1. Iwwer d'Fabrikatioun vu Virusprobe-Tubes
Virusprobe-Tubes gehéieren zu medizinesche Geräterprodukter. Déi meescht Gewalt Hiersteller sinn no den éischte Klasseprodukter registréiert, a wéineg Firme sinn no den zweetklassesche Produkter registréiert. Viru kuerzem, fir d'Noutbedürfnisser vu Wuhan an op anere Plazen z'erreechen, hu vill Firmen den "Noutkanal" geholl "Uwende fir déi éischt Klass Rekord Erlaabnis. De Virusprobe-Tube besteet aus engem Probe-Sub, Viruskonservéierungsléisung an äusseren Verpackung. Well et keen vereenegt nationale Standard oder Industriestandard gëtt, variéieren d'Produkter vu verschiddene Hiersteller staark.
1. Sampling Swab: De Sampling Swab kontaktéiert direkt d'Probeplaz, an d'Material vum Probekopf ass enk mat der spéiderer Detektioun verbonnen. De Probe-Wäschkopf sollt aus Polyester (PE) syntheteschen Faser oder Rayon (kënschtlech Faser) gemaach ginn. Kalziumalginat Schwamm oder Holzstécker (inklusiv Bambusstécker) kënnen net benotzt ginn, an d'Material vum Swabkopf kann net Kottengprodukter sinn. Well Kottengfaser eng staark Adsorptioun vu Protein huet, ass et net einfach, an déi spéider Späicherléisung ze elueren; a wann en hëlze Stéck oder Bambusstéck mat Kalziumalginat an Holzkomponenten gebrach ass, gëtt d'Soaking an der Späicherléisung och Protein adsorbéiert, a souguer wäert Et kann déi spéider PCR Reaktioun hemmen. Et ass recommandéiert synthetesch Faseren wéi PE-Faser, Polyesterfaser a Polypropylenfaser fir d'Material vum Swabkopf ze benotzen. Natierlech Faser wéi Koteng sinn net recommandéiert. Nylon Faseren sinn och net recommandéiert well Nylon Faseren (ähnlech zu Zännbürtskopf) Waasser absorbéieren. Schlecht, wat zu net genuch Probevolumen resultéiert, wat d'Erkennungsquote beaflosst. Kalziumalginat Schwamm ass verbueden fir Probenmaterial ze probéieren! Swab Handle huet zwou Zorte: gebrach an agebaut. De gebrachene Swab gëtt an de Späicherröhr no der Probe plazéiert, an d'Röhrekappe gëtt gebrach nodeems se vun der Positioun no bei der Probekopf gebrach ginn; den agebaute Swab setzt de Probestuerm direkt an d'Späicherröhre no der Probe, an de Späicherröhrdeckel ass agebaut. Wann Dir déi zwou Methoden vergläicht, ass déi lescht relativ sécher. Wann de gebrachene Swab a Verbindung mat enger méi klenger Gréisst Späicherröhr benotzt gëtt, kann et flësseg Sprëtzen am Rouer verursaachen wann se gebrach ass, a voll Opmierksamkeet sollt op de Risiko vu Kontaminatioun bezuelt ginn duerch falsch Notzung vum Produkt. Et ass recommandéiert huel Polystyrol (PS) extrudéiert Röhre oder Polypropylen (PP) Injektiouns-Kribbelröhr fir d'Material vum Swab-Griff ze benotzen. Egal wat Material benotzt gëtt, Kalziumalginatadditive kënnen net dobäigesat ginn; Holzstécker oder Bambusstécker. Kuerz gesot, d'Probe-Swab soll d'Quantitéit vun der Probe an d'Quantitéit vun der Verëffentlechung garantéieren, an déi gewielte Materialien däerfen keng Substanzen hunn déi spéider Tester beaflossen.
2. Virus Erhaalung Léisung: Et ginn zwou Aarte vu Virus Erhaalung Léisungen wäit um Maart benotzt, eent ass eng Virus Ënnerhalt Léisung geännert baséiert op der Transport Medium, an déi aner ass eng geännert Léisung fir Nukleinsäure Extraktioun lysate.
Den Haaptkomponent vun der fréierer ass dem Eagle säi Basiskulturmedium (MEM) oder dem Hank säi equilibréierte Salz, dat mat de Salzer, Aminosäuren, Vitaminen, Glukos a Protein bäigefüügt gëtt fir d'Iwwerliewe vum Virus. Dës Späicherléisung benotzt Phenolrout Natriumsalz als Indikator a Léisung. Wann de pH-Wert 6,6-8,0 ass, ass d'Léisung rosa. Déi néideg Glukos, L-Glutamin a Protein ginn an d'Konservéierungsléisung bäigefüügt. De Protein gëtt a Form vu Fetal Bovine Serum oder Bovine Serum Albumin geliwwert, wat d'Proteinschuel vum Virus stabiliséieren kann. Well d'Konservatiounsléisung reich an Nährstoffer ass, ass se förderlech fir d'Iwwerliewe vum Virus awer och positiv fir de Wuesstum vu Bakterien. Wann d'Konservatiounsléisung mat Bakterien kontaminéiert ass, wäert se a grousse Quantitéite multiplizéieren. De Kuelendioxid a senge Metaboliten verursaacht datt d'Konservéierungsléisung pH vu rosa falen gëtt giel. Dofir hunn déi meescht Hiersteller antibakteriell Zutaten un hir Formuléierungen bäigefüügt. Déi recommandéiert antibakteriell Agenten sinn Penicillin, Streptomycin, Gentamicin a Polymyxin B. Natriumazid an 2-Methyl sinn net recommandéiert Inhibitoren wéi 4-Methyl-4-Isothiazolin-3-One (MCI) a 5-Chlor-2-Methyl-4 -isothiazolin-3-one (CMCI) well dës Komponenten en Effekt op d'PCR Reaktioun hunn. Zënter datt d'Probe vun dëser Konservéierungsléisung am Fong e Live Virus ass, kann d'Originalitéit vun der Probe am gréissten Ausmooss gehale ginn, an et kann net nëmme fir d'Extraktioun an d'Detektioun vu Virusnukleinsäuren benotzt ginn, awer och fir d'Kultivatioun an Isolatioun vu Viren. Wéi och ëmmer, et sollt bemierkt datt wann se fir Erkennung benotzt ginn, d'Nukleinsäureextraktioun a Reinigung muss no Inaktivéierung ausgefouert ginn.
Eng aner Aart vu Konservéierungsléisung virbereet baséiert op Nukleinsäure Extraktiounslysat, d'Haaptkomponente sinn ausgeglachene Salzer, EDTA chelatéierend Agent, Guanidin Salz (wéi Guanidin Isothiocyanat, Guanidin Hydrochlorid, etc.), Anionesch Surfaktant (wéi Dodekan Natriumsulfat), kationesch Surfaktanten (wéi Tetradecyltrimethylammoniumoxalat), Phenol, 8-Hydroxyquinolin, Dithiothreitol (DTT), Proteinase K an aner Komponenten. Wann nëmme fir RT-PCR benotzt gëtt, ass et méi gëeegent, awer de Lysat kann de Virus inaktivéieren. Dës Aart vu Probe kann net fir Viruskulturtrennung benotzt ginn.
De Metallion-chelatéierende Agent, deen an der Viruskonservéierungsléisung benotzt gëtt, ass recommandéiert fir EDTA Salze ze benotzen (wéi Dikaliumethylendiamintetraättiksäure, Dinatriumethylendiamintetraättiksäure, etc.), an et ass net recommandéiert Heparin ze benotzen (wéi Natriumheparin, Lithiumheparin), fir net PCR Detektioun ze beaflossen.
3. Konservéierungsröhre: D'Material vun der Konservéierungsröhre sollt suergfälteg ausgewielt ginn. Et ginn Daten déi suggeréieren datt Polypropylen (Polypropylen) mat der Adsorptioun vun Nukleinsäure verbonnen ass, besonnesch bei héijer Spannungsionkonzentratioun, Polyethylen (Polyethylen) ass méi léiwer wéi Polypropylen (Polypropylen) Einfach ze begräifen DNA / RNA. Polyethylen-propylene Polymer (Polyallomer) Plastik an e puer speziell veraarbecht Polypropylen (Polypropylene) Plastik Container si méi gëeegent fir DNA / RNA Stockage. Zousätzlech, wann Dir e zerbriechbare Swab benotzt, sollt d'Späicherröhre probéieren e Container mat enger Héicht méi wéi 8 cm ze wielen fir ze verhënneren datt den Inhalt gesprëtzt a kontaminéiert gëtt wann de Swab gebrach ass.
4. Waasser fir d'Produktiounskonservéierungsléisung: D'ultrapure Waasser, dat fir d'Produktiounskonservéierungsléisung benotzt gëtt, soll duerch eng Ultrafiltratiounsmembran mat engem Molekulargewicht vun 13.000 gefiltert ginn fir d'Entfernung vu Polymer Gëftstoffer aus biologesche Quellen ze garantéieren, wéi RNase, DNase, an Endotoxin, an normal Reinigung ass net recommandéiert. Waasser oder destilléiert Waasser.
2. Benotzung vu Virusprobe-Tubes
Sampling mam Virusprobe-Tube ass haaptsächlech an Oropharyngeal Proben an Nasopharyngeal Proben ënnerdeelt:
1. Oropharyngeal Sampling: Éischt dréckt d'Zong mat der Zongdepressor, da verlängert de Kapp vun der Probe-Wäsch an den Hals fir d'bilateral Pharyngeal-Mandelen an d'posterior Pharyngealmauer ze wëschen, a wëschen d'posterior pharyngeal Mauer mat liicht Kraaft, evitéiert d'Zong ze beréieren. Eenheet.
2. Nasopharyngeal Probe: moosst d'Distanz vun der Nuesspëtzt bis zum Ouerlobe mat engem Swab a markéiert mat engem Fanger, setzt d'Sampling Swab an d'Nueshall an d'Richtung vun der vertikaler Nues (Gesiicht), de Swab soll verlängeren op d'mannst d'Halschent vun der Längt vun der Ouerlobe bis zum Tipp vun der Nues, Loosst d'Sub an der Nues fir 15-30 Sekonnen, sanft 3-5 rotéieren mol, an zitt de Swab zréck.
Et ass net schwéier aus der Benotzungsmethod ze gesinn, ob et en Oropharyngeal Swab oder en Nasopharyngeal Swab ass, Proben ass eng technesch Aufgab, déi schwéier a kontaminéiert ass. D'Qualitéit vun der gesammelter Probe ass direkt mat der spéider Detektioun verbonnen. Wann d'gesammelt Probe eng viral Last huet Low, einfach falsch Negativer ze verursaachen, schwéier d'Diagnos ze bestätegen.
Post Zäit: Jun-21-2020
