1. Дар бораи истехсоли найчахои намунаи вирус
Қубурҳои намунагирии вирус ба маҳсулоти таҷҳизоти тиббӣ тааллуқ доранд. Аксари истеҳсолкунандагони ватанӣ аз рӯи маҳсулоти навъи якум ва шумораи ками корхонаҳо аз рӯи маҳсулоти навъи дуюм ба қайд гирифта шудаанд. Ба наздикӣ, барои қонеъ кардани эҳтиёҷоти фавқулоддаи Вуҳан ва дигар ҷойҳо, бисёр ширкатҳо "канали фавқулодда" -ро гирифтанд "Барои иҷозати сабти дараҷаи аввал муроҷиат кунед. Қубури намунаи вирус аз тампончаи намунагирӣ, маҳлули муҳофизати вирус ва бастаи берунӣ иборат аст. Азбаски стандарти ягонаи миллӣ ё стандарти саноатӣ вуҷуд надорад, маҳсулоти истеҳсолкунандагони гуногун хеле фарқ мекунанд.
1. Тампончаи интихоб: Тампончаи намунагирӣ мустақиман бо макони интихоб тамос мегирад ва маводи сари намуна бо ошкоркунии минбаъда зич алоқаманд аст. Сари тампончаи намунавӣ бояд аз нахи синтетикии полиэстер (ПЭ) ё Район (нахи сунъӣ) бошад. Исфанҷи алгинати калсий ё чӯбҳои чӯбӣ (аз ҷумла чӯбҳои бамбук) истифода намешавад ва маводи сари тампон маҳсулоти пахтагӣ буда наметавонад. Азбаски нахи пахта дорои адсорбсияи пурқуввати сафеда мебошад, ба маҳлули нигоҳдории минбаъдаи он elute кардан осон нест; ва ҳангоме ки чӯби чӯбӣ ё чӯби бамбуки дорои алгинати калсий ва ҷузъҳои чӯбӣ шикаста мешавад, тар кардан дар маҳлули нигоҳдорӣ инчунин протеинро адсорб мекунад ва ҳатто метавонад реаксияи минбаъдаи PCR-ро боздорад. Тавсия дода мешавад, ки нахҳои синтетикӣ ба монанди нахи PE, нахи полиэстер ва нахи полипропиленӣ барои маводи сари тампон истифода шаванд. Нахҳои табиӣ ба монанди пахта тавсия дода намешаванд. Нахҳои нейлон низ тавсия дода намешаванд, зеро нахҳои нейлон (монанди сарҳои чуткаи дандоншуй) обро ҷабб мекунанд. Камбизоат, ки дар натиҷа ҳаҷми нокифояи интихоб, ба суръати ошкор таъсир мерасонад. Исфанҷи алгинати калсий барои гирифтани маводи тампон манъ аст! Дастаки Swab ду намуд дорад: шикаста ва дарунсохт. Тампончаи шикаста пас аз гирифтани намуна дар найчаи нигоҳдорӣ ҷойгир карда мешавад ва сарпӯши қубур пас аз шикаста аз мавқеъ дар назди сари намуна шикаста мешавад; тампончаи дарунсохт пас аз гирифтани намуна бевосита тампони намунагириро ба қубури нигаҳдорӣ мегузорад ва сарпӯши қубури нигаҳдорӣ дар сӯрохи хурдро бо болои даста мувофиқ кунед ва сарпӯши қубурро маҳкам кунед. Бо муқоисаи ду усул, охирин нисбатан бехатар аст. Вақте ки тампончаи шикаста дар якҷоягӣ бо найчаи нигоҳдории андозаи хурдтар истифода мешавад, он метавонад ҳангоми шикастан дар қубур пошидани моеъ гардад ва бояд ба хатари олудашавӣ дар натиҷаи истифодаи нодурусти маҳсулот диққати пурра дода шавад. Тавсия дода мешавад, ки барои маводи дастаки тампон аз қубури сӯзишвории полистироли холишуда (ПС) ё қубури сӯзандоруи полипропиленӣ (ПП) истифода шавад. Новобаста аз он ки кадом мавод истифода мешавад, иловаҳои алгинати кальцийро илова кардан мумкин нест; чубхои чубин ё чубхои бамбук. Хулоса, тампони намунавӣ бояд миқдори намуна ва миқдори озодро таъмин кунад ва маводи интихобшуда набояд моддаҳое дошта бошанд, ки ба санҷиши минбаъда таъсир расонанд.
2. Маҳлули ҳифзи вирус: Дар бозор ду намуди маҳлулҳои муҳофизати вирусҳо ба таври васеъ истифода мешаванд, яке маҳлули нигоҳдории вирус дар асоси муҳити интиқол тағйирёфта ва дигаре маҳлули тағирёфта барои лизати истихроҷи кислотаи нуклеинӣ мебошад.
Ҷузъи асосии пештара муҳити асосии фарҳангии Eagle (MEM) ё намаки мутавозини Хэнк мебошад, ки бо намакҳо, аминокислотаҳо, витаминҳо, глюкоза ва сафеда барои зинда мондани вирус илова карда мешавад. Ин маҳлули нигоҳдорӣ намаки натрийи феноли сурхро ҳамчун индикатор ва маҳлул истифода мебарад. Вақте ки арзиши рН 6,6-8,0 аст, маҳлул гулобӣ аст. Ба маҳлули консерва глюкоза, L-глутамин ва сафедаи зарурӣ илова карда мешавад. Протеин дар шакли хунобаи гови ҳомила ё альбумини зардоби гов таъмин карда мешавад, ки метавонад қабати сафедаи вирусро устувор созад. Азбаски маҳлули консервативӣ аз маводи ғизоӣ бой аст, он барои зинда мондани вирус мусоид аст, аммо барои афзоиши бактерияҳо низ муфид аст. Агар маҳлули консерва бо бактерияҳо олуда бошад, он ба миқдори зиёд афзоиш меёбад. Гази оксиди карбон дар метаболитҳои он боиси паст шудани рН маҳлули консервативӣ мегардад, ки аз гулобӣ зард мешавад. Аз ин рӯ, аксари истеҳсолкунандагон ба таркиби худ компонентҳои зиддибактериявӣ илова кардаанд. Воситаҳои зиддибактериявии тавсияшаванда пенициллин, стрептомицин, гентамицин ва полимиксин В мебошанд. Азиди натрий ва 2-метил тавсия дода намешавад Ингибиторҳо ба монанди 4-метил-4-изотиазолин-3-он (MCI) ва 5-хлоро-2-метил-4 -изотиазолин-3-он (CMCI), зеро ин ҷузъҳо ба реаксияи PCR таъсир мерасонанд. Азбаски намунае, ки ин маҳлули консервативӣ пешниҳод кардааст, аслан як вируси зинда аст, асолати намуна метавонад то ҳадди имкон нигоҳ дошта шавад ва он метавонад на танҳо барои истихроҷ ва ошкор кардани кислотаҳои нуклеинҳои вирус, балки барои парвариш ва парвариши он низ истифода шавад. ҷудокунии вирусҳо. Бо вуҷуди ин, бояд қайд кард, ки ҳангоми истифода барои муайянкунӣ, истихроҷи кислотаи нуклеинӣ ва тозакунӣ бояд пас аз ғайрифаъолкунӣ анҷом дода шавад.
Навъи дигари маҳлули консервативӣ, ки дар асоси лизати экстраксияи кислотаи нуклеинӣ омода шудааст, ҷузъҳои асосӣ намакҳои мутавозин, агенти хелати EDTA, намаки гуанидин (аз қабили изотиоцианати гуанидин, гидрохлориди гуанидин ва ғайра), сурфактанти анионӣ (ба монанди додекан сулфати натрий), сурфактантҳо (ба монанди оксалати тетрадецилтриметиламмоний), фенол, 8-гидроксикинолин, дитиотреитол (DTT), протеиназа К ва дигар ҷузъҳо, Ин маҳлули нигоҳдорӣ мустақиман ҷудо кардани вирусро барои озод кардани кислотаи нуклеин ва нест кардани RNase мебошад. Агар танҳо барои RT-PCR истифода шавад, он мувофиқтар аст, аммо лизат метавонад вирусро ғайрифаъол кунад. Ин намуди намунаро барои ҷудо кардани фарҳанги вирус истифода бурдан мумкин нест.
Агенти хелаткунандаи ионҳои металлӣ, ки дар маҳлули муҳофизати вирус истифода мешавад, тавсия дода мешавад, ки намакҳои EDTA (ба монанди кислотаи дикалий этилендиаминтетраасетитӣ, кислотаи этилендиаминтетраастикӣ ва ғайра) ва истифодаи гепарин (масалан, гепарин натрий, гепарин литий), тавсия дода намешавад. то ба муайянкунии PCR таъсир нарасонад.
3. Қубури нигоҳдорӣ: Маводи қубури консерва бояд бодиққат интихоб карда шавад. Маълумоте мавҷуд аст, ки полипропилен (Полипропилен) ба адсорбсияи кислотаи нуклеинӣ алоқаманд аст, махсусан дар консентратсияи ионҳои шиддати баланд, полиэтилен (Полиэтилен) нисбат ба полипропилен (Полипропилен) бартарӣ дорад, ДНК/РНК осон аст. Пластмассаи полиэтилен-пропиленӣ (Полиалломер) ва баъзе зарфҳои пластикии махсуси коркардшудаи полипропиленӣ (Полипропиленӣ) барои нигаҳдории ДНК/РНК бештар мувофиқанд. Илова бар ин, ҳангоми истифодаи тампони шикаста, найчаи нигоҳдорӣ бояд кӯшиш кунад, ки контейнери баландиаш аз 8 см зиёдтар интихоб кунад, то ҳангоми шикастани тампон пошидан ва олуда нашавад.
4. Об барои маҳлули нигоҳдории истеҳсолот: Оби ултра тозае, ки барои маҳлули консерватсияи истеҳсолот истифода мешавад, бояд тавассути мембранаи ултрафилтратсионӣ бо вазни молекулавии 13,000 филтр карда шавад, то бартараф кардани ифлосҳои полимерӣ аз манбаъҳои биологӣ, аз қабили RNase, DNase ва эндотоксин, ва тозакунии оддӣ тавсия дода намешавад. Об ё оби тозашуда.
2. Истифодаи найҳои намунаи вирус
Гирифтани намуна бо истифода аз найчаи намунагирии вирус асосан ба намунагирии орофарингеалӣ ва намунагирии бинӣ тақсим карда мешавад:
1. Намунаи орофарингеалӣ: Аввал забонро бо депрессори забон пахш кунед, сипас сари тампончаи намунагириро ба гулӯ дароз кунед, то бодомакҳои дуҷонибаи ҳалқ ва девори ҳалқи паси ҳалқро пок кунед ва девори қафои ҳалқро бо қувваи сабук хушк кунед, ба забон даст нарасонед. воҳиди.
2. Намунаи бинӣ: масофаро аз нӯги бинӣ то пораи гӯш бо тампон чен кунед ва бо ангушт ишора кунед, тампончаи намунагириро ба холигоҳи бинӣ ба самти бинии амудӣ (рӯй) гузоред, тампон бояд дароз карда шавад. камаш нисфи дарозии лӯлаи гӯшро то нӯги бинӣ гузоред, тампонро дар бинӣ барои 15-30 сония гузоред, 3-5 маротиба мулоим гардед ва тампонро кашед.
Аз тарзу усули истифода дидан душвор нест, хох он тампони орофарингеалй бошад, хох тампончаи бинй, гирифтани намуна кори техникиест, ки душвор ва ифлос аст. Сифати намунаи ҷамъшуда бевосита ба ошкоркунии минбаъда вобаста аст. Агар намунаи ҷамъовардашуда дорои сарбории вирусӣ паст бошад, ба осонӣ боиси манфии бардурӯғ, тасдиқи ташхис мушкил аст.
Вақти фиристодан: июн-21-2020