भाइरस नमूना ट्यूब मा धेरै विचार

1. भाइरस नमूना ट्यूब को निर्माण को बारे मा
भाइरस नमूना ट्यूब चिकित्सा उपकरण उत्पादनहरु हो। अधिकांश स्वदेशी उत्पादकहरू प्रथम श्रेणीका उत्पादनहरूका आधारमा दर्ता भएका छन् भने केही कम्पनीहरू दोस्रो दर्जाका उत्पादनहरूका आधारमा दर्ता भएका छन्। हालै, वुहान र अन्य ठाउँहरूको आपतकालीन आवश्यकताहरू पूरा गर्न, धेरै कम्पनीहरूले "आपतकालीन च्यानल" लिएका छन् "प्रथम-कक्षा रेकर्ड अनुमतिको लागि आवेदन दिनुहोस्। भाइरस नमूना ट्यूब नमूना स्वाब, भाइरस संरक्षण समाधान र बाहिरी प्याकेजिङ मिलेर बनेको छ। त्यहाँ कुनै एकीकृत राष्ट्रिय मानक वा उद्योग मानक नभएको कारण, विभिन्न उत्पादकहरूको उत्पादनहरू धेरै भिन्न हुन्छन्।

1. नमूना स्वाब: नमूना स्वाबले सिधै नमूना साइटलाई सम्पर्क गर्दछ, र नमूना टाउकोको सामग्री पछिको पत्ता लगाउनेसँग नजिकको सम्बन्ध छ। नमूना स्वाब टाउको पलिएस्टर (पीई) सिंथेटिक फाइबर वा रेयन (मानव निर्मित फाइबर) को बनाइएको हुनुपर्छ। क्याल्सियम एल्जिनेट स्पन्ज वा काठको स्टिक स्वाब (बांसको स्टिक सहित) प्रयोग गर्न सकिँदैन, र स्वाब हेडको सामग्री कपास उत्पादन हुन सक्दैन। किनकी कपासको फाइबरमा प्रोटीनको बलियो अवशोषण हुन्छ, यसलाई पछिको भण्डारण समाधानमा एल्युट गर्न सजिलो छैन; र जब क्याल्सियम एल्जिनेट र काठका अवयवहरू भएको काठको छडी वा बाँसको छडी भाँचिन्छ, भण्डारण घोलमा भिजाउँदा प्रोटिन पनि सोस्छ, र यसले पछिको PCR प्रतिक्रियालाई पनि रोक्न सक्छ। स्वाब हेडको सामग्रीको लागि पीई फाइबर, पलिएस्टर फाइबर र पोलीप्रोपाइलिन फाइबर जस्ता सिंथेटिक फाइबरहरू प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ। कपास जस्ता प्राकृतिक फाइबर सिफारिस गरिदैन। नायलॉन फाइबरहरू पनि सिफारिस गरिँदैन किनभने नायलॉन फाइबर (टूथब्रश हेडहरू जस्तै) पानी अवशोषित गर्दछ। कमजोर, अपर्याप्त नमूना भोल्युमको परिणामस्वरूप, पत्ता लगाउने दरलाई असर गर्छ। क्याल्सियम अल्जिनेट स्पन्ज नमूना स्वाब सामग्रीको लागि निषेध गरिएको छ! स्वाब ह्यान्डल दुई प्रकारका हुन्छन्: टुटेको र बिल्ट-इन। भाँचिएको स्वाब नमूना लिएपछि भण्डारण ट्यूबमा राखिएको छ, र नमूना टाउको नजिकको स्थितिबाट भाँचिएपछि ट्यूब क्याप भाँचिएको छ; बिल्ट-इन स्वाबले नमूना लिइसकेपछि सिधै नमूना स्वाबलाई भण्डारण ट्यूबमा राख्छ, र भण्डारण ट्यूब ट्यूब कभर ह्यान्डलको माथिको सानो प्वाललाई पङ्क्तिबद्ध गर्नुहोस् र ट्यूब कभरलाई कडा पार्नुहोस्। दुई विधिहरू तुलना गर्दा, पछिल्लो अपेक्षाकृत सुरक्षित छ। जब भाँचिएको स्वाबलाई सानो आकारको भण्डारण ट्यूबसँग संयोजनमा प्रयोग गरिन्छ, यसले भाँच्दा ट्यूबमा तरल पदार्थ छर्कन सक्छ, र उत्पादनको अनुचित प्रयोगको कारणले गर्दा हुने प्रदूषणको जोखिममा पूर्ण ध्यान दिनुपर्छ। स्वाब ह्यान्डलको सामग्रीको लागि होलो पोलिस्टायरिन (PS) एक्स्ट्रुडेड ट्यूब वा पोलीप्रोपाइलिन (PP) इन्जेक्सन क्रिजिङ ट्यूब प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ। जुनसुकै सामग्री प्रयोग गरिए पनि, क्याल्सियम अल्जिनेट additives थप्न सकिँदैन; काठको डण्डी वा बाँसको स्टिक। छोटकरीमा, नमूना स्वाबले नमूनाको मात्रा र रिलीजको मात्रा सुनिश्चित गर्नुपर्दछ, र चयन गरिएका सामग्रीहरूमा पछिको परीक्षणलाई असर गर्ने पदार्थहरू हुनु हुँदैन।

2. भाइरस संरक्षण समाधान: बजारमा व्यापक रूपमा प्रयोग हुने दुई प्रकारका भाइरस संरक्षण समाधानहरू छन्, एउटा ट्राफिक माध्यमको आधारमा परिमार्जन गरिएको भाइरस मर्मत समाधान हो, र अर्को न्यूक्लिक एसिड निकासी लाइसेटको लागि परिमार्जित समाधान हो।
पहिलेको मुख्य कम्पोनेन्ट ईगलको आधारभूत संस्कृति माध्यम (MEM) वा ह्याङ्कको सन्तुलित नुन हो, जुन भाइरसको अस्तित्वको लागि आवश्यक नुन, एमिनो एसिड, भिटामिन, ग्लुकोज र प्रोटिनसँग थपिन्छ। यो भण्डारण समाधानले सूचक र समाधानको रूपमा फिनोल रातो सोडियम नुन प्रयोग गर्दछ। जब pH मान 6.6-8.0 हुन्छ, समाधान गुलाबी हुन्छ। आवश्यक ग्लुकोज, एल-ग्लुटामाइन र प्रोटिन संरक्षण समाधानमा थपिन्छन्। प्रोटिन भ्रूण बोवाइन सीरम वा बोवाइन सीरम एल्बुमिनको रूपमा प्रदान गरिन्छ, जसले भाइरसको प्रोटीन शेललाई स्थिर गर्न सक्छ। किनकी संरक्षण समाधान पोषक तत्वहरूमा धनी छ, यो भाइरसको बाँच्नको लागि उपयुक्त छ तर ब्याक्टेरियाको विकासको लागि पनि लाभदायक छ। यदि संरक्षण समाधान ब्याक्टेरियाले दूषित छ भने, यो ठूलो मात्रामा गुणा हुनेछ। यसको चयापचयमा कार्बन डाइअक्साइडले संरक्षण समाधान पीएचलाई गुलाबी पहेंलोबाट झर्छ। तसर्थ, अधिकांश निर्माताहरूले तिनीहरूको ढाँचामा जीवाणुरोधी सामग्रीहरू थपेका छन्। सिफारिस गरिएका एन्टिब्याक्टेरियल एजेन्टहरू पेनिसिलिन, स्ट्रेप्टोमाइसिन, जेन्टामाइसिन र पोलिमिक्सिन बी हुन्। सोडियम एजाइड र 2-मिथाइल सिफारिस गरिँदैन जस्तै 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) र 5-chloro-2-methyl-4। -isothiazolin-3-one (CMCI) को कारणले गर्दा यी कम्पोनेन्टहरूले प्रभाव पार्छ PCR प्रतिक्रिया। यस संरक्षण समाधान द्वारा प्रदान गरिएको नमूना मूलतया एक जीवित भाइरस भएकोले, नमूनाको मौलिकतालाई सबैभन्दा ठूलो हदसम्म राख्न सकिन्छ, र यसलाई भाइरस न्यूक्लिक एसिडको निकासी र पत्ता लगाउन मात्र नभई खेती र खेतीका लागि पनि प्रयोग गर्न सकिन्छ। भाइरस को अलगाव। यद्यपि, यो ध्यान दिनुपर्छ कि जब पत्ता लगाउनको लागि प्रयोग गरिन्छ, न्यूक्लिक एसिड निकासी र शुद्धीकरण निष्क्रियता पछि प्रदर्शन गर्नुपर्छ।
न्यूक्लिक एसिड निकासी लाइसेटको आधारमा तयार गरिएको अर्को प्रकारको संरक्षण समाधान, मुख्य घटकहरू सन्तुलित लवण, EDTA चेलेटिंग एजेन्ट, गुआनिडाइन नुन (जस्तै guanidine isothiocyanate, guanidine हाइड्रोक्लोराइड, इत्यादि), anionic surfactant (जस्तै dodecane Sodium sudium) हुन्। surfactants (जस्तै tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K र अन्य कम्पोनेन्टहरू, यो भण्डारण समाधानले न्यूक्लिक एसिडलाई रिलिज गर्न र RNase हटाउन भाइरसलाई सीधै क्लीभ गर्ने हो। यदि RT-PCR को लागि मात्र प्रयोग गरियो भने, यो अधिक उपयुक्त छ, तर lysate भाइरस निष्क्रिय गर्न सक्छ। यस प्रकारको नमूना भाइरस संस्कृति विभाजनको लागि प्रयोग गर्न सकिँदैन।

भाइरस संरक्षण समाधानमा प्रयोग हुने मेटल आयन चेलेटिंग एजेन्टलाई EDTA साल्टहरू (जस्तै डिपोटासियम इथिलेनेडायमिनिटेट्राएसेटिक एसिड, डिसोडियम इथिलेनेडायमिनिटेट्राएसेटिक एसिड, इत्यादि) प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ र हेपरिन (जस्तै सोडियम हेपरिन, लिथियम हेपरिन) प्रयोग गर्न सिफारिस गरिएको छैन। ताकि पीसीआर पत्ता लगाउन असर नहोस्।
3. संरक्षण ट्यूब: संरक्षण ट्यूब को सामग्री सावधानीपूर्वक चयन गर्नुपर्छ। पोलीप्रोपाइलीन (पोलिप्रोपाइलिन) न्यूक्लिक एसिडको सोखनसँग सम्बन्धित छ भनी सुझाव दिने डेटाहरू छन्, विशेष गरी उच्च तनाव आयन सांद्रतामा, डीएनए/आरएनए बुझ्न सजिलो पोलीप्रोपाइलिन (पोलिप्रोपाइलिन) भन्दा पोलिथिलीन (पोलिथिलीन) बढी रुचाइएको छ। Polyethylene-propylene पोलिमर (Polyallomer) प्लास्टिक र केहि विशेष रूपमा प्रशोधित polypropylene (Polypropylene) प्लास्टिक कन्टेनरहरू DNA/RNA भण्डारणको लागि बढी उपयुक्त छन्। थप रूपमा, भाँच्न मिल्ने स्वाब प्रयोग गर्दा, भण्डारण ट्यूबले 8 सेन्टीमिटरभन्दा बढी उचाइ भएको कन्टेनर चयन गर्ने प्रयास गर्नुपर्छ ताकि स्वाब टुटेको बेला सामग्रीहरू छर्कन र दूषित हुनबाट जोगाउन।

4. उत्पादन संरक्षण समाधानको लागि पानी: उत्पादन संरक्षण समाधानको लागि प्रयोग गरिएको अल्ट्राप्योर पानीलाई 13,000 को आणविक वजनको अल्ट्राफिल्ट्रेसन झिल्ली मार्फत फिल्टर गरिनु पर्छ र जैविक स्रोतहरू, जस्तै RNase, DNase, र endotoxin, र बाट बहुलक अशुद्धता हटाउन सुनिश्चित गर्न। सामान्य शुद्धीकरण सिफारिस गरिएको छैन। पानी वा आसुत पानी।

2. भाइरस नमूना ट्यूब को प्रयोग

भाइरस नमूना ट्यूब प्रयोग गरेर नमूना मुख्यतया oropharyngeal नमूना र nasopharyngeal नमूना विभाजन गरिएको छ:

1. Oropharyngeal नमूना: पहिले जिब्रो डिप्रेसरको साथ जिब्रो थिच्नुहोस्, त्यसपछि द्विपक्षीय फरिन्जियल टन्सिल र पोस्टरियर फरिन्जियल पर्खाल मेटाउन घाँटीमा नमूना स्वाबको टाउको विस्तार गर्नुहोस्, र जिब्रोलाई छोइरहनुहोस्, पछाडिको ग्रसनीको पर्खाललाई सफा गर्नुहोस्। एकाइ।

2. Nasopharyngeal नमूना: नाकको टुप्पो देखि कानको लोब सम्मको दुरीलाई स्वाबले नाप्नुहोस् र औंलाले चिन्ह लगाउनुहोस्, नमूना स्वाबलाई ठाडो नाक (अनुहार) को दिशामा नाक गुहामा घुसाउनुहोस्, स्वाब विस्तार गर्नुपर्छ। नाकको टुप्पोसम्म कानको लोबको कम्तिमा आधा लम्बाइ, नाकमा स्वाब छोड्नुहोस् 15-30 सेकेन्ड, बिस्तारै 3-5 पटक घुमाउनुहोस्, र स्वाब फिर्ता लिनुहोस्।
यो प्रयोगको विधिबाट हेर्न गाह्रो छैन, चाहे यो एक oropharyngeal स्वाब हो वा nasopharyngeal स्वाब, नमूना एक प्राविधिक कार्य हो, जुन गाह्रो र दूषित छ। संकलन गरिएको नमूनाको गुणस्तर सीधा पछिको पत्ता लगाउनेसँग सम्बन्धित छ। यदि सङ्कलन गरिएको नमूनामा भाइरल लोड कम छ, झूटा नकारात्मकहरू उत्पन्न गर्न सजिलो छ, निदान पुष्टि गर्न गाह्रो छ।