வைரஸ் மாதிரி குழாய் பற்றிய பல எண்ணங்கள்

1. வைரஸ் மாதிரி குழாய்கள் தயாரிப்பது பற்றி
வைரஸ் மாதிரி குழாய்கள் மருத்துவ சாதன தயாரிப்புகளுக்கு சொந்தமானது. பெரும்பாலான உள்நாட்டு உற்பத்தியாளர்கள் முதல் தர தயாரிப்புகளின்படி பதிவு செய்யப்படுகிறார்கள், மேலும் சில நிறுவனங்கள் இரண்டாம் தர தயாரிப்புகளின்படி பதிவு செய்யப்பட்டுள்ளன. சமீபத்தில், வுஹான் மற்றும் பிற இடங்களின் அவசரத் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்வதற்காக, பல நிறுவனங்கள் “அவசர சேனல்” “முதல் வகுப்பு பதிவு அனுமதிக்கு விண்ணப்பிக்கவும். வைரஸ் மாதிரி குழாய் ஒரு மாதிரி ஸ்வாப், வைரஸ் பாதுகாப்பு தீர்வு மற்றும் வெளிப்புற பேக்கேஜிங் ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது. ஒருங்கிணைந்த தேசிய தரநிலை அல்லது தொழில்துறை தரநிலை இல்லாததால், பல்வேறு உற்பத்தியாளர்களின் தயாரிப்புகள் பெரிதும் வேறுபடுகின்றன.

1. மாதிரி துடைப்பான்: மாதிரி துடைப்பான் நேரடியாக மாதிரித் தளத்தைத் தொடர்பு கொள்கிறது, மேலும் மாதிரித் தலையின் பொருள் அடுத்தடுத்த கண்டறிதலுடன் நெருக்கமாக தொடர்புடையது. மாதிரி ஸ்வாப் ஹெட் பாலியஸ்டர் (PE) செயற்கை இழை அல்லது ரேயான் (மனிதனால் உருவாக்கப்பட்ட ஃபைபர்) மூலம் செய்யப்பட வேண்டும். கால்சியம் ஆல்ஜினேட் கடற்பாசி அல்லது மரக் குச்சிகள் (மூங்கில் குச்சிகள் உட்பட) பயன்படுத்த முடியாது, மற்றும் ஸ்வாப் தலையின் பொருள் பருத்தி பொருட்களாக இருக்க முடியாது. பருத்தி நார் புரதத்தின் வலுவான உறிஞ்சுதலைக் கொண்டிருப்பதால், அடுத்தடுத்த சேமிப்புக் கரைசலில் கரைவது எளிதானது அல்ல; கால்சியம் ஆல்ஜினேட் மற்றும் மரக் கூறுகளைக் கொண்ட ஒரு மரக் குச்சி அல்லது மூங்கில் குச்சி உடைந்தால், சேமிப்பகக் கரைசலில் ஊறவைப்பது புரதத்தையும் உறிஞ்சும், மேலும் அது பிசிஆர் எதிர்வினையைத் தடுக்கும். ஸ்வாப் தலையின் பொருளுக்கு PE ஃபைபர், பாலியஸ்டர் ஃபைபர் மற்றும் பாலிப்ரோப்பிலீன் ஃபைபர் போன்ற செயற்கை இழைகளைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. பருத்தி போன்ற இயற்கை இழைகள் பரிந்துரைக்கப்படவில்லை. நைலான் இழைகளும் பரிந்துரைக்கப்படுவதில்லை, ஏனெனில் நைலான் இழைகள் (பல் துலக்க தலைகள் போன்றவை) தண்ணீரை உறிஞ்சும். மோசமானது, இதன் விளைவாக போதுமான மாதிரி அளவு இல்லை, கண்டறிதல் விகிதத்தை பாதிக்கிறது. கால்சியம் ஆல்ஜினேட் கடற்பாசி ஸ்வாப் பொருளை மாதிரி எடுக்க தடைசெய்யப்பட்டுள்ளது! ஸ்வாப் கைப்பிடி இரண்டு வகைகளைக் கொண்டுள்ளது: உடைந்த மற்றும் உள்ளமைக்கப்பட்ட. உடைந்த துடைப்பான் மாதிரியின் பின்னர் சேமிப்புக் குழாயில் வைக்கப்படுகிறது, மேலும் மாதிரித் தலைக்கு அருகில் உள்ள நிலையில் இருந்து உடைந்த பிறகு குழாய் தொப்பி உடைக்கப்படுகிறது; உள்ளமைக்கப்பட்ட துடைப்பான் நேரடியாக மாதிரி துடைப்பான் சேமிப்புக் குழாயில் வைக்கிறது, மேலும் சேமிப்புக் குழாய் உறையானது கைப்பிடியின் மேற்புறத்தில் உள்ள சிறிய துளையை சீரமைத்து குழாய் அட்டையை இறுக்குவதில் கட்டப்பட்டுள்ளது. இரண்டு முறைகளையும் ஒப்பிடுகையில், பிந்தையது ஒப்பீட்டளவில் பாதுகாப்பானது. உடைந்த துடைப்பை சிறிய அளவிலான சேமிப்புக் குழாயுடன் சேர்த்துப் பயன்படுத்தினால், அது உடைந்தால் குழாயில் திரவம் தெறிக்கக்கூடும், மேலும் தயாரிப்பின் முறையற்ற பயன்பாட்டினால் ஏற்படும் மாசுபாட்டின் அபாயத்தில் முழு கவனம் செலுத்தப்பட வேண்டும். ஸ்வாப் கைப்பிடியின் பொருளுக்கு வெற்று பாலிஸ்டிரீன் (பிஎஸ்) வெளியேற்றப்பட்ட குழாய் அல்லது பாலிப்ரோப்பிலீன் (பிபி) ஊசி மடித்தல் குழாய் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. எந்தப் பொருளைப் பயன்படுத்தினாலும், கால்சியம் ஆல்ஜினேட் சேர்க்கைகளைச் சேர்க்க முடியாது; மரக் குச்சிகள் அல்லது மூங்கில் குச்சிகள். சுருக்கமாக, மாதிரி துடைப்பான் மாதிரியின் அளவு மற்றும் வெளியீட்டின் அளவை உறுதி செய்ய வேண்டும், மேலும் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பொருட்களில் அடுத்தடுத்த சோதனைகளை பாதிக்கும் பொருட்கள் இருக்கக்கூடாது.

2. வைரஸ் பாதுகாப்பு தீர்வு: சந்தையில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் இரண்டு வகையான வைரஸ் பாதுகாப்பு தீர்வுகள் உள்ளன, ஒன்று போக்குவரத்து ஊடகத்தின் அடிப்படையில் மாற்றியமைக்கப்பட்ட வைரஸ் பராமரிப்பு தீர்வு, மற்றொன்று நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் லைசேட்டுக்கான மாற்றியமைக்கப்பட்ட தீர்வு.
முந்தையவற்றின் முக்கிய கூறு கழுகின் அடிப்படை கலாச்சார ஊடகம் (MEM) அல்லது ஹாங்கின் சமச்சீர் உப்பு ஆகும், இது வைரஸ் உயிர்வாழ்வதற்கு தேவையான உப்புகள், அமினோ அமிலங்கள், வைட்டமின்கள், குளுக்கோஸ் மற்றும் புரதத்துடன் சேர்க்கப்படுகிறது. இந்த சேமிப்பக தீர்வு பீனால் சிவப்பு சோடியம் உப்பை ஒரு குறிகாட்டியாகவும் தீர்வாகவும் பயன்படுத்துகிறது. pH மதிப்பு 6.6-8.0 ஆக இருக்கும்போது, ​​தீர்வு இளஞ்சிவப்பு நிறத்தில் இருக்கும். தேவையான குளுக்கோஸ், எல்-குளுட்டமைன் மற்றும் புரதம் ஆகியவை பாதுகாப்பு கரைசலில் சேர்க்கப்படுகின்றன. புரதம் கருவின் போவின் சீரம் அல்லது போவின் சீரம் அல்புமின் வடிவத்தில் வழங்கப்படுகிறது, இது வைரஸின் புரத ஷெல்லை உறுதிப்படுத்துகிறது. பாதுகாப்பு கரைசலில் ஊட்டச்சத்துக்கள் நிறைந்திருப்பதால், இது வைரஸின் உயிர்வாழ்விற்கு உகந்தது ஆனால் பாக்டீரியாக்களின் வளர்ச்சிக்கும் நன்மை பயக்கும். பாதுகாப்பு தீர்வு பாக்டீரியாவால் மாசுபட்டால், அது பெரிய அளவில் பெருகும். அதன் வளர்சிதை மாற்றங்களில் உள்ள கார்பன் டை ஆக்சைடு, பிங்க் நிறத்தில் இருந்து மஞ்சள் நிறத்தில் இருந்து பாதுகாக்கும் தீர்வு pH ஐ விழச் செய்யும். எனவே, பெரும்பாலான உற்பத்தியாளர்கள் தங்கள் கலவைகளில் பாக்டீரியா எதிர்ப்பு பொருட்களைச் சேர்த்துள்ளனர். பரிந்துரைக்கப்பட்ட பாக்டீரியா எதிர்ப்பு முகவர்கள் பென்சிலின், ஸ்ட்ரெப்டோமைசின், ஜென்டாமைசின் மற்றும் பாலிமைக்ஸின் பி. சோடியம் அசைட் மற்றும் 2-மெத்தில் ஆகியவை 4-மெத்தில்-4-ஐசோதியசோலின்-3-ஒன் (எம்சிஐ) மற்றும் 5-குளோரோ-2-மெத்தில்-4 போன்ற தடுப்பான்கள் பரிந்துரைக்கப்படவில்லை. -isothiazolin-3-one (CMCI) ஏனெனில் இந்த கூறுகள் ஒரு விளைவைக் கொண்டுள்ளன PCR எதிர்வினை. இந்த பாதுகாப்பு தீர்வு மூலம் வழங்கப்படும் மாதிரி அடிப்படையில் ஒரு நேரடி வைரஸ் என்பதால், மாதிரியின் அசல் தன்மையை அதிக அளவில் வைத்திருக்க முடியும், மேலும் இது வைரஸ் நியூக்ளிக் அமிலங்களை பிரித்தெடுப்பதற்கும் கண்டறிவதற்கும் மட்டுமல்லாமல், சாகுபடிக்கும் பயன்படுத்தப்படலாம். வைரஸ்களை தனிமைப்படுத்துதல். இருப்பினும், கண்டறிதலுக்குப் பயன்படுத்தும் போது, ​​நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு செயலிழந்த பிறகு செய்யப்பட வேண்டும் என்பதைக் கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும்.
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் லைசேட்டின் அடிப்படையில் தயாரிக்கப்பட்ட மற்றொரு வகையான பாதுகாப்பு தீர்வு, முக்கிய கூறுகள் சமச்சீர் உப்புகள், ஈடிடிஏ செலேட்டிங் ஏஜென்ட், குவானைடின் உப்பு (குவானைடின் ஐசோதியோசயனேட், குவானைடின் ஹைட்ரோகுளோரைடு போன்றவை), அயோனிக் சர்பாக்டான்ட் (டோடெகேன் சோடியம் போன்றவை), சிசியம் சல்பேஷன் சர்பாக்டான்ட்கள் (போன்றவை tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K மற்றும் இதர கூறுகள், இந்த சேமிப்பு தீர்வு நேரடியாக வைரஸை பிளவுபடுத்தி நியூக்ளிக் அமிலத்தை வெளியிடுவதற்கும் RNase ஐ அகற்றுவதற்கும் ஆகும். RT-PCR க்கு மட்டுமே பயன்படுத்தினால், அது மிகவும் பொருத்தமானது, ஆனால் லைசேட் வைரஸை செயலிழக்கச் செய்யலாம். வைரஸ் கலாச்சாரத்தைப் பிரிப்பதற்கு இந்த மாதிரியைப் பயன்படுத்த முடியாது.

வைரஸைப் பாதுகாக்கும் கரைசலில் பயன்படுத்தப்படும் உலோக அயன் செலேட்டிங் முகவர், EDTA உப்புகளைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது (டிபொட்டாசியம் எத்திலெனெடியமினெட்ராஅசெட்டிக் அமிலம், டிசோடியம் எத்திலெனெடியமின்டெட்ராஅசெட்டிக் அமிலம் போன்றவை), மேலும் ஹெப்பரின் (சோடியம் ஹெப்பரின், லித்தியம் ஹெப்பரின் போன்றவை) பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படவில்லை. PCR கண்டறிதலை பாதிக்காத வகையில்.
3. பாதுகாப்புக் குழாய்: பாதுகாப்புக் குழாயின் பொருள் கவனமாகத் தேர்ந்தெடுக்கப்பட வேண்டும். பாலிப்ரோப்பிலீன் (பாலிப்ரோப்பிலீன்) நியூக்ளிக் அமிலத்தின் உறிஞ்சுதலுடன் தொடர்புடையது, குறிப்பாக உயர் அழுத்த அயனி செறிவு, பாலிப்ரோப்பிலீன் (பாலிப்ரோப்பிலீன்) ஐ விட பாலிஎதிலீன் (பாலிஎதிலீன்) மிகவும் விரும்பப்படுகிறது, டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவை எளிதில் புரிந்து கொள்ள முடியும். டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏ சேமிப்பிற்கு பாலிஎதிலீன்-புரோப்பிலீன் பாலிமர் (பாலிஅலோமர்) பிளாஸ்டிக் மற்றும் சில பிரத்யேகமாக பதப்படுத்தப்பட்ட பாலிப்ரோப்பிலீன் (பாலிப்ரோப்பிலீன்) பிளாஸ்டிக் கொள்கலன்கள் மிகவும் பொருத்தமானவை. கூடுதலாக, உடைக்கக்கூடிய ஸ்வாப்பைப் பயன்படுத்தும் போது, ​​சேமிப்புக் குழாய் 8 செ.மீ.க்கும் அதிகமான உயரம் கொண்ட ஒரு கொள்கலனைத் தேர்ந்தெடுக்க முயற்சிக்க வேண்டும், துடைப்பம் உடைந்தால் உள்ளடக்கங்கள் தெறிக்கப்படுவதையும் மாசுபடுவதையும் தடுக்கிறது.

4. உற்பத்திப் பாதுகாப்புத் தீர்வுக்கான நீர்: RNase, DNase, மற்றும் எண்டோடாக்சின் போன்ற உயிரியல் மூலங்களிலிருந்து பாலிமர் அசுத்தங்கள் அகற்றப்படுவதை உறுதி செய்வதற்காக, 13,000 மூலக்கூறு எடை கொண்ட அல்ட்ராஃபில்ட்ரேஷன் சவ்வு மூலம் உற்பத்திப் பாதுகாப்புக் கரைசலுக்குப் பயன்படுத்தப்படும் அல்ட்ராப்பூர் நீரை வடிகட்ட வேண்டும். சாதாரண சுத்திகரிப்பு பரிந்துரைக்கப்படவில்லை. தண்ணீர் அல்லது காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர்.

2. வைரஸ் மாதிரி குழாய்களைப் பயன்படுத்துதல்

வைரஸ் மாதிரிக் குழாயைப் பயன்படுத்தி மாதிரி எடுப்பது முக்கியமாக ஓரோபார்னீஜியல் மாதிரி மற்றும் நாசோபார்னீஜியல் மாதிரியாகப் பிரிக்கப்படுகிறது:

1. ஓரோஃபரிங்கீயல் மாதிரி: முதலில் நாக்கை அழுத்தி நாக்கை அழுத்தவும், பின்னர் மாதிரி ஸ்வாப்பின் தலையை தொண்டைக்குள் நீட்டி இருதரப்பு குரல்வளை டான்சில்ஸ் மற்றும் பின்புற தொண்டைச் சுவரைத் துடைத்து, பின்பக்க தொண்டைச் சுவரை லேசான விசையால் துடைத்து, நாக்கைத் தொடுவதைத் தவிர்க்கவும். அலகு.

2. நாசோபார்னீஜியல் மாதிரி: மூக்கின் நுனியிலிருந்து காது மடல் வரையிலான தூரத்தை ஒரு துடைப்பால் அளந்து, விரலால் குறிக்கவும், செங்குத்து மூக்கின் (முகம்) திசையில் நாசி குழிக்குள் மாதிரி துடைப்பைச் செருகவும். மூக்கின் நுனி வரை காது மடலின் பாதி நீளம், மூக்கில் ஸ்வாப்பை விடவும் 15-30 வினாடிகள், மெதுவாக 3-5 முறை சுழற்றவும், மற்றும் துடைப்பத்தை திரும்பப் பெறவும்.
பயன்பாட்டின் முறையிலிருந்து பார்ப்பது கடினம் அல்ல, இது ஒரு ஓரோபார்னீஜியல் ஸ்வாப் அல்லது நாசோபார்னீஜியல் ஸ்வாப், மாதிரி எடுப்பது ஒரு தொழில்நுட்ப பணியாகும், இது கடினமானது மற்றும் அசுத்தமானது. சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரியின் தரம், அடுத்தடுத்த கண்டறிதலுடன் நேரடியாக தொடர்புடையது. சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரியில் வைரஸ் சுமை குறைவாக இருந்தால், தவறான எதிர்மறைகளை ஏற்படுத்துவது எளிது, நோயறிதலை உறுதிப்படுத்துவது கடினம்.