1. Ngeunaan pembuatan tabung sampling virus
Tabung sampling virus milik produk alat médis. Kaseueuran pabrik domestik didaptarkeun dumasar kana produk kelas munggaran, sareng sababaraha perusahaan didaptarkeun dumasar kana produk kelas kadua. Anyar-anyar ieu, pikeun nyumponan kabutuhan darurat Wuhan sareng tempat-tempat sanés, seueur perusahaan anu nyandak "saluran darurat" "Ngalamar ijin catetan kelas munggaran. Tabung sampling virus diwangun ku swab sampling, solusi pelestarian virus sareng bungkusan luar. Kusabab teu aya standar nasional atanapi standar industri anu ngahiji, produk tina sababaraha pabrik béda-béda pisan.
1. Sampling swab: The sampling swab langsung kontak situs sampling, sarta bahan tina sirah sampling raket patalina jeung deteksi saterusna. Sampling sirah swab kudu dijieun tina Poliéster (PE) serat sintétik atawa Rayon (serat jieunan manusa). Spons kalsium alginat atanapi swabs tongkat kai (kaasup batang awi) teu tiasa dianggo, sareng bahan sirah swab henteu tiasa janten produk katun. Kusabab serat katun ngabogaan adsorption kuat protéin, teu gampang pikeun elute kana solusi gudang saterusna; jeung lamun iteuk kai atawa iteuk awi ngandung kalsium alginate jeung komponén kai rusak, soaking dina leyuran gudang ogé bakal adsorb protéin, komo bakal Ieu bisa ngahambat réaksi PCR saterusna. Disarankeun nganggo serat sintétik sapertos serat PE, serat poliéster sareng serat polipropilén pikeun bahan sirah swab. Serat alam sapertos katun henteu disarankeun. Serat nilon ogé henteu disarankeun sabab serat nilon (sarupa sareng hulu sikat huntu) nyerep cai. Miskin, hasilna volume sampling teu cukup, mangaruhan laju deteksi. Spons kalsium alginat dilarang pikeun sampling bahan swab! Cecekelan swab boga dua jenis: rusak jeung diwangun-di. The swab rusak disimpen dina tabung gudang sanggeus sampling, sarta cap tube pegat sanggeus pegat tina posisi deukeut sirah sampling; swab diwangun-di langsung nyimpen swab sampling kana tabung gudang sanggeus sampling, sarta panutup tube tabung gudang diwangun dina Align liang leutik kalawan luhureun cecekelan jeung tighten panutup tube. Ngabandingkeun dua métode, dimungkinkeun relatif aman. Nalika swab rusak dipaké ditéang jeung tube gudang ukuranana leuwih leutik, éta bisa ngabalukarkeun splashing cair dina tube lamun pegat, sarta perhatian pinuh kudu dibayar ka résiko kontaminasi disababkeun ku pamakéan teu bener produk. Disarankeun make polystyrene kerung (PS) extruded tube atawa polipropilén (PP) suntik creasing tube pikeun bahan tina swab cecekelan. Euweuh urusan naon bahan dipaké, aditif kalsium alginate teu bisa ditambahkeun; iteuk kai atawa Awi iteuk. Pondokna, swab sampling kedah mastikeun jumlah sampling sareng jumlah pelepasan, sareng bahan anu dipilih henteu kedah gaduh zat anu mangaruhan tés salajengna.
2. Solusi pelestarian virus: Aya dua rupa solusi pelestarian virus loba dipaké di pasar, hiji nyaeta solusi pangropéa virus dirobah dumasar kana medium angkutan, sarta séjén nyaéta solusi dirobah pikeun lysate ékstraksi asam nukléat.
Komponén utama urut nyaéta medium budaya dasar Eagle (MEM) atawa uyah saimbang Hank, nu ditambahkeun jeung uyah, asam amino, vitamin, glukosa jeung protéin dipikabutuh pikeun survival virus. Solusi panyimpen ieu ngagunakeun uyah natrium fénol beureum salaku indikator sareng solusi. Nalika nilai pH 6.6-8.0, solusina warna pink. Glukosa, L-glutamin sareng protéin anu diperyogikeun ditambah kana solusi pelestarian. Protéin disayogikeun dina bentuk sérum bovine fétal atanapi sérum albumin bovine, anu tiasa nyaimbangkeun cangkang protéin virus. Kusabab solusi pelestarian beunghar gizi, éta kondusif pikeun survival virus tapi ogé mangpaat pikeun tumuwuhna baktéri. Lamun solusi pelestarian kacemar ku baktéri, éta bakal kalikeun dina jumlah badag. Karbon dioksida dina métabolit na bakal ngabalukarkeun pH solusi pelestarian turun tina pink Ngahurungkeun konéng. Ku alatan éta, lolobana pabrik geus ditambahkeun bahan antibakteri kana formulasi maranéhanana. Agen antibakteri anu disarankeun nyaéta pénisilin, streptomycin, gentamicin sareng polymyxin B. Natrium azida sareng 2-métil henteu disarankeun Inhibitor sapertos 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) sareng 5-chloro-2-methyl-4 -isothiazolin-3-hiji (CMCI) sabab komponén ieu boga pangaruh dina réaksi PCR. Kusabab sampel nu disadiakeun ku solusi pelestarian ieu dasarna mangrupa virus hirup, originalitas sampel bisa diteundeun kana extent greatest, sarta bisa dipaké teu ngan pikeun ékstraksi jeung deteksi virus asam nukléat, tapi ogé pikeun budidaya jeung isolasi virus. Nanging, kedah diperhatoskeun yén nalika dianggo pikeun deteksi, ékstraksi sareng purifikasi asam nukléat kedah dilakukeun saatos teu aktip.
Jenis séjén solusi pelestarian disiapkeun dumasar kana ékstraksi asam nukléat lysate, komponén utama nyaéta uyah saimbang, EDTA agén chelating, uyah guanidine (kayaning guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, jsb), surfactant anionik (kayaning dodecane Natrium sulfat), kationik. surfaktan (sapertos tetradecyltrimethylammonium oxalate), fénol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K sareng komponenana anu sanésna, Solusi panyimpen ieu langsung meulah virus pikeun ngaleupaskeun asam nukléat sareng ngaleungitkeun RNase. Upami ngan ukur dianggo pikeun RT-PCR, éta langkung cocog, tapi lysate tiasa nganonaktipkeun virus. Sampel jinis ieu henteu tiasa dianggo pikeun misahkeun budaya virus.
Agén chelating ion logam anu dianggo dina solusi pelestarian virus disarankeun nganggo uyah EDTA (sapertos asam dipotassium ethylenediaminetetraacetic, asam disodium ethylenediaminetetraacetic, jsb), sareng henteu disarankeun ngagunakeun heparin (sapertos natrium heparin, litium heparin), supados henteu mangaruhan deteksi PCR.
3. tube pelestarian: Bahan tina tube pelestarian kudu dipilih taliti. Aya data anu nunjukkeun yén polipropilén (Polypropylene) aya hubunganana sareng adsorpsi asam nukléat, khususna dina konsentrasi ion tegangan tinggi, poliétilén (Polyéthylene) langkung dipikaresep tibatan polipropilén (Polypropylene) Gampang nangkep DNA/RNA. Poliétilén-propilén polimér (Polyallomer) plastik sareng sababaraha wadah plastik polipropilén (Polypropylene) olahan khusus langkung cocog pikeun neundeun DNA/RNA. Salaku tambahan, nalika nganggo swab anu tiasa dipecahkeun, tabung panyimpen kedah nyobian milih wadah anu jangkungna langkung ti 8 cm pikeun nyegah eusina cipratan sareng kacemar nalika swab rusak.
4. Cai pikeun solusi pelestarian produksi: Cai ultrapure dipaké pikeun solusi pelestarian produksi kudu disaring ngaliwatan mémbran ultrafiltration kalayan beurat molekul 13.000 pikeun mastikeun ngaleupaskeun pangotor polimér tina sumber biologis, kayaning RNase, DNase, sarta endotoxin, jeung purifikasi biasa teu dianjurkeun. Cai atanapi cai sulingan.
2. Pamakéan tabung sampling virus
Sampling ngagunakeun tabung sampling virus utamana dibagi kana sampling oropharyngeal sareng sampling nasopharyngeal:
1. Sampling Oropharyngeal: Mimiti pencét létah sareng depressor létah, teras manjangkeun sirah swab sampling kana tikoro pikeun ngusap tonsils pharyngeal bilateral sareng témbok pharyngeal posterior, sareng usap témbok pharyngeal posterior kalayan kakuatan cahaya, ulah noél létah. hijian.
2. Nasopharyngeal sampling: ngukur jarak ti ujung irung ka lobus ceuli ku swab sarta cirian ku ramo, selapkeun swab sampling kana rongga irung dina arah irung nangtung (beungeut), swab kudu manjangkeun. sahenteuna satengah panjang lobus ceuli nepi ka ujung irung, Ninggalkeun swab dina irung pikeun 15-30 detik, gently muterkeun 3-5 kali, sarta mundur swab nu.
Teu hese ningali tina metodeu pamakean, naha éta swab oropharyngeal atanapi swab nasopharyngeal, sampling mangrupikeun tugas téknis, anu hese sareng terkontaminasi. Kualitas sampel dikumpulkeun langsung patali jeung deteksi saterusna. Lamun sampel dikumpulkeun ngabogaan viral load Low, gampang ngabalukarkeun negatives palsu, hésé pikeun ngonfirmasi diagnosis.
waktos pos: Jun-21-2020
