व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूबवर अनेक विचार

1. व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूबच्या निर्मितीबद्दल
व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूब वैद्यकीय उपकरण उत्पादनांशी संबंधित आहेत. बहुतेक देशांतर्गत उत्पादक प्रथम श्रेणीच्या उत्पादनांनुसार नोंदणीकृत आहेत आणि काही कंपन्या द्वितीय श्रेणी उत्पादनांनुसार नोंदणीकृत आहेत. अलीकडे, वुहान आणि इतर ठिकाणच्या आपत्कालीन गरजा पूर्ण करण्यासाठी, अनेक कंपन्यांनी “इमर्जन्सी चॅनल” “प्रथम-श्रेणी रेकॉर्ड परवानगीसाठी अर्ज करा” घेतला आहे. व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूब सॅम्पलिंग स्वॅब, व्हायरस प्रिझर्वेशन सोल्यूशन आणि बाह्य पॅकेजिंगने बनलेली असते. कोणतेही एकीकृत राष्ट्रीय मानक किंवा उद्योग मानक नसल्यामुळे, विविध उत्पादकांची उत्पादने मोठ्या प्रमाणात बदलतात.

1. सॅम्पलिंग स्वॅब: सॅम्पलिंग स्वॅब थेट सॅम्पलिंग साइटशी संपर्क साधतो आणि सॅम्पलिंग हेडची सामग्री नंतरच्या शोधाशी जवळून संबंधित आहे. सॅम्पलिंग स्वॅब हेड पॉलिस्टर (पीई) सिंथेटिक फायबर किंवा रेयॉन (मानवनिर्मित फायबर) चे बनलेले असावे. कॅल्शियम अल्जिनेट स्पंज किंवा लाकडी स्टिक स्वॅब्स (बांबूच्या काड्यांसह) वापरता येत नाहीत आणि स्वॅब हेडची सामग्री सूती उत्पादने असू शकत नाही. कापूस फायबरमध्ये प्रथिनांचे तीव्र शोषण असल्यामुळे, त्यानंतरच्या स्टोरेज सोल्यूशनमध्ये एल्युट करणे सोपे नाही; आणि जेव्हा कॅल्शियम अल्जिनेट आणि लाकडी घटक असलेली लाकडी काठी किंवा बांबूची काठी तुटलेली असते, तेव्हा स्टोरेज सोल्युशनमध्ये भिजवल्याने प्रथिने देखील शोषली जातील आणि त्यानंतरच्या पीसीआर प्रतिक्रिया देखील रोखू शकतात. स्वॅब हेडच्या सामग्रीसाठी पीई फायबर, पॉलिस्टर फायबर आणि पॉलीप्रॉपिलीन फायबर यांसारखे कृत्रिम तंतू वापरण्याची शिफारस केली जाते. कापूस सारख्या नैसर्गिक फायबरची शिफारस केलेली नाही. नायलॉन तंतूंची देखील शिफारस केली जात नाही कारण नायलॉन तंतू (टूथब्रशच्या डोक्यासारखे) पाणी शोषून घेतात. खराब, अपुरा सॅम्पलिंग व्हॉल्यूम परिणामी, शोध दर प्रभावित करते. कॅल्शियम अल्जिनेट स्पंज स्वॅब सामग्रीचे नमुने घेण्यासाठी निषिद्ध आहे! स्वॅब हँडलचे दोन प्रकार आहेत: तुटलेले आणि अंगभूत. तुटलेला स्वॅब सॅम्पलिंगनंतर स्टोरेज ट्यूबमध्ये ठेवला जातो आणि सॅम्पलिंग हेडजवळच्या स्थितीतून तुटलेली नळीची टोपी तुटलेली असते; बिल्ट-इन स्वॅब सॅम्पलिंग नंतर थेट सॅम्पलिंग स्वॅब स्टोरेज ट्यूबमध्ये ठेवतो आणि स्टोरेज ट्यूब ट्यूब कव्हर हँडलच्या वरच्या बाजूने लहान छिद्र संरेखित करा आणि ट्यूब कव्हर घट्ट करा. दोन पद्धतींची तुलना केल्यास, नंतरचे तुलनेने सुरक्षित आहे. जेव्हा तुटलेला स्वॅब लहान आकाराच्या स्टोरेज ट्यूबच्या संयोगाने वापरला जातो, तेव्हा तो तुटल्यावर ट्यूबमध्ये द्रव स्प्लॅश होऊ शकतो आणि उत्पादनाच्या अयोग्य वापरामुळे दूषित होण्याच्या जोखमीकडे पूर्ण लक्ष दिले पाहिजे. स्वॅब हँडलच्या सामग्रीसाठी पोकळ पॉलिस्टीरिन (पीएस) एक्सट्रुडेड ट्यूब किंवा पॉलीप्रॉपिलीन (पीपी) इंजेक्शन क्रिझिंग ट्यूब वापरण्याची शिफारस केली जाते. कोणतीही सामग्री वापरली जात असली तरीही, कॅल्शियम अल्जिनेट ॲडिटीव्ह जोडले जाऊ शकत नाहीत; लाकडी काड्या किंवा बांबूच्या काड्या. थोडक्यात, सॅम्पलिंग स्वॅबने सॅम्पलिंगचे प्रमाण आणि रिलीझचे प्रमाण सुनिश्चित केले पाहिजे आणि निवडलेल्या सामग्रीमध्ये पुढील चाचणीवर परिणाम करणारे पदार्थ नसावेत.

2. व्हायरस प्रिझर्वेशन सोल्यूशन: बाजारात दोन प्रकारचे व्हायरस प्रिझर्वेशन सोल्यूशन मोठ्या प्रमाणावर वापरले जातात, एक म्हणजे ट्रान्सपोर्ट माध्यमावर आधारित व्हायरस मेंटेनन्स सोल्यूशन सुधारित केले जाते आणि दुसरे न्यूक्लिक ॲसिड एक्स्ट्रक्शन लाइसेटसाठी सुधारित सोल्यूशन आहे.
पूर्वीचा मुख्य घटक म्हणजे ईगलचे मूलभूत संस्कृती माध्यम (एमईएम) किंवा हँकचे संतुलित मीठ, जे व्हायरस जगण्यासाठी आवश्यक असलेले क्षार, अमीनो ऍसिड, जीवनसत्त्वे, ग्लुकोज आणि प्रथिने यांच्यासोबत जोडले जाते. या स्टोरेज सोल्युशनमध्ये फिनॉल रेड सोडियम सॉल्टचा वापर सूचक आणि उपाय म्हणून केला जातो. जेव्हा पीएच मूल्य 6.6-8.0 असते, तेव्हा समाधान गुलाबी असते. आवश्यक ग्लुकोज, एल-ग्लुटामाइन आणि प्रथिने परिरक्षण द्रावणात जोडले जातात. प्रथिने गर्भाच्या बोवाइन सीरम किंवा बोवाइन सीरम अल्ब्युमिनच्या स्वरूपात प्रदान केले जातात, जे विषाणूचे प्रोटीन शेल स्थिर करू शकतात. प्रिझर्व्हेशन सोल्युशनमध्ये भरपूर पोषक असल्यामुळे ते विषाणूच्या अस्तित्वासाठी अनुकूल आहे परंतु बॅक्टेरियाच्या वाढीसाठी देखील फायदेशीर आहे. जर परिरक्षण द्रावण जीवाणूंनी दूषित असेल तर ते मोठ्या प्रमाणात वाढेल. त्याच्या चयापचयातील कार्बन डाय ऑक्साईडमुळे संरक्षण सोल्यूशन pH गुलाबी पिवळ्या वरून खाली पडेल. म्हणून, बहुतेक उत्पादकांनी त्यांच्या फॉर्म्युलेशनमध्ये बॅक्टेरियाच्या वाढीस प्रतिबंध करणारा पदार्थ घटक जोडला आहे. पेनिसिलिन, स्ट्रेप्टोमायसिन, जेंटॅमिसिन आणि पॉलीमिक्सिन बी हे शिफारस केलेले बॅक्टेरियाच्या वाढीस प्रतिबंध करणारे घटक आहेत. सोडियम अझाइड आणि 2-मिथाइल हे 4-मिथाइल-4-आयसोथियाझोलिन-3-वन (MCI) आणि 5-क्लोरो-2-मिथाइल-4 सारखे इनहिबिटरस शिफारस केलेले नाहीत. -isothiazolin-3-one (CMCI) कारण या घटकांचा पीसीआर प्रतिक्रियेवर परिणाम होतो. या प्रिझर्व्हेशन सोल्युशनद्वारे दिलेला नमुना हा मुळात जिवंत विषाणू असल्याने, नमुन्याची मौलिकता जास्तीत जास्त प्रमाणात ठेवली जाऊ शकते आणि ते केवळ विषाणू न्यूक्लिक ॲसिड काढण्यासाठी आणि शोधण्यासाठीच नव्हे तर लागवडीसाठी देखील वापरले जाऊ शकते. व्हायरसचे अलगाव. तथापि, हे लक्षात घेतले पाहिजे की जेव्हा शोधण्यासाठी वापरले जाते तेव्हा निष्क्रियतेनंतर न्यूक्लिक ॲसिड काढणे आणि शुद्धीकरण करणे आवश्यक आहे.
न्यूक्लिक ॲसिड एक्स्ट्रॅक्शन लायसेटवर आधारित तयार केलेले आणखी एक प्रकारचे संरक्षण उपाय, मुख्य घटक म्हणजे संतुलित क्षार, ईडीटीए चेलेटिंग एजंट, ग्वानिडाइन मीठ (जसे की ग्वानिडाइन आयसोथियोसायनेट, ग्वानिडाइन हायड्रोक्लोराईड, इ.), ॲनिओनिक सर्फॅक्टंट (जसे की डोडेकेन सोडियम), सीएलएफएटी, सीएलएफसी. सर्फॅक्टंट्स (जसे की टेट्राडेसिलट्रिमेथिलॅमोनियम ऑक्सलेट), फिनॉल, 8-हायड्रॉक्सीक्विनोलीन, डिथिओथ्रिटॉल (डीटीटी), प्रोटीनेज के आणि इतर घटक, हे स्टोरेज सोल्यूशन न्यूक्लिक ॲसिड सोडण्यासाठी आणि RNase काढून टाकण्यासाठी व्हायरसला थेट क्लीव्ह करण्यासाठी आहे. फक्त RT-PCR साठी वापरल्यास ते अधिक योग्य आहे, परंतु लाइसेट विषाणू निष्क्रिय करू शकते. या प्रकारचा नमुना विषाणू संस्कृती वेगळे करण्यासाठी वापरला जाऊ शकत नाही.

व्हायरस प्रिझर्वेशन सोल्युशनमध्ये वापरल्या जाणाऱ्या मेटल आयन चेलेटिंग एजंटला EDTA क्षार वापरण्याची शिफारस केली जाते (जसे की डिपोटॅशियम इथिलेनेडायमिनेटेट्राएसेटिक ऍसिड, डिसोडियम इथिलेनेडायमिनेटेट्राएसेटिक ऍसिड, इ.), आणि हेपरिन (जसे की सोडियम हेपरिन, लिथियम हेपरिन) वापरण्याची शिफारस केलेली नाही. जेणेकरून पीसीआर शोधण्यावर परिणाम होऊ नये.
3. प्रिझर्वेशन ट्यूब: प्रिझर्वेशन ट्यूबचे साहित्य काळजीपूर्वक निवडले पाहिजे. पॉलीप्रोपायलीन (पॉलीप्रॉपिलीन) हे न्यूक्लिक ॲसिडच्या शोषणाशी संबंधित आहे असे सूचित करणारे डेटा आहेत, विशेषत: उच्च ताण आयन एकाग्रतेमध्ये, पॉलीप्रोपायलीन (पॉलीप्रोपायलीन) पेक्षा पॉलीथिलीन (पॉलीथिलीन) अधिक पसंत केले जाते DNA/RNA समजण्यास सोपे. पॉलिथिलीन-प्रॉपिलीन पॉलिमर (पॉलीलोमर) प्लास्टिक आणि काही विशेष प्रक्रिया केलेले पॉलीप्रॉपिलीन (पॉलीप्रॉपिलीन) प्लास्टिक कंटेनर डीएनए/आरएनए स्टोरेजसाठी अधिक योग्य आहेत. याव्यतिरिक्त, ब्रेक करण्यायोग्य स्वॅब वापरताना, स्टोरेज ट्यूबने 8 सेंटीमीटरपेक्षा जास्त उंचीचा कंटेनर निवडण्याचा प्रयत्न केला पाहिजे जेणेकरुन स्वॅब तुटल्यावर त्यातील सामग्री स्प्लॅश होऊ नये आणि दूषित होऊ नये.

4. उत्पादन संरक्षण द्रावणासाठी पाणी: उत्पादन संरक्षण द्रावणासाठी वापरलेले अल्ट्राप्युअर पाणी 13,000 आण्विक वजन असलेल्या अल्ट्राफिल्ट्रेशन मेम्ब्रेनद्वारे फिल्टर केले जावे जेणेकरुन RNase, DNase, आणि एंडोटॉक्सिन सारख्या जैविक स्रोतांमधून पॉलिमर अशुद्धता काढून टाकली जावी. सामान्य शुद्धीकरणाची शिफारस केलेली नाही. पाणी किंवा डिस्टिल्ड पाणी.

2. व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूबचा वापर

व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूबचा वापर करून सॅम्पलिंग मुख्यतः ऑरोफॅरिंजियल सॅम्पलिंग आणि नासोफरींजियल सॅम्पलिंगमध्ये विभागले गेले आहे:

1. ऑरोफॅरिंजियल सॅम्पलिंग: प्रथम जीभ डिप्रेसरने जीभ दाबा, नंतर द्विपक्षीय फॅरेंजियल टॉन्सिल आणि पोस्टरियरी फॅरेंजियल भिंत पुसण्यासाठी सॅम्पलिंग स्वॅबचे डोके घशात पसरवा आणि जिभेच्या पार्श्वभूमीची भिंत पुसून टाका, जिभेला स्पर्श करणे टाळा. युनिट

2. नासोफॅरिंजियल सॅम्पलिंग: नाकाच्या टोकापासून कानाच्या लोबपर्यंतचे अंतर स्वॅबने मोजा आणि बोटाने चिन्हांकित करा, अनुनासिक पोकळीमध्ये अनुनासिक पोकळीमध्ये उभ्या नाकाच्या दिशेने (चेहरा), स्वॅब वाढवा. नाकाच्या टोकापर्यंत कानाच्या लोबच्या किमान अर्ध्या लांबीपर्यंत, 15-30 सेकंदांसाठी नाकात घासणे सोडा, हळूवारपणे 3-5 वेळा फिरवा आणि स्वॅब मागे घ्या.
वापरण्याच्या पद्धतीवरून हे पाहणे कठीण नाही, मग ते ऑरोफॅरिंजियल स्वॅब असो किंवा नासोफरींजियल स्वॅब असो, सॅम्पलिंग हे एक तांत्रिक कार्य आहे, जे कठीण आणि दूषित आहे. संकलित नमुन्याची गुणवत्ता त्यानंतरच्या तपासणीशी थेट संबंधित आहे. जर संकलित नमुन्यात विषाणूजन्य भार कमी असेल, खोट्या नकारात्मक गोष्टी निर्माण करणे सोपे असेल, निदानाची पुष्टी करणे कठीण असेल.