1. Mengenai pembuatan tiub pensampelan virus
Tiub pensampelan virus tergolong dalam produk peranti perubatan. Kebanyakan pengeluar domestik didaftarkan mengikut produk kelas pertama, dan beberapa syarikat didaftarkan mengikut produk kelas kedua. Baru-baru ini, untuk memenuhi keperluan kecemasan Wuhan dan tempat-tempat lain, banyak syarikat telah mengambil "saluran kecemasan" "memohon kebenaran rekod kelas pertama.
1. Sampel Sampel: Sampel persampelan secara langsung menghubungi tapak pensampelan, dan bahan kepala persampelan berkait rapat dengan pengesanan berikutnya. Kepala swab persampelan harus dibuat dari serat sintetik poliester (PE) atau rayon (serat buatan manusia). Kalsium alginat span atau kayu kayu (termasuk tongkat buluh) tidak boleh digunakan, dan bahan kepala swab tidak boleh menjadi produk kapas. Kerana serat kapas mempunyai penjerapan protein yang kuat, ia tidak mudah untuk elute ke dalam larutan penyimpanan berikutnya; Dan apabila kayu kayu atau kayu buluh yang mengandungi kalsium alginat dan komponen kayu dipecahkan, merendam dalam larutan penyimpanan juga akan menyerap protein, dan juga akan menghalang reaksi PCR berikutnya. Adalah disyorkan untuk menggunakan serat sintetik seperti serat PE, serat poliester dan serat polipropilena untuk bahan kepala swab. Serat semulajadi seperti kapas tidak disyorkan. Serat nilon juga tidak disyorkan kerana serat nilon (sama dengan kepala berus gigi) menyerap air. Miskin, mengakibatkan jumlah sampling yang tidak mencukupi, yang mempengaruhi kadar pengesanan. Kalsium alginat span dilarang untuk mengambil bahan swab! Pemegang swab mempunyai dua jenis: pecah dan terbina dalam. Sapu patah diletakkan di dalam tiub penyimpanan selepas pensampelan, dan topi tiub dipecahkan selepas dipecahkan dari kedudukan berhampiran kepala persampelan; Sapu terbina dalam secara langsung meletakkan sapu persampelan ke dalam tiub penyimpanan selepas pensampelan, dan penutup tiub penyimpanan dibina untuk menyelaraskan lubang kecil dengan bahagian atas pemegang dan mengetatkan penutup tiub. Membandingkan kedua -dua kaedah, yang terakhir agak selamat. Apabila swab pecah digunakan bersamaan dengan tiub penyimpanan saiz yang lebih kecil, ia boleh menyebabkan percikan cecair di dalam tiub apabila pecah, dan perhatian penuh harus dibayar kepada risiko pencemaran yang disebabkan oleh penggunaan produk yang tidak wajar. Adalah disyorkan untuk menggunakan tiub polistirena berongga (PS) atau polipropilena (PP) tiub suntikan untuk bahan pemegang swab. Tidak kira apa bahan yang digunakan, bahan tambahan kalsium alginat tidak boleh ditambah; kayu kayu atau tongkat buluh. Singkatnya, swab persampelan harus memastikan jumlah pensampelan dan jumlah pelepasan, dan bahan -bahan yang dipilih tidak boleh mempunyai bahan yang mempengaruhi ujian berikutnya.
2. Penyelesaian Pemeliharaan Virus: Terdapat dua jenis penyelesaian pemeliharaan virus yang digunakan secara meluas di pasaran, satu adalah penyelesaian penyelenggaraan virus yang diubahsuai berdasarkan medium pengangkutan, dan yang lain adalah penyelesaian yang diubah suai untuk lysate pengekstrakan asid nukleat.
Komponen utama bekas adalah Medium Budaya Asas Eagle (MEM) atau garam seimbang Hank, yang ditambah dengan garam, asid amino, vitamin, glukosa dan protein yang diperlukan untuk kelangsungan hidup virus. Penyelesaian penyimpanan ini menggunakan garam natrium merah fenol sebagai penunjuk dan penyelesaian. Apabila nilai pH adalah 6.6-8.0, penyelesaiannya berwarna merah jambu. Glukosa, L-glutamin dan protein yang diperlukan ditambah kepada penyelesaian pemeliharaan. Protein disediakan dalam bentuk serum bovine janin atau albumin serum lembu, yang dapat menstabilkan shell protein virus. Kerana penyelesaian pemeliharaan kaya dengan nutrien, ia adalah kondusif untuk kelangsungan hidup virus tetapi juga memberi manfaat kepada pertumbuhan bakteria. Sekiranya penyelesaian pemeliharaan tercemar dengan bakteria, ia akan membiak dalam kuantiti yang banyak. Karbon dioksida dalam metabolitnya akan menyebabkan penyelesaian pemeliharaan pH jatuh dari merah jambu bertukar kuning. Oleh itu, kebanyakan pengeluar telah menambah bahan -bahan antibakteria kepada formulasi mereka. Ejen antibakteria yang disyorkan adalah penisilin, streptomycin, gentamicin dan polymyxin B. natrium azide dan 2-methyl tidak disyorkan inhibitor seperti 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) dan 5-chloro-2-methyl-3-methyl-3-methyl-3-methyl-3-methyl-3-methyl-3- tindak balas. Oleh kerana sampel yang disediakan oleh penyelesaian pemeliharaan ini pada dasarnya adalah virus hidup, keaslian sampel boleh disimpan ke tahap yang paling besar, dan ia boleh digunakan bukan sahaja untuk pengekstrakan dan pengesanan asid nukleik virus, tetapi juga untuk penanaman dan pengasingan virus. Walau bagaimanapun, perlu diperhatikan bahawa apabila digunakan untuk pengesanan, pengekstrakan dan pemurnian asid nukleik mesti dilakukan selepas tidak aktif.
Satu lagi jenis penyelesaian pemeliharaan yang disediakan berdasarkan lysate pengekstrakan asid nukleik, komponen utama adalah garam seimbang, ejen chelating EDTA, garam guanidine (seperti guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, dan sebagainya) Tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K dan komponen lain, penyelesaian penyimpanan ini adalah untuk terus mengekang virus untuk melepaskan asid nukleik dan menghapuskan rnase. Jika hanya digunakan untuk RT-PCR, ia lebih sesuai, tetapi lysate dapat mengaktifkan virus. Sampel jenis ini tidak boleh digunakan untuk pemisahan budaya virus.
Agen chelating ion logam yang digunakan dalam larutan pemeliharaan virus disyorkan untuk menggunakan garam EDTA (seperti asid heparin, seperti heparin, dan tidak disyorkan untuk menggunakan heparin.
3. Tiub Pemeliharaan: Bahan tiub pemeliharaan hendaklah dipilih dengan teliti. Terdapat data yang menunjukkan bahawa polipropilena (polipropilena) berkaitan dengan penjerapan asid nukleik, terutamanya pada kepekatan ion ketegangan yang tinggi, polietilena (polietilena) lebih disukai daripada polipropilena (polypropylene) mudah untuk memahami DNA/RNA. Plastik polimer polietilena-propilena (polyallomer) dan beberapa bekas plastik polipropilena (polipropilena) yang diproses khas lebih sesuai untuk penyimpanan DNA/RNA. Di samping itu, apabila menggunakan swab pecah, tiub penyimpanan harus cuba memilih bekas dengan ketinggian yang lebih besar daripada 8 cm untuk mengelakkan kandungannya dibuang dan tercemar apabila swab dipecahkan.
4. Air untuk Penyelesaian Pemeliharaan Pengeluaran: Air ultrapure yang digunakan untuk penyelesaian pemeliharaan pengeluaran perlu ditapis melalui membran ultrafiltrasi dengan berat molekul 13,000 untuk memastikan penghapusan kekotoran polimer dari sumber biologi, seperti RNase, DNase, dan endotoxin, dan pembersihan biasa tidak disyorkan. Air atau air suling.
2. Penggunaan tiub pensampelan virus
Pensampelan menggunakan tiub pensampelan virus terutamanya dibahagikan kepada persampelan oropharyngeal dan pensampelan nasofaring:
1.
2. Pensampelan Nasopharyngeal: Ukur jarak dari ujung hidung ke lobus telinga dengan swab dan tandakan dengan jari, masukkan swab pensampelan ke dalam rongga hidung ke arah hidung menegak, swab.
Ia tidak sukar untuk dilihat dari kaedah penggunaan, sama ada swab oropharyngeal atau swab nasofaring, pensampelan adalah tugas teknikal, yang sukar dan tercemar. Kualiti sampel yang dikumpulkan secara langsung berkaitan dengan pengesanan berikutnya. Sekiranya sampel yang dikumpulkan mempunyai beban virus yang rendah, mudah menyebabkan negatif palsu, sukar untuk mengesahkan diagnosis.
Masa Post: Jun-21-2020
