1. Kuhusu utengenezaji wa mirija ya sampuli za virusi
Mirija ya sampuli za virusi ni ya bidhaa za vifaa vya matibabu. Wazalishaji wengi wa ndani wamesajiliwa kulingana na bidhaa za darasa la kwanza, na makampuni machache yanasajiliwa kulingana na bidhaa za daraja la pili. Hivi majuzi, ili kukidhi mahitaji ya dharura ya Wuhan na maeneo mengine, makampuni mengi yamechukua "chaneli ya dharura" "Omba ruhusa ya rekodi ya daraja la kwanza. Bomba la sampuli za virusi linajumuisha swab ya sampuli, suluhisho la kuhifadhi virusi na ufungaji wa nje. Kwa kuwa hakuna kiwango cha kitaifa cha umoja au kiwango cha sekta, bidhaa za wazalishaji mbalimbali hutofautiana sana.
1. Usuvi wa sampuli: Kitambaa cha sampuli huwasiliana moja kwa moja na tovuti ya sampuli, na nyenzo za kichwa cha sampuli zinahusiana kwa karibu na ugunduzi unaofuata. Kichwa cha usufi cha sampuli kinapaswa kutengenezwa kwa nyuzi sintetiki ya Polyester (PE) au Rayon (nyuzi iliyotengenezwa na mwanadamu). Sifongo ya alginate ya kalsiamu au swabs za fimbo za mbao (ikiwa ni pamoja na vijiti vya mianzi) haziwezi kutumika, na nyenzo za kichwa cha swab haziwezi kuwa bidhaa za pamba. Kwa sababu fiber ya pamba ina adsorption kali ya protini, si rahisi kufuta katika ufumbuzi wa kuhifadhi baadae; na wakati fimbo ya mbao au fimbo ya mianzi iliyo na alginate ya kalsiamu na vipengele vya mbao imevunjwa, kulowekwa kwenye suluhisho la kuhifadhi pia kutapunguza protini, na hata kufanya hivyo Inaweza kuzuia majibu ya PCR inayofuata. Inashauriwa kutumia nyuzi za syntetisk kama vile nyuzi za PE, nyuzi za polyester na nyuzi za polypropen kwa nyenzo za kichwa cha usufi. Nyuzi za asili kama pamba hazipendekezi. Nyuzi za nailoni pia hazipendekezi kwa sababu nyuzi za nailoni (sawa na vichwa vya mswaki) huchukua maji. Duni, na kusababisha kiasi cha sampuli kisichotosha, na kuathiri kiwango cha ugunduzi. Sifongo ya alginate ya kalsiamu ni marufuku kwa sampuli ya nyenzo za usufi! Ushughulikiaji wa swab una aina mbili: iliyovunjika na iliyojengwa. Swab iliyovunjika imewekwa kwenye bomba la kuhifadhi baada ya sampuli, na kofia ya bomba imevunjwa baada ya kuvunjika kutoka kwenye nafasi karibu na kichwa cha sampuli; usufi uliojengewa ndani moja kwa moja huweka usufi wa sampuli kwenye bomba la kuhifadhi baada ya sampuli, na kifuniko cha bomba la kuhifadhi hujengwa katika Pangilia tundu dogo na sehemu ya juu ya mpini na kaza kifuniko cha bomba. Kwa kulinganisha njia hizi mbili, mwisho ni salama. Wakati usufi iliyovunjika inatumiwa pamoja na bomba la ukubwa mdogo, inaweza kusababisha kumwagika kwa kioevu kwenye bomba wakati imevunjika, na tahadhari kamili inapaswa kulipwa kwa hatari ya uchafuzi unaosababishwa na matumizi yasiyofaa ya bidhaa. Inapendekezwa kutumia bomba la polystyrene (PS) lililotolewa nje au bomba la polypropen (PP) la kuunda sindano kwa nyenzo za mpini wa usufi. Haijalishi ni nyenzo gani inayotumiwa, viongeza vya alginate ya kalsiamu haziwezi kuongezwa; vijiti vya mbao au vijiti vya mianzi. Kwa kifupi, swab ya sampuli inapaswa kuhakikisha kiasi cha sampuli na kiasi cha kutolewa, na nyenzo zilizochaguliwa lazima zisiwe na vitu vinavyoathiri majaribio ya baadaye.
2. Suluhisho la uhifadhi wa virusi: Kuna aina mbili za suluhu za uhifadhi wa virusi zinazotumika sana sokoni, moja ni suluhisho la matengenezo ya virusi lililorekebishwa kulingana na njia ya usafirishaji, na lingine ni suluhu iliyorekebishwa kwa lysate ya uchimbaji wa asidi ya nuklei.
Kipengele kikuu cha awali ni Eagle's basic culture medium (MEM) au chumvi iliyosawazishwa ya Hank, ambayo huongezwa na chumvi, amino asidi, vitamini, glukosi na protini muhimu kwa maisha ya virusi. Suluhisho hili la uhifadhi hutumia chumvi nyekundu ya sodiamu ya phenoli kama kiashirio na suluhisho. Wakati thamani ya pH ni 6.6-8.0, suluhisho ni pink. Glucose muhimu, L-glutamine na protini huongezwa kwenye suluhisho la kuhifadhi. Protini hutolewa kwa njia ya seramu ya ng'ombe ya fetasi au albin ya seramu ya bovin, ambayo inaweza kuleta utulivu wa shell ya protini ya virusi. Kwa sababu suluhisho la kuhifadhi lina virutubishi vingi, linafaa kwa maisha ya virusi lakini pia ni muhimu kwa ukuaji wa bakteria. Ikiwa suluhisho la kuhifadhi limechafuliwa na bakteria, litazidisha kwa kiasi kikubwa. Dioksidi kaboni katika metabolites yake itasababisha ufumbuzi wa kuhifadhi pH kuanguka kutoka pink Inageuka njano. Kwa hiyo, wazalishaji wengi wameongeza viungo vya antibacterial kwa uundaji wao. Dawa za antibacterial zinazopendekezwa ni penicillin, streptomycin, gentamicin na polymyxin B. Azide ya sodiamu na 2-methyl haipendekezwi Vizuizi kama vile 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) na 5-chloro-2-methyl-4. -isothiazolin-3-one (CMCI) kwa sababu vipengele hivi vina athari kwenye mmenyuko wa PCR. Kwa kuwa sampuli iliyotolewa na suluhisho hili la uhifadhi kimsingi ni virusi hai, asili ya sampuli inaweza kuhifadhiwa kwa kiwango kikubwa zaidi, na inaweza kutumika sio tu kwa uchimbaji na ugunduzi wa asidi ya nucleic ya virusi, lakini pia kwa ukuzaji na ukuzaji. kutengwa kwa virusi. Hata hivyo, ni lazima ieleweke kwamba wakati unatumiwa kugundua, uchimbaji wa asidi ya nucleic na utakaso lazima ufanyike baada ya kuzima.
Aina nyingine ya suluhisho la uhifadhi lililotayarishwa kwa msingi wa lysate ya uchimbaji wa asidi ya nucleic, sehemu kuu ni chumvi zenye usawa, wakala wa chelating wa EDTA, chumvi ya guanidine (kama vile guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, nk), kiboreshaji cha anionic (kama vile sulfate ya sodiamu ya dodecane), viboreshaji (kama vile tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K na vipengele vingine, Suluhisho hili la kuhifadhi ni kuunganisha moja kwa moja virusi ili kutolewa asidi nucleic na kuondokana na RNase. Ikiwa hutumiwa tu kwa RT-PCR, inafaa zaidi, lakini lysate inaweza kuzima virusi. Sampuli ya aina hii haiwezi kutumika kutenganisha utamaduni wa virusi.
Wakala wa chelating wa ioni ya chuma inayotumiwa katika suluhisho la kuhifadhi virusi inapendekezwa kutumia chumvi za EDTA (kama vile asidi ya dipotassium ethylenediaminetetraacetic, disodium ethylenediaminetetraacetic acid, nk.), na haipendekezi kutumia heparini (kama vile heparini ya sodiamu, heparini ya lithiamu), ili isiathiri utambuzi wa PCR.
3. Bomba la kuhifadhi: Nyenzo za bomba la kuhifadhi zinapaswa kuchaguliwa kwa uangalifu. Kuna data inayopendekeza kwamba polypropen (Polypropen) inahusiana na adsorption ya asidi nucleic, hasa katika mkusanyiko wa ioni ya mvutano wa juu, polyethilini (Polyethilini) inapendekezwa zaidi kuliko polypropen (Polypropen) Rahisi kufahamu DNA/RNA. Plastiki ya polyethilini-propylene polima (Polyallomer) na vyombo vya plastiki vya polipropen (Polypropen) vilivyochakatwa maalum vinafaa zaidi kwa hifadhi ya DNA/RNA. Kwa kuongeza, wakati wa kutumia swab inayoweza kuharibika, tube ya kuhifadhi inapaswa kujaribu kuchagua chombo na urefu wa zaidi ya 8 cm ili kuzuia yaliyomo kutoka kwa splashed na kuchafuliwa wakati swab imevunjwa.
4. Maji kwa ajili ya suluhu ya kuhifadhi uzalishaji: Maji ya juu zaidi yanayotumika kwa ajili ya uhifadhi wa mmumunyo wa uzalishaji yanapaswa kuchujwa kupitia utando wa kichujio chenye uzito wa molekuli 13,000 ili kuhakikisha kuondolewa kwa uchafu wa polima kutoka kwa vyanzo vya kibiolojia, kama vile RNase, DNase, na endotoxin, na. utakaso wa kawaida haupendekezi. Maji au maji yaliyotengenezwa.
2. Matumizi ya mirija ya sampuli za virusi
Sampuli kwa kutumia bomba la sampuli ya virusi imegawanywa haswa katika sampuli za oropharyngeal na sampuli za nasopharyngeal:
1. Sampuli ya Oropharyngeal: Kwanza bonyeza ulimi kwa kinyozi cha ulimi, kisha upanue kichwa cha usufi wa sampuli kwenye koo ili kufuta tonsils ya koromeo na ukuta wa nyuma wa koromeo, na uifuta ukuta wa nyuma wa koromeo kwa nguvu nyepesi, epuka kugusa ulimi. kitengo.
2. Sampuli ya Nasopharyngeal: pima umbali kutoka kwa ncha ya pua hadi lobe ya sikio na swab na alama kwa kidole, ingiza swab ya sampuli kwenye cavity ya pua kwa mwelekeo wa pua ya wima (uso), swab inapaswa kupanua. angalau nusu ya urefu wa tundu la sikio hadi ncha ya pua, Acha usufi kwenye pua kwa sekunde 15-30, zungusha kwa upole. Mara 3-5, na uondoe usufi.
Si vigumu kuona kutoka kwa njia ya matumizi, ikiwa ni swab ya oropharyngeal au swab ya nasopharyngeal, sampuli ni kazi ya kiufundi, ambayo ni ngumu na iliyochafuliwa. Ubora wa sampuli iliyokusanywa inahusiana moja kwa moja na ugunduzi unaofuata. Ikiwa sampuli iliyokusanywa ina mzigo wa virusi Chini, rahisi kusababisha hasi za uongo, vigumu kuthibitisha utambuzi.
Muda wa kutuma: Juni-21-2020
