1. Apie virusų mėginių ėmimo vamzdelių gamybą
Virusų mėginių ėmimo vamzdeliai priklauso medicinos prietaisų gaminiams. Dauguma vietinių gamintojų registruojami pagal pirmos klasės gaminius, o nedaug įmonių – pagal antros klasės gaminius. Pastaruoju metu daugelis įmonių, siekdamos patenkinti Uhano ir kitų vietų nepaprastosios padėties poreikius, pasinaudojo „avarinės padėties kanalu“ „Prašyti pirmos klasės rekordo leidimo. Viruso mėginių ėmimo vamzdelis sudarytas iš mėginių ėmimo tampono, viruso konservavimo tirpalo ir išorinės pakuotės. Kadangi nėra vieningo nacionalinio standarto ar pramonės standarto, įvairių gamintojų gaminiai labai skiriasi.
1. Mėginių ėmimo tamponas: mėginio ėmimo tamponas tiesiogiai liečiasi su mėginių ėmimo vieta, o mėginio ėmimo galvutės medžiaga yra glaudžiai susijusi su vėlesniu aptikimu. Mėginių ėmimo tampono galvutė turi būti pagaminta iš poliesterio (PE) sintetinio pluošto arba viskozės (dirbtinio pluošto). Negalima naudoti kalcio alginato kempinės ar medinių pagaliukų (įskaitant bambuko pagaliukus), o tampono galvutės medžiaga negali būti medvilnės gaminiai. Kadangi medvilnės pluoštas turi stiprią baltymų adsorbciją, jį nėra lengva išplauti į tolesnį laikymo tirpalą; o kai medinis pagaliukas ar bambukinis pagaliukas, kuriame yra kalcio alginato ir medinių komponentų, sulaužomi, mirkymas laikymo tirpale taip pat adsorbuoja baltymus ir netgi gali slopinti tolesnę PGR reakciją. Tampono galvutės medžiagai rekomenduojama naudoti sintetinius pluoštus, tokius kaip PE pluoštas, poliesterio pluoštas ir polipropileno pluoštas. Nerekomenduojama naudoti natūralaus pluošto, pavyzdžiui, medvilnės. Nailono pluoštai taip pat nerekomenduojami, nes nailono pluoštai (panašūs į dantų šepetėlio galvutes) sugeria vandenį. Prastas, todėl nepakanka mėginių ėmimo apimties, o tai turi įtakos aptikimo greičiui. Kalcio alginato kempinė draudžiama imti tamponų medžiagą! Tampono rankena yra dviejų tipų: sulūžusi ir įmontuota. Nulaužtas tamponas po mėginio paėmimo įdedamas į laikymo mėgintuvėlį, o mėgintuvėlio dangtelis nulaužiamas iš vietos šalia mėginio ėmimo galvutės; įmontuotas tamponas po mėginio paėmimo tiesiogiai įdeda mėginio ėmimo tamponą į laikymo vamzdelį, o laikymo vamzdelio dangtelis yra įmontuotas. Sulygiuokite mažą angą su rankenos viršumi ir priveržkite mėgintuvėlio dangtelį. Palyginus abu metodus, pastarasis yra gana saugus. Kai sulaužytas tamponas naudojamas kartu su mažesnio dydžio laikymo tūbele, nulaužus vamzdelį gali išsitaškyti skysčių, todėl reikia atkreipti visą dėmesį į užteršimo riziką dėl netinkamo gaminio naudojimo. Tampono rankenos medžiagai rekomenduojama naudoti tuščiavidurį polistireno (PS) ekstruzinį vamzdelį arba polipropileno (PP) įpurškimo raukšlių vamzdelį. Nesvarbu, kokia medžiaga naudojama, kalcio alginato priedų negalima dėti; mediniai pagaliukai arba bambukiniai pagaliukai. Trumpai tariant, mėginių ėmimo tepinėlis turi užtikrinti ėminių ėmimo ir išleidimo kiekį, o pasirinktose medžiagose neturi būti medžiagų, turinčių įtakos tolesniam tyrimui.
2. Virusų konservavimo tirpalas: rinkoje yra plačiai naudojami dviejų tipų virusų išsaugojimo sprendimai: vienas yra virusų palaikymo tirpalas, modifikuotas pagal transportavimo terpę, o kitas yra modifikuotas tirpalas, skirtas nukleorūgščių ekstrahavimo lizatui.
Pagrindinis pirmųjų komponentas yra Eagle's bazinė auginimo terpė (MEM) arba Hanko subalansuota druska, į kurią pridedamos viruso išgyvenimui reikalingos druskos, aminorūgštys, vitaminai, gliukozė ir baltymai. Šiame laikymo tirpale kaip indikatorius ir tirpalas naudojama fenolio raudonojo natrio druska. Kai pH vertė yra 6,6-8,0, tirpalas yra rausvas. Į konservavimo tirpalą pridedama reikiamos gliukozės, L-glutamino ir baltymų. Baltymai tiekiami vaisiaus galvijų serumo arba galvijų serumo albumino pavidalu, kurie gali stabilizuoti viruso baltyminį apvalkalą. Kadangi konservavimo tirpale gausu maistinių medžiagų, jis yra palankus viruso išlikimui, bet taip pat naudingas bakterijų augimui. Jei konservavimo tirpalas bus užterštas bakterijomis, jis dauginsis dideliais kiekiais. Dėl anglies dioksido jo metabolituose konservavimo tirpalo pH nukris nuo rožinės spalvos. Pasidaro geltona. Todėl dauguma gamintojų į savo kompozicijas įtraukė antibakterinių ingredientų. Rekomenduojami antibakteriniai preparatai yra penicilinas, streptomicinas, gentamicinas ir polimiksinas B. Natrio azidas ir 2-metilas nerekomenduojami. Tokie inhibitoriai kaip 4-metil-4-izotiazolin-3-onas (MCI) ir 5-chlor-2-metil-4 -izotiazolin-3-oną (CMCI), nes šie komponentai turi įtakos PGR reakcijai. Kadangi šio konservavimo tirpalo pateiktas mėginys iš esmės yra gyvas virusas, galima maksimaliai išlaikyti mėginio originalumą ir jį naudoti ne tik virusų nukleorūgščių ekstrakcijai ir nustatymui, bet ir auginimui bei virusų išskyrimas. Tačiau reikia pažymėti, kad naudojant aptikimui, nukleino rūgštys turi būti ekstrahuojamos ir išgrynintos po inaktyvavimo.
Kitas konservavimo tirpalas, paruoštas remiantis nukleorūgščių ekstrahavimo lizatu, kurio pagrindiniai komponentai yra subalansuotos druskos, EDTA kompleksonas, guanidino druska (pvz., guanidino izotiocianatas, guanidino hidrochloridas ir kt.), anijoninė aktyvioji paviršiaus medžiaga (pvz., dodekanas, natrio sulfatas), katijonas. paviršinio aktyvumo medžiagos (pvz., tetradeciltrimetilamonio oksalatas), fenolis, 8-hidroksichinolinas, ditiotreitolis (DTT), proteinazė K ir kiti komponentai. Šis saugojimo tirpalas skirtas tiesiogiai suskaidyti virusą, kad būtų išleista nukleino rūgštis ir pašalinta RNazė. Jei naudojamas tik RT-PGR, jis yra tinkamesnis, tačiau lizatas gali inaktyvuoti virusą. Šio tipo mėginiai negali būti naudojami virusų kultūrai atskirti.
Viruso konservavimo tirpale naudojamai metalo jonų kompleksonai rekomenduojama naudoti EDTA druskas (pvz., dikalio etilendiaminotetraacto rūgštį, dinatrio etilendiamintetraacto rūgštį ir kt.), o nerekomenduojama naudoti heparino (pvz., natrio heparino, ličio heparino), kad nepakenktų PGR aptikimui.
3. Konservavimo vamzdelis: Konservavimo vamzdelio medžiagą reikia pasirinkti atsargiai. Yra duomenų, rodančių, kad polipropilenas (polipropilenas) yra susijęs su nukleino rūgšties adsorbcija, ypač esant didelės įtampos jonų koncentracijai, polietilenas (polietilenas) yra labiau pageidaujamas nei polipropilenas (polipropilenas) Lengva suvokti DNR/RNR. DNR/RNR saugojimui labiau tinka polietileno-propileno polimero (polialomero) plastikas ir kai kurie specialiai apdoroto polipropileno (polipropileno) plastikiniai indai. Be to, naudojant lūžtantį tamponą, laikymo vamzdelis turi pabandyti pasirinkti didesnį nei 8 cm aukščio indą, kad turinys neaptaškytų ir neužterštų, kai tamponas sulaužomas.
4. Vanduo gamybiniam konservavimo tirpalui: ypač grynas vanduo, naudojamas gamybiniam konservavimo tirpalui, turi būti filtruojamas per ultrafiltravimo membraną, kurios molekulinė masė yra 13 000, kad būtų užtikrintas polimero priemaišų pašalinimas iš biologinių šaltinių, tokių kaip RNazė, DNazė ir endotoksinas, ir įprastas valymas nerekomenduojamas. Vanduo arba distiliuotas vanduo.
2. Virusų mėginių ėmimo mėgintuvėlių naudojimas
Mėginių ėmimas naudojant viruso mėginių ėmimo vamzdelį daugiausia skirstomas į mėginių ėmimą iš burnos ir ryklės ir nosiaryklės:
1. Burnos ryklės mėginių ėmimas: pirmiausia paspauskite liežuvį liežuvio spaudikliu, tada mėginio ėmimo tampono galvutę ištieskite į gerklę, kad nuvalykite dvišales ryklės tonziles ir užpakalinę ryklės sienelę, ir nuvalykite užpakalinę ryklės sienelę lengva jėga, nelieskite liežuvio. vienetas.
2. Nosiaryklės mėginių ėmimas: tamponu išmatuokite atstumą nuo nosies galiuko iki ausies landos ir pažymėkite pirštu, mėginio ėmimo tamponą įkiškite į nosies ertmę vertikalios nosies (veido) kryptimi, tepinėlis turi išsitęsti. bent pusę ausies skilties ilgio iki nosies galiuko. Palikite tamponą nosyje 15-30 sekundžių, švelniai pasukite 3-5 kartus ir ištraukite tamponą.
Iš naudojimo būdo nesunku suprasti, ar tai burnos ir ryklės tepinėlis, ar nosiaryklės tepinėlis, mėginių paėmimas yra techninė užduotis, kuri yra sunki ir užteršta. Surinkto mėginio kokybė yra tiesiogiai susijusi su vėlesniu aptikimu. Jei paimtame mėginyje viruso apkrova Maža, lengva sukelti klaidingus neigiamus rezultatus, sunku patvirtinti diagnozę.
Paskelbimo laikas: 2020-06-21
