1. Om tillverkning av virusprovtagningsrör
Virusprovtagningsrör tillhör medicintekniska produkter. De flesta inhemska tillverkare är registrerade enligt första klassens produkter och få företag är registrerade enligt andra klassens produkter. Nyligen, för att möta nödbehoven i Wuhan och andra platser, har många företag tagit "nödkanalen" "Ansök om förstklassigt rekordtillstånd. Virusprovtagningsröret består av en provtagningspinne, viruskonserveringslösning och yttre förpackning. Eftersom det inte finns någon enhetlig nationell standard eller industristandard, varierar produkterna från olika tillverkare kraftigt.
1. Provtagningspinnen: Provtagningspinnen kommer i direkt kontakt med provtagningsstället, och materialet i provtagningshuvudet är nära relaterat till den efterföljande detekteringen. Provtagningspinnens huvud ska vara tillverkat av polyester (PE) syntetfiber eller Rayon (konstfiber). Kalciumalginatsvamp eller träpinnar (inklusive bambupinnar) kan inte användas, och materialet på pinnhuvudet kan inte vara bomullsprodukter. Eftersom bomullsfiber har en stark adsorption av protein är det inte lätt att eluera in i den efterföljande lagringslösningen; och när en träpinne eller bambusticka som innehåller kalciumalginat och träkomponenter går sönder, kommer blötläggning i lagringslösningen också att adsorbera protein, och till och med kommer det att hämma den efterföljande PCR-reaktionen. Det rekommenderas att använda syntetiska fibrer som PE-fiber, polyesterfiber och polypropenfiber för materialet på svabbhuvudet. Naturfibrer som bomull rekommenderas inte. Nylonfibrer rekommenderas inte heller eftersom nylonfibrer (liknande tandborsthuvuden) absorberar vatten. Dålig, vilket resulterar i otillräcklig provtagningsvolym, vilket påverkar detektionshastigheten. Kalciumalginatsvamp är förbjuden för provtagning av pinnmaterial! Svamphandtag har två typer: trasigt och inbyggt. Den trasiga pinnen placeras i förvaringsröret efter provtagning, och rörlocket bryts efter att ha brutits från läget nära provtagningshuvudet; den inbyggda provtagningspinnen placerar provtagningspinnen direkt i förvaringsröret efter provtagning, och förvaringsrörets lock är inbyggt. Rikta in det lilla hålet med toppen av handtaget och dra åt rörlocket. Jämför man de två metoderna är den senare relativt säker. När den trasiga pinnen används tillsammans med ett förvaringsrör av mindre storlek, kan det orsaka vätskestänk i röret när det är brutet, och full uppmärksamhet bör ägnas åt risken för kontaminering orsakad av felaktig användning av produkten. Det rekommenderas att använda ett ihåligt polystyren (PS) extruderat rör eller polypropen (PP) injektionsveckrör för materialet i pinnens handtag. Oavsett vilket material som används kan kalciumalginattillsatser inte tillsättas; träpinnar eller bambupinnar. Kortfattat ska provtagningspinnen säkerställa mängden provtagning och mängden frisättning, och de valda materialen får inte ha ämnen som påverkar efterföljande testning.
2. Viruskonserveringslösning: Det finns två typer av viruskonserveringslösningar som används i stor utsträckning på marknaden, den ena är en virusunderhållslösning modifierad baserad på transportmediet och den andra är en modifierad lösning för nukleinsyraextraktionslysat.
Huvudkomponenten i den förstnämnda är Eagle's basic culture medium (MEM) eller Hanks balanserade salt, som tillsätts med de salter, aminosyror, vitaminer, glukos och protein som behövs för virusöverlevnad. Denna förvaringslösning använder fenolrött natriumsalt som indikator och lösning. När pH-värdet är 6,6-8,0 är lösningen rosa. Nödvändig glukos, L-glutamin och protein tillsätts till konserveringslösningen. Proteinet tillhandahålls i form av fetalt bovint serum eller bovint serumalbumin, som kan stabilisera virusets proteinskal. Eftersom konserveringslösningen är rik på näringsämnen är den gynnsam för virusets överlevnad men också fördelaktig för tillväxten av bakterier. Om konserveringslösningen är förorenad med bakterier kommer den att föröka sig i stora mängder. Koldioxiden i dess metaboliter kommer att göra att konserveringslösningens pH sjunker från rosa Blir gul. Därför har de flesta tillverkare lagt till antibakteriella ingredienser till sina formuleringar. De rekommenderade antibakteriella medlen är penicillin, streptomycin, gentamicin och polymyxin B. Natriumazid och 2-metyl rekommenderas inte Hämmare som 4-metyl-4-isotiazolin-3-on (MCI) och 5-klor-2-metyl-4 -isotiazolin-3-on (CMCI) eftersom dessa komponenter har en effekt på PCR-reaktionen. Eftersom provet som tillhandahålls av denna konserveringslösning i grunden är ett levande virus, kan provets originalitet bibehållas i största utsträckning och det kan användas inte bara för extraktion och detektering av virusnukleinsyror, utan också för odling och isolering av virus. Det bör dock noteras att när det används för detektion måste nukleinsyraextraktion och rening utföras efter inaktivering.
En annan typ av konserveringslösning framställd baserad på nukleinsyraextraktionslysat, huvudkomponenterna är balanserade salter, EDTA-kelatmedel, guanidinsalt (såsom guanidinisotiocyanat, guanidinhydroklorid, etc.), anjoniskt ytaktivt ämne (såsom dodekannatriumsulfat), katjonisk ytaktiva ämnen (som tetradecyltrimetylammoniumoxalat), fenol, 8-hydroxikinolin, ditiotreitol (DTT), proteinas K och andra komponenter. Denna lagringslösning är till för att direkt klyva viruset för att frigöra nukleinsyran och eliminera RNaset. Om det endast används för RT-PCR är det mer lämpligt, men lysatet kan inaktivera viruset. Denna typ av prov kan inte användas för viruskulturseparation.
Det metalljonskelaterande medlet som används i viruskonserveringslösningen rekommenderas för att använda EDTA-salter (som dikaliumetylendiamintetraättiksyra, dinatriumetylendiamintetraättiksyra, etc.), och det rekommenderas inte att använda heparin (såsom natriumheparin, litiumheparin), för att inte påverka PCR-detektion.
3. Konserveringsrör: Materialet i konserveringsröret bör väljas noggrant. Det finns data som tyder på att polypropen (polypropen) är relaterat till adsorptionen av nukleinsyra, speciellt vid hög spänning jonkoncentration, polyeten (polyeten) är mer föredraget än polypropen (polypropen) Lätt att greppa DNA/RNA. Polyeten-propenpolymer (Polyallomer) plast och vissa specialbearbetade polypropen (Polypropen) plastbehållare är mer lämpade för DNA/RNA-lagring. Dessutom, när du använder en brytbar bomullspinne, bör förvaringsröret försöka välja en behållare med en höjd som är större än 8 cm för att förhindra att innehållet stänks och förorenas när pinnen bryts.
4. Vatten för produktionskonserveringslösning: Det ultrarena vattnet som används för produktionskonserveringslösning bör filtreras genom ett ultrafiltreringsmembran med en molekylvikt på 13 000 för att säkerställa avlägsnande av polymerföroreningar från biologiska källor, såsom RNas, DNas och endotoxin, och vanlig rening rekommenderas inte. Vatten eller destillerat vatten.
2. Användning av virusprovtagningsrör
Provtagning med hjälp av virusprovtagningsröret är huvudsakligen uppdelad i orofaryngeal provtagning och nasofaryngeal provtagning:
1. Orofarynxprovtagning: Tryck först på tungan med tungdepressorn, förläng sedan provtagningspinnens huvud in i halsen för att torka av de bilaterala svalgmandlarna och den bakre svalgväggen, och torka av den bakre svalgväggen med lätt kraft, undvik att röra vid tungan enhet.
2. Nasofaryngeal provtagning: mät avståndet från nässpetsen till örsnibben med en pinne och markera med ett finger, för in provtagningspinnen i näshålan i riktning mot den vertikala näsan (ansiktet), pinnen ska sträcka sig ut minst halva öronsnibbens längd till nässpetsen, Lämna pinnen i näsan i 15-30 sekunder, rotera försiktigt 3-5 gånger och dra ut pinnen.
Det är inte svårt att se av användningsmetoden, om det är en munsvalgspinn eller en nasofarynxpinne, provtagning är en teknisk uppgift, som är svår och förorenad. Kvaliteten på det insamlade provet är direkt relaterat till den efterföljande upptäckten. Om det insamlade provet har en virusmängd Låg, lätt att orsaka falska negativ, svårt att bekräfta diagnosen.
Posttid: 21 juni 2020
