებულია EDTA მარილების (როგორიცაა დიკალიუმის ეთილენდიამინტეტრაძმარმჟავა, დინატრიუმის ეთილენდიამინტეტრაძმარმჟავა და ა.შ.) გამოყენება და არ არის რეკომენდებული ჰეპარინის გამოყენება (როგორიცაა ნატრიუმის ჰეპარინი, ლითიუმის ჰეპარინი). რათა არ იმოქმედოს PCR დეტექტირებაზე.
3. კონსერვაციის მილი: კონსერვაციის მილის მასალა უნდა იყოს შერჩეული ყურადღებით. არსებობს მონაცემები, რომლებიც ვარაუდობენ, რომ პოლიპროპილენი (პოლიპროპილენი) დაკავშირებულია ნუკლეინის მჟავის ადსორბციასთან, განსაკუთრებით მაღალი დაძაბულობის იონების კონცენტრაციის დროს, პოლიეთილენი (პოლიეთილენი) უფრო სასურველია, ვიდრე პოლიპროპილენი (პოლიპროპილენი) ადვილად აღსაქმელი დნმ/რნმ. პოლიეთილენ-პროპილენის პოლიმერული (პოლიალომერი) პლასტიკური და ზოგიერთი სპეციალურად დამუშავებული პოლიპროპილენის (პოლიპროპილენის) პლასტმასის კონტეინერი უფრო შესაფერისია დნმ/რნმ-ის შესანახად. გარდა ამისა, მსხვრევადი ტამპონის გამოყენებისას, შესანახი მილი უნდა შეეცადოს შეარჩიოს 8 სმ-ზე მეტი სიმაღლის კონტეინერი, რათა თავიდან აიცილოს შიგთავსის დაფრქვევა და დაბინძურება, როდესაც ტამპონი გატეხილია.
4. წყალი წარმოებისთვის კონსერვაციული ხსნარი: ულტრასუფთა წყალი, რომელიც გამოიყენება წარმოების შემანარჩუნებელი ხსნარისთვის, უნდა გაიფილტროს 13000 მოლეკულური წონის ულტრაფილტრაციის მემბრანის მეშვეობით, რათა უზრუნველყოს პოლიმერული მინარევების მოცილება ბიოლოგიური წყაროებიდან, როგორიცაა RNase, DNase და ენდოტოქსინი, და ჩვეულებრივი გაწმენდა არ არის რეკომენდებული. წყალი ან გამოხდილი წყალი.
2. ვირუსის სინჯის მილების გამოყენება
ვირუსის აღების მილის გამოყენებით ნიმუშის აღება ძირითადად იყოფა ოროფარინგეალური და ნაზოფარინგეალური სინჯის აღებად:
1. ოროფარინგეალური სინჯის აღება: ჯერ ენას დააწექით ენის დამჭერით, შემდეგ ამოიღეთ ნიმუშის ნაცხის თავი ყელში, რათა წაშალოთ ორმხრივი ფარინგეალური ნუშისებრი ჯირკვლები და ფარინგეალური უკანა კედელი, და გაიწმინდეთ ფარინგეალური უკანა კედელი მსუბუქი ძალით, მოერიდეთ ენაზე შეხებას. ერთეული.
2. ნაზოფარინგეალური სინჯის აღება: ცხვირის წვერიდან ყურის წილამდე გაზომეთ მანძილი და მონიშნეთ თითით, სინჯის აღება ცხვირის ღრუში ჩადეთ ვერტიკალური ცხვირის (სახის) მიმართულებით, ნაცხი უნდა გაგრძელდეს. ყურის წილის სიგრძის მინიმუმ ნახევარი ცხვირის წვერამდე, დატოვეთ ნაცხი ცხვირში 15-30 წამის განმავლობაში; ნაზად ატრიალეთ 3-5-ჯერ და ამოიღეთ ტამპონი.
გამოყენების მეთოდიდან ძნელი მისახვედრი არ არის, ოროფარინგეალური ნაცხია თუ ცხვირ-ხახის ნაცხი, სინჯის აღება ტექნიკური ამოცანაა, რომელიც რთული და დაბინძურებულია. შეგროვებული ნიმუშის ხარისხი პირდაპირ კავშირშია შემდგომ გამოვლენასთან. თუ შეგროვებულ ნიმუშს აქვს ვირუსული დატვირთვა დაბალი, ადვილად იწვევს ცრუ ნეგატივს, რთულია დიაგნოზის დადასტურება.
გამოქვეყნების დრო: ივნ-21-2020