1. Momba ny fanamboarana fantsona santionany otrikaretina
Ny fantsona sampling otrik'aretina dia an'ny vokatra fitaovana fitsaboana. Ny ankamaroan'ny mpanamboatra an-trano dia misoratra anarana araka ny vokatra kilasy voalohany, ary vitsy ny orinasa misoratra anarana araka ny vokatra kilasy faharoa. Vao haingana, mba hanomezana fahafaham-po ny filan'ny vonjy maika an'i Wuhan sy ny toerana hafa, orinasa maro no naka ny "fantsona maika" "Mangataka fahazoan-dàlana amin'ny kilasy voalohany. Ny fantsona fanaovana santionan'ny viriosy dia ahitana sampling swab, vahaolana fiarovana amin'ny otrikaretina ary fonosana ivelany. Satria tsy misy fenitra nasionaly na fenitra indostrialy, ny vokatra avy amin'ny mpanamboatra isan-karazany dia miovaova be.
1. Sampling swab: Ny sampling swab mifandray mivantana amin'ny sampling toerana, ary ny fitaovana ny sampling lohany dia mifandray akaiky amin'ny manaraka fitiliana. Ny lohan'ny sampling swab dia tokony ho vita amin'ny polyester (PE) fibre sintetika na Rayon (fibre nataon'olombelona). Tsy azo ampiasaina ny sponjy alginate kalsioma na ny tapa-kazo (anisan'izany ny bamboo), ary ny fitaovana amin'ny lohan'ny swab dia tsy azo ampiasaina amin'ny vokatra landihazo. Satria ny fibre landihazo manana adsorption mahery ny proteinina, dia tsy mora ny elute ho any amin`ny manaraka fitehirizana vahaolana; ary rehefa tapaka ny tapa-kazo na hazo bamboo misy alginate kalsioma sy ny singa hazo, ny fanondrahana ao amin'ny vahaolana fitehirizana dia handevona proteinina ihany koa, ary mety hanakana ny fihetsiky ny PCR manaraka izany. Amporisihina ny mampiasa fibre synthetic toy ny PE fibre, polyester fibre ary polypropylene fibre ho an'ny fitaovana amin'ny loha swab. Tsy soso-kevitra ny fibre voajanahary toy ny landihazo. Tsy soso-kevitra koa ny fibre nylon satria mitroka rano ny fibre nylon (mitovy amin'ny lohan'ny borosy nify). Ratsy, miteraka tsy ampy ny santionany, misy fiantraikany amin'ny tahan'ny fitiliana. Ny sponjy alginate kalsioma dia voarara amin'ny fanaovana santionany fitaovana swab! Misy karazany roa ny tahony: tapaka sy anatiny. Ny swab tapaka dia apetraka ao amin'ny fantsona fitahirizana aorian'ny fakana santionany, ary tapaka ny satroka fantsona rehefa tapaka avy eo amin'ny toerana akaikin'ny lohan'ny sampling; ny naorina-in swab dia mametraka mivantana ny sampling swab ho any amin'ny fitehirizana fantsona aorian'ny santionany, ary ny fitoeran-javatra fantsona fonony dia naorina ao Align ny lavaka kely amin'ny tampon'ny tahony sy hanenjanana kokoa ny fantsona fonony. Raha ampitahaina amin'ireo fomba roa ireo, ny farany dia azo antoka. Rehefa ampiasaina miaraka amin'ny fantsona fitehirizana habe kely kokoa ny swab tapaka, dia mety hiteraka fiparitahan'ny rano ao anaty fantsona izany rehefa tapaka, ary tokony hojerena tanteraka ny mety hisian'ny loto vokatry ny fampiasana tsy ara-dalàna ny vokatra. Amporisihina ny mampiasa fantsona polystyrene (PS) extruded na polypropylène (PP) tsindrona creasing fantsona ho an'ny fitaovana amin'ny tahony. Na inona na inona fitaovana ampiasaina dia tsy azo ampiana kalsioma alginate additives; hazo na hazo volotsangana. Raha fintinina, ny sampling swab dia tokony hiantoka ny habetsahan'ny santionany sy ny habetsaky ny famoahana, ary ny fitaovana voafantina dia tsy tokony hisy akora misy fiantraikany amin'ny fitsapana manaraka.
2. Vahaolana fitehirizana otrikaretina: Misy karazany roa ny vahaolana fiarovana otrikaretina ampiasaina betsaka eny an-tsena, ny iray dia vahaolana fikojakojana otrikaretina novaina mifototra amin'ny fitaovam-pitaterana, ary ny iray hafa dia vahaolana novaina ho an'ny lysate fitrandrahana asidra nokleary.
Ny singa fototra amin'ny voalohany dia ny Eagle's Basic culture medium (MEM) na ny sira voalanjalanja an'i Hank, izay ampiana sira, asidra amine, vitamina, glucose ary proteinina ilaina amin'ny fahaveloman'ny virus. Ity vahaolana fitahirizana ity dia mampiasa sira sodium mena phenol ho famantarana sy vahaolana. Rehefa 6.6-8.0 ny pH dia mavokely ny vahaolana. Ny glucose ilaina, L-glutamine ary proteinina dia ampiana amin'ny vahaolana fiarovana. Ny proteinina dia omena amin'ny endriky ny foetal bovine serum na bovine serum albumin, izay afaka mampitony ny proteinina akoran'ny viriosy. Satria ny vahaolana amin'ny fitehirizana dia manankarena amin'ny otrikaina, dia manampy amin'ny fahaveloman'ny viriosy izy io fa mahasoa amin'ny fitomboan'ny bakteria. Raha voaloton'ny bakteria ny vahaolana fitehirizana, dia hihamaro be izany. Ny gazy karbonika ao amin'ny metabolites dia hahatonga ny pH vahaolana ho latsaka avy amin'ny mavokely Mivadika mavo. Noho izany, ny ankamaroan'ny mpanamboatra dia nanampy akora antibacterial amin'ny famolavolana azy ireo. Ny antibaktera atolotra dia penicillin, streptomycin, gentamicin ary polymyxin B. Sodium azide sy 2-methyl dia tsy soso-kevitra Inhibitors toy ny 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) sy 5-chloro-2-methyl-4 -isothiazolin-3-one (CMCI) satria misy fiantraikany amin'ny fihetsiky ny PCR ireo singa ireo. Satria ny santionany nomen'ity vahaolana fiarovana ity dia viriosy velona amin'ny ankapobeny, ny maha-origin'ny santionany dia azo tazonina hatramin'ny farany indrindra, ary azo ampiasaina tsy amin'ny fitrandrahana sy ny fitiliana ny asidra nokleika virus, fa amin'ny fambolena sy ny fambolena ihany koa. fitokanana ny viriosy. Na izany aza, tokony ho marihina fa rehefa ampiasaina amin'ny fitiliana dia tsy maintsy atao ny fitrandrahana sy ny fanadiovana asidra nukleika aorian'ny inactivation.
Karazana fitehirizana hafa vahaolana voaomana mifototra amin'ny asidra nokleary fitrandrahana lysate, ny singa fototra dia voalanjalanja sira, EDTA chelating mpandraharaha, guanidine sira (toy ny guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, sns), anionic surfactant (toy ny dodecane Sodium sulfate), cationic surfactants (toy ny tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K ary ny singa hafa, Ity vahaolana fitahirizana ity dia ny manapaka mivantana ny viriosy mba hamotsorana ny asidra nucleic ary hanafoana ny RNase. Raha ampiasaina amin'ny RT-PCR fotsiny dia mety kokoa izany, fa ny lysate dia afaka manafoana ny viriosy. Ity karazana santionany ity dia tsy azo ampiasaina amin'ny fanasarahana ny kolontsaina viriosy.
Ny vy ion chelating mpandraharaha ampiasaina amin'ny otrik'aretina fiarovana vahaolana no nanolorana azy ho mampiasa sira EDTA (toy ny dipotassium ethylenediaminetetraacetic asidra, disodium ethylenediaminetetraacetic asidra, sns), ary tsy nanolorana azy ho mampiasa heparin (toy ny sodium heparin, lithium heparin), mba tsy hisy fiantraikany amin'ny fitiliana PCR.
3. Tube fitehirizana: Ny fitaovana amin'ny fantsona fitehirizana dia tokony hofidina tsara. Misy angon-drakitra milaza fa ny polypropylène (Polypropylène) dia mifandray amin'ny adsorption ny asidra nucleic, indrindra fa amin'ny fihenjanana ambony ion concentration, polyethylene (Polyethylene) no tiana kokoa noho ny polypropylene (Polypropylene) Mora azo ny ADN/RNA. Ny plastika polyethylene-propylene polymer (Polyallomer) ary ny plastika polypropylène (Polypropylene) voahodina manokana dia mety kokoa amin'ny fitehirizana ADN/RNA. Ankoatra izany, rehefa mampiasa swab mora vaky, ny fantsona fitahirizana dia tokony hiezaka hisafidy fitoeran-javatra misy haavo mihoatra ny 8 sm mba hisorohana ny ao anatiny tsy hiparitaka sy ho voaloto rehefa tapaka ny swab.
4. Rano ho an'ny famokarana vahaolana fitehirizana: Ny rano faran'izay madio ampiasaina amin'ny famokarana vahaolana fitehirizana ny famokarana dia tokony ho voasivana amin'ny alalan'ny ultrafiltration membrane miaraka amin'ny lanjan'ny molekiola 13,000 mba hahazoana antoka ny fanesorana ny polymère loto avy amin'ny loharanon-biolojika, toy ny RNase, DNase, ary endotoxine, ary fanadiovana tsotra dia tsy soso-kevitra. Rano na rano voadio.
2. Fampiasana fantsona fanaovana santionany virosy
Ny fakana santionany amin'ny fampiasana ny fantsona santionany viriosy dia mizara ho santionany oropharyngeal sy sampling nasopharyngeal:
1. Oropharyngeal santionany: aloha tsindrio ny lela amin'ny lela depressor, dia hanitatra ny lohan'ny sampling swab ho any amin'ny tenda mba hamafa ny bilateral pharyngeal tonsils sy aoriana pharyngeal rindrin'ny, ary namaoka ny aoriana pharyngeal rindrina amin'ny hery maivana, aza mikasika ny lela. vondrona.
2. Famakafakana nasopharyngeal: refeso ny halaviran'ny tendron'ny orona mankany amin'ny lobe sofina amin'ny swab ary asio marika amin'ny rantsantanana, ampidiro ao amin'ny lavan'ny orona ny santionany amin'ny lalana mankany amin'ny orona mitsangana (tava), tokony hiitatra ny swab. fara fahakeliny ny antsasaky ny halavan'ny lobe sofina hatramin'ny tendron'ny orona, Avelao ao anaty orona mandritra ny 15-30 segondra ny swab, mihodina moramora 3-5 fotoana, ary ento ny swab.
Tsy sarotra ny mijery amin'ny fomba fampiasana, na oropharyngeal swab na nasopharyngeal swab, ny sampling dia asa ara-teknika, izay sarotra sy maloto. Ny kalitaon'ny santionany voaangona dia mifandray mivantana amin'ny fisavana manaraka. Raha ny santionany voangona manana viriosy enta-mavesatra Low, mora miteraka ratsy diso, sarotra ny hanamarina ny aretina.
Fotoana fandefasana: Jun-21-2020
