1. Par vīrusa paraugu ņemšanas caurulēm
Vīrusa paraugu ņemšanas caurules pieder medicīnas ierīču produktiem. Lielākā daļa vietējo ražotāju ir reģistrēti saskaņā ar pirmās klases produktiem, un tikai daži uzņēmumi ir reģistrēti saskaņā ar otrās klases produktiem. Nesen, lai apmierinātu Wuhan un citu vietu ārkārtas vajadzības, daudzi uzņēmumi ir izvēlējušies “ārkārtas kanālu”, “Piesakās pirmās klases rekorda atļauja.
1. Paraugu ņemšanas tampons: paraugu ņemšanas tampons tieši saskaras ar paraugu ņemšanas vietu, un paraugu ņemšanas galvas materiāls ir cieši saistīts ar turpmāko noteikšanu. Paraugu ņemšanas tamponu galvai jābūt izgatavotai no poliestera (PE) sintētiskās šķiedras vai vēža (cilvēka radītā šķiedra). Nevar izmantot kalcija algināta sūkli vai koka nūju tamponus (ieskaitot bambusa nūjas), un tamponu galvas materiāls nevar būt kokvilnas izstrādājumi. Tā kā kokvilnas šķiedrai ir spēcīga olbaltumvielu adsorbcija, nav viegli elutēt nākamajā uzglabāšanas šķīdumā; un kad ir salauzta koka nūja vai bambusa nūja, kas satur kalcija alginātu un koka komponentus, mērcēšana uzglabāšanas šķīdumā arī adsorbēs olbaltumvielu, un pat tas var kavēt sekojošo PCR reakciju. Uz tampona galvas materiālam ieteicams izmantot sintētiskas šķiedras, piemēram, PE šķiedru, poliestera šķiedru un polipropilēna šķiedru. Nav ieteicams dabiskām šķiedrām, piemēram, kokvilnai, nav ieteicams. Nav ieteicams arī neilona šķiedras, jo neilona šķiedras (līdzīgas zobu sukas galvām) absorbē ūdeni. Slikts, kā rezultātā nepietiekams paraugu ņemšanas tilpums, kas ietekmē noteikšanas ātrumu. Kalcija alginātu sūklis ir aizliegts paraugu ņemšanai uz tā sponu materiāla! Uz tama rokturim ir divi veidi: salauzts un iebūvēts. Salauzto tamponu ievieto uzglabāšanas mēģenē pēc paraugu ņemšanas, un caurules vāciņš ir salauzts pēc tam, kad tas ir salauzts no pozīcijas netālu no paraugu ņemšanas galvas; Iebūvētais tampons pēc paraugu ņemšanas tieši ievieto paraugu ņemšanas tamponu uzglabāšanas mēģenē, un uzglabāšanas caurules vāks ir iebūvēts, izlīdzinot mazo caurumu ar roktura augšdaļu un pievelciet caurules pārsegu. Salīdzinot abas metodes, pēdējais ir salīdzinoši drošs. Ja salauztais tampons tiek izmantots kopā ar mazāka izmēra uzglabāšanas cauruli, tas var izraisīt šķidruma izšļakstīšanos mēģenē, kad tas ir salauzts, un pilnīga uzmanība jāpievērš piesārņojuma riskam, ko izraisa nepareiza produkta lietošana. Ieteicams izmantot dobu polistirola (PS) ekstrudētu cauruli vai polipropilēna (PP) iesmidzināšanas caurulīti tamponu roktura materiālam. Neatkarīgi no tā, kāds materiāls tiek izmantots, nevar pievienot kalcija alginātu piedevas; koka nūjas vai bambusa nūjas. Īsāk sakot, paraugu ņemšanas tamponam būtu jānodrošina paraugu ņemšanas un izdalīšanās apjoms, un atlasītajiem materiāliem nedrīkst būt vielām, kas ietekmē turpmāko pārbaudi.
2. Vīrusa saglabāšanas risinājums: tirgū plaši izmanto divu veidu vīrusu saglabāšanas risinājumus, viens ir vīrusa uzturēšanas šķīdums, kas modificēts, pamatojoties uz transporta līdzekli, bet otrs ir modificēts šķīdums nukleīnskābes ekstrakcijas lizātam.
Bijušā galvenā sastāvdaļa ir ērgļa pamata barotne (MEM) vai Hanka sabalansētais sāls, ko pievieno ar sāļiem, aminoskābēm, vitamīniem, glikozi un olbaltumvielām, kas nepieciešamas vīrusa izdzīvošanai. Šajā uzglabāšanas šķīdumā kā indikatoru un šķīdumu tiek izmantots fenola sarkans nātrija sāls. Kad pH vērtība ir 6,6–8,0, šķīdums ir rozā. Nepieciešamais glikozes, L-glutamīna un olbaltumvielu pievienošana tiek pievienota saglabāšanas šķīdumam. Olbaltumviela ir nodrošināta augļa liellopu seruma vai liellopu seruma albumīna veidā, kas var stabilizēt vīrusa olbaltumvielu apvalku. Tā kā saglabāšanas šķīdums ir bagāts ar barības vielām, tas veicina vīrusa izdzīvošanu, bet arī labvēlīgu baktēriju augšanai. Ja saglabāšanas šķīdums ir piesārņots ar baktērijām, tas reizinās lielos daudzumos. Oglekļa dioksīds tā metabolītos izraisīs saglabāšanas šķīduma pH līmeni no rozā pagriezieniem dzeltenā krāsā. Tāpēc vairums ražotāju to preparātiem ir pievienojuši antibakteriālas sastāvdaļas. Ieteicamie antibakteriālie līdzekļi ir penicilīns, streptomicīns, gentamicīns un polimiksīns B. Nātrija azīds un 2-metil nav ieteicams inhibitori, piemēram, 4-metil-4-izotiazolīns-3-viens-viens (MCI) un 5-hlor-2-metil-4-izotizolīna-3-1 (cMCI), jo tie ir. Tā kā šī saglabāšanas risinājuma nodrošinātais paraugs būtībā ir dzīvs vīruss, parauga oriģinalitāti var saglabāt vislielākajā mērā, un to var izmantot ne tikai vīrusa nukleīnskābju ekstrakcijai un noteikšanai, bet arī vīrusu kultivēšanai un izolēšanai. Tomēr jāatzīmē, ka, lietojot noteikšanai, pēc inaktivācijas jāveic nukleīnskābju ekstrakcija un attīrīšana.
Another kind of preservation solution prepared based on nucleic acid extraction lysate, the main components are balanced salts, EDTA chelating agent, guanidine salt (such as guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, etc.), anionic surfactant (such as dodecane Sodium sulfate), cationic surfactants (such as tetradecyltrimethylammonium oxalate), Fenols, 8-hidroksihinolīns, ditiotreitols (DTT), proteināze K un citi komponenti, šim uzglabāšanas šķīdumam ir tieši šķelt vīrusu, lai atbrīvotu nukleīnskābi un novērstu RNāzi. Ja tas tiek izmantots tikai RT-PCR, tas ir piemērotāks, bet lizāts var inaktivizēt vīrusu. Šāda veida paraugu nevar izmantot vīrusu kultūras atdalīšanai.
Metāla jonu helātu veidošanas līdzeklim, ko izmanto vīrusa saglabāšanas šķīdumā, ir ieteicams izmantot EDTA sāļus (piemēram, dipotija etilēndiamīnetetraetiķskābi, disodium etilēndiamīnetetraetiķskābi utt.), Un nav ieteicams izmantot heparīnu (piemēram, nātrija heparīnu, litija heparīnu), tāpēc tā neietekmē PCR.
3. Saglabāšanas caurule: uzmanīgi jāizvēlas saglabāšanas caurules materiāls. Ir dati, kas liecina, ka polipropilēns (polipropilēns) ir saistīts ar nukleīnskābes adsorbciju, īpaši ar augsta sprieguma jonu koncentrāciju, polietilēns (polietilēns) ir vairāk priekšroka nekā polipropilēns (polipropilēns), kas ir viegli satverams DNS/RNS. Polietilēna propilēna polimēra (polialallomēra) plastmasa un daži speciāli apstrādāti polipropilēna (polipropilēna) plastmasas konteineri ir vairāk piemēroti DNS/RNS uzglabāšanai. Turklāt, lietojot salaužamu tamponu, uzglabāšanas mēģenei jācenšas izvēlēties konteineru, kura augstums ir lielāks par 8 cm, lai novērstu satura izšļakstīšanos un piesārņojumu, kad tampons ir salauzts.
4. Ūdens ražošanas saglabāšanas šķīdumam: UltraPure Water, ko izmanto ražošanas saglabāšanas šķīdumam, jāfiltrē ar ultrafiltrācijas membrānu ar molekulmasu 13 000, lai nodrošinātu polimēru piemaisījumu noņemšanu no bioloģiskiem avotiem, piemēram, RNase, DNase un endotoksīnu, un parastā attīrīšana nav ieteicama. Ūdens vai destilēts ūdens.
2. Vīrusa paraugu ņemšanas cauruļu izmantošana
Paraugu ņemšana, izmantojot vīrusa paraugu ņemšanas cauruli, galvenokārt tiek sadalīta orofaringeālā paraugu ņemšanā un nazofarneksa paraugu ņemšanā:
1. Orofaringeālā paraugu ņemšana: Vispirms nospiediet mēli ar mēles nomācēju, pēc tam pagariniet paraugu tampona galvu rīklē, lai noslaucītu divpusējo faringeālo mandeles un aizmugurējo rīkles sienu un noslaucīt aizmugurējo faringeālās sienas ar vieglu spēku, izvairieties no mēles vienības.
2. Nasofaringeālā paraugu ņemšana: Izmēriet attālumu no deguna gala līdz auss daivai ar tamponu un atzīmējiet ar pirkstu, ievietojiet paraugu ņemšanas tamponu deguna dobumā vertikālā deguna (sejas) virzienā, tamponei jābūt vismaz pusei auss garuma auss lobot līdz galam.
No lietošanas metodes nav grūti pamanīt, neatkarīgi no tā, vai tas ir orofaringeālā tampons vai nazofarneksa tampons, paraugu ņemšana ir tehnisks uzdevums, kas ir grūts un piesārņots. Savāktā parauga kvalitāte ir tieši saistīta ar turpmāko noteikšanu. Ja savāktajam paraugam ir zema vīrusu slodze, viegli izraisāma viltus negatīvi, grūti apstiprināt diagnozi.
Pasta laiks: jūnijs-21-2020
