1. เกี่ยวกับการผลิตหลอดสุ่มตัวอย่างไวรัส
หลอดสุ่มตัวอย่างไวรัสเป็นของผลิตภัณฑ์อุปกรณ์การแพทย์ ผู้ผลิตในประเทศส่วนใหญ่ได้รับการจดทะเบียนตามผลิตภัณฑ์ชั้นหนึ่งและไม่กี่ บริษัท ที่ลงทะเบียนตามผลิตภัณฑ์ระดับสอง เมื่อเร็ว ๆ นี้เพื่อตอบสนองความต้องการฉุกเฉินของ Wuhan และสถานที่อื่น ๆ บริษัท หลายแห่งได้ใช้“ ช่องทางฉุกเฉิน”“ ใช้สำหรับการบันทึกชั้นหนึ่ง
1. การสุ่มตัวอย่าง SWAB: SWAB การสุ่มตัวอย่างติดต่อโดยตรงกับไซต์การสุ่มตัวอย่างและวัสดุของหัวการสุ่มตัวอย่างเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการตรวจจับที่ตามมา หัว Swab ตัวอย่างควรทำจากเส้นใยสังเคราะห์โพลีเอสเตอร์ (PE) หรือเรยอน (เส้นใยที่มนุษย์สร้างขึ้น) ไม่สามารถใช้ฟองน้ำแคลเซียมอัลจิเนตหรือไม้แท่งไม้ (รวมถึงแท่งไม้ไผ่) และวัสดุของหัว Swab ไม่สามารถเป็นผลิตภัณฑ์ฝ้ายได้ เนื่องจากเส้นใยฝ้ายมีการดูดซับโปรตีนที่แข็งแกร่งจึงไม่ใช่เรื่องง่ายที่จะตัดเข้าไปในสารละลายการจัดเก็บที่ตามมา และเมื่อไม้แท่งไม้หรือไม้ไผ่ที่มีส่วนประกอบของแคลเซียมอัลจิเนตและไม้หักการแช่ในสารละลายเก็บจะดูดซับโปรตีนและแม้กระทั่งมันจะสามารถยับยั้งปฏิกิริยา PCR ที่ตามมา ขอแนะนำให้ใช้เส้นใยสังเคราะห์เช่นไฟเบอร์ PE, เส้นใยโพลีเอสเตอร์และเส้นใยโพลีโพรพีลีนสำหรับวัสดุของหัว Swab ไม่แนะนำให้ใช้เส้นใยธรรมชาติเช่นฝ้าย ไม่แนะนำให้ใช้เส้นใยไนล่อนเนื่องจากเส้นใยไนล่อน (คล้ายกับหัวแปรงสีฟัน) ดูดซับน้ำ แย่ส่งผลให้ปริมาณการสุ่มตัวอย่างไม่เพียงพอส่งผลต่ออัตราการตรวจจับ ฟองน้ำแคลเซียมอัลจิเนตเป็นสิ่งต้องห้ามสำหรับการสุ่มตัวอย่างวัสดุ SWAB! Swab Handle มีสองประเภท: แตกและในตัว Swab ที่หักจะถูกวางไว้ในหลอดเก็บหลังจากการสุ่มตัวอย่างและฝาปิดท่อจะแตกหลังจากถูกหักจากตำแหน่งใกล้กับหัวการสุ่มตัวอย่าง; SWAB ในตัวโดยตรงจะทำให้ Swab สุ่มตัวอย่างลงในหลอดจัดเก็บหลังการสุ่มตัวอย่างและฝาครอบท่อหลอดเก็บในการจัดแนวหลุมเล็ก ๆ กับด้านบนของที่จับและขันฝาครอบท่อให้แน่น การเปรียบเทียบทั้งสองวิธีหลังค่อนข้างปลอดภัย เมื่อใช้ไม้กวาดที่หักถูกใช้ร่วมกับท่อเก็บขนาดเล็กอาจทำให้เกิดการสาดของเหลวในหลอดเมื่อหักและควรให้ความสนใจอย่างเต็มที่กับความเสี่ยงของการปนเปื้อนที่เกิดจากการใช้ผลิตภัณฑ์ที่ไม่เหมาะสม ขอแนะนำให้ใช้หลอดโพลีสไตรีนกลวง (PS) ท่ออัดรีดหรือโพลีโพรพีลีน (PP) ท่อรอยพับสำหรับวัสดุของที่จับ Swab ไม่ว่าจะใช้วัสดุใดก็ตามสารเติมแต่งแคลเซียมอัลจิเนตไม่สามารถเพิ่มได้ ไม้ไม้หรือไม้ไผ่ไม้ไผ่ ในระยะสั้น Swab การสุ่มตัวอย่างควรตรวจสอบให้แน่ใจว่าปริมาณการสุ่มตัวอย่างและปริมาณการปล่อยและวัสดุที่เลือกจะต้องไม่มีสารที่ส่งผลกระทบต่อการทดสอบที่ตามมา
2. โซลูชันการเก็บรักษาไวรัส: มีโซลูชั่นการเก็บรักษาไวรัสสองชนิดที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในตลาดหนึ่งคือโซลูชันการบำรุงรักษาไวรัสที่ปรับเปลี่ยนตามสื่อการขนส่งและอื่น ๆ เป็นสารละลายดัดแปลงสำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกไลเซท
องค์ประกอบหลักของอดีตคืออาหารเลี้ยงเชื้อพื้นฐานของ Eagle (MEM) หรือเกลือที่สมดุลของ Hank ซึ่งถูกเพิ่มเข้ากับเกลือ, กรดอะมิโน, วิตามิน, กลูโคสและโปรตีนที่จำเป็นสำหรับการอยู่รอดของไวรัส โซลูชันการจัดเก็บนี้ใช้เกลือโซเดียมสีแดงฟีนอลเป็นตัวบ่งชี้และวิธีแก้ปัญหา เมื่อค่า pH คือ 6.6-8.0 วิธีแก้ปัญหาคือสีชมพู กลูโคสที่จำเป็น L-glutamine และโปรตีนจะถูกเพิ่มเข้าไปในสารละลายการเก็บรักษา โปรตีนมีให้ในรูปแบบของซีรั่มของทารกในครรภ์หรือซีรั่มอัลบูมินในซีรั่มซึ่งสามารถรักษาเสถียรภาพของเปลือกโปรตีนของไวรัส เนื่องจากสารละลายการเก็บรักษานั้นอุดมไปด้วยสารอาหารจึงเอื้อต่อการอยู่รอดของไวรัส แต่ยังเป็นประโยชน์ต่อการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย หากสารละลายการเก็บรักษาถูกปนเปื้อนด้วยแบคทีเรียมันจะทวีคูณในปริมาณมาก คาร์บอนไดออกไซด์ในเมตาโบไลต์จะทำให้สารละลายการเก็บรักษาค่า pH ลดลงจากสีชมพูเปลี่ยนเป็นสีเหลือง ดังนั้นผู้ผลิตส่วนใหญ่ได้เพิ่มส่วนผสมต้านเชื้อแบคทีเรียลงในสูตรของพวกเขา สารต้านเชื้อแบคทีเรียที่แนะนำ ได้แก่ เพนิซิลลิน, สเตรปโตมัยซิน, gentamicin และโพลีเมียซินบีโซเดียมอะไซด์และ 2-methyl ไม่แนะนำให้ใช้สารยับยั้งเช่น 4-methyl-4-isothiazolin-3-one-one (MCI) และ 5-chloro-2-methyl-isothia เนื่องจากตัวอย่างที่ได้รับจากการแก้ปัญหาการเก็บรักษานี้เป็นไวรัสที่มีชีวิตความคิดริเริ่มของตัวอย่างสามารถเก็บไว้ในระดับที่ยิ่งใหญ่ที่สุดและสามารถใช้ไม่เพียง แต่สำหรับการสกัดและตรวจจับกรดนิวคลีอิกไวรัส แต่ยังสำหรับการเพาะปลูกและการแยกไวรัส อย่างไรก็ตามควรสังเกตว่าเมื่อใช้สำหรับการตรวจจับการสกัดกรดนิวคลีอิกและการทำให้บริสุทธิ์จะต้องดำเนินการหลังจากหยุดการทำงาน
สารละลายการเก็บรักษาอีกชนิดหนึ่งที่เตรียมขึ้นอยู่กับการสกัดกรดนิวคลีอิกไลเซทส่วนประกอบหลักคือเกลือที่สมดุล, เอ็ดต้าคีเลต, เกลือ guanidine (เช่น guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride ฯลฯ ) ฟีนอล, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), protease K และส่วนประกอบอื่น ๆ โซลูชันการจัดเก็บนี้จะแยกไวรัสโดยตรงเพื่อปล่อยกรดนิวคลีอิกและกำจัด RNase หากใช้สำหรับ RT-PCR เท่านั้นมันจะเหมาะสมกว่า แต่ไลเซทสามารถยับยั้งไวรัสได้ ตัวอย่างประเภทนี้ไม่สามารถใช้สำหรับการแยกวัฒนธรรมไวรัส
สาร chelating ไอออนโลหะที่ใช้ในสารละลายการเก็บรักษาไวรัสแนะนำให้ใช้เกลือ EDTA (เช่นกรด dipotassium ethylenediaminetetraacetic, disodium ethylenediaminetetraacetic ฯลฯ ) และไม่แนะนำให้ใช้เฮปาริน (เช่นโซเดียมเฮปาริน
3. ควรเลือกหลอดเก็บรักษา: วัสดุของหลอดเก็บรักษาอย่างระมัดระวัง มีข้อมูลที่ชี้ให้เห็นว่าโพลีโพรพีลีน (โพลีโพรพีลีน) มีความสัมพันธ์กับการดูดซับของกรดนิวคลีอิกโดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ความเข้มข้นของไอออนแรงดันสูงโพลีเอทิลีน (โพลีเอทิลีน) เป็นที่ต้องการมากกว่าโพลีโพรพีลีน พลาสติกโพลีเอทิลีนโพรพิลีนโพลีเมอร์ (polyallomer) และภาชนะพลาสติกโพลีโพรพีลีน (โพลีโพรพีลีน) ที่ผ่านการประมวลผลพิเศษนั้นเหมาะสำหรับการเก็บ DNA/RNA นอกจากนี้เมื่อใช้ SWAB แบบเบรกได้หลอดจัดเก็บควรพยายามเลือกภาชนะที่มีความสูงมากกว่า 8 ซม. เพื่อป้องกันไม่ให้เนื้อหาถูกสาดและปนเปื้อนเมื่อ SWAB เสีย
4. น้ำสำหรับการเก็บรักษาการผลิตการผลิต: น้ำพิเศษที่ใช้สำหรับสารละลายการเก็บรักษาการผลิตควรถูกกรองผ่านเยื่อหุ้มกริ่งที่มีน้ำหนักโมเลกุล 13,000 เพื่อให้แน่ใจว่าการกำจัดสิ่งเจือปนพอลิเมอร์ออกจากแหล่งชีวภาพเช่น RNase, DNase และ Endotoxin น้ำหรือน้ำกลั่น
2. การใช้หลอดสุ่มตัวอย่างไวรัส
การสุ่มตัวอย่างโดยใช้หลอดสุ่มตัวอย่างไวรัสส่วนใหญ่แบ่งออกเป็นตัวอย่าง oropharyngeal และการสุ่มตัวอย่างโพรงหลังจมูก:
1. การสุ่มตัวอย่าง oropharyngeal: ก่อนกดลิ้นด้วยลิ้น depressor จากนั้นขยายหัวของการสุ่มตัวอย่างแกว่งเข้าไปในลำคอเพื่อเช็ดต่อมทอนซิลคอห่านทวิภาคีและผนังคอหอยด้านหลัง
2. การสุ่มตัวอย่างโพรงหลังจมูก: วัดระยะทางจากปลายจมูกไปยังกลีบหูด้วยไม้กวาดและทำเครื่องหมายด้วยนิ้ว, ใส่การสุ่มตัวอย่าง swab ลงในโพรงจมูกในทิศทางของจมูกแนวตั้ง
ไม่ยากที่จะมองเห็นจากวิธีการใช้งานไม่ว่าจะเป็น swab oropharyngeal หรือ swab nasopharyngeal การสุ่มตัวอย่างเป็นงานทางเทคนิคซึ่งยากและปนเปื้อน คุณภาพของตัวอย่างที่รวบรวมนั้นเกี่ยวข้องโดยตรงกับการตรวจจับที่ตามมา หากตัวอย่างที่รวบรวมมีภาระของไวรัสต่ำและง่ายต่อการทำให้เกิดผลลบเท็จยากที่จะยืนยันการวินิจฉัย
เวลาโพสต์: Jun-21-2020