1. Tungkol sa paggawa ng mga virus sampling tubes
Nabibilang ang mga virus sampling tube sa mga produktong medikal na device. Karamihan sa mga domestic na tagagawa ay nakarehistro ayon sa mga first-class na produkto, at ilang kumpanya ang nakarehistro ayon sa pangalawang-class na mga produkto. Kamakailan lamang, upang matugunan ang mga pang-emerhensiyang pangangailangan ng Wuhan at iba pang mga lugar, maraming kumpanya ang kumuha ng "emergency channel" na "Mag-apply para sa pahintulot sa unang klase ng record. Ang virus sampling tube ay binubuo ng sampling swab, virus preservation solution at panlabas na packaging. Dahil walang pinag-isang pambansang pamantayan o pamantayan ng industriya, ang mga produkto ng iba't ibang mga tagagawa ay lubhang nag-iiba.
1. Sampling swab: Ang sampling swab ay direktang nakikipag-ugnayan sa sampling site, at ang materyal ng sampling head ay malapit na nauugnay sa kasunod na pagtuklas. Ang sampling swab head ay dapat gawa sa Polyester (PE) synthetic fiber o Rayon (man-made fiber). Ang calcium alginate sponge o wooden stick swab (kabilang ang bamboo sticks) ay hindi maaaring gamitin, at ang materyal ng swab head ay hindi maaaring mga produktong cotton. Dahil ang cotton fiber ay may malakas na adsorption ng protina, hindi madaling mag-elute sa kasunod na solusyon sa imbakan; at kapag ang isang kahoy na stick o bamboo stick na naglalaman ng calcium alginate at mga sangkap na gawa sa kahoy ay nasira, ang pagbabad sa solusyon sa imbakan ay mag-adsorb din ng protina, at kahit na mapipigilan nito ang kasunod na reaksyon ng PCR. Inirerekomenda na gumamit ng mga synthetic fibers tulad ng PE fiber, polyester fiber at polypropylene fiber para sa materyal ng swab head. Ang mga likas na hibla tulad ng koton ay hindi inirerekomenda. Hindi rin inirerekomenda ang mga hibla ng nylon dahil ang mga hibla ng nylon (katulad ng mga ulo ng toothbrush) ay sumisipsip ng tubig. Mahina, na nagreresulta sa hindi sapat na dami ng sampling, na nakakaapekto sa rate ng pagtuklas. Ang calcium alginate sponge ay ipinagbabawal para sa pag-sample ng materyal na pamunas! May dalawang uri ang swab handle: sira at built-in. Ang sirang pamunas ay inilalagay sa storage tube pagkatapos ng sampling, at ang tube cap ay nasira pagkatapos masira mula sa posisyon na malapit sa sampling head; ang built-in na pamunas ay direktang inilalagay ang sampling swab sa storage tube pagkatapos ng sampling, at ang storage tube tube cover ay binuo sa I-align ang maliit na butas sa tuktok ng hawakan at higpitan ang tube cover. Ang paghahambing ng dalawang pamamaraan, ang huli ay medyo ligtas. Kapag ang sirang pamunas ay ginamit kasabay ng mas maliit na laki ng storage tube, maaari itong magdulot ng pag-splash ng likido sa tubo kapag nasira, at dapat bigyan ng buong atensyon ang panganib ng kontaminasyon na dulot ng hindi wastong paggamit ng produkto. Inirerekomenda na gumamit ng hollow polystyrene (PS) extruded tube o polypropylene (PP) injection creasing tube para sa materyal ng swab handle. Hindi mahalaga kung anong materyal ang ginagamit, ang mga additives ng calcium alginate ay hindi maaaring idagdag; kahoy na patpat o Bamboo stick. Sa madaling salita, dapat tiyakin ng sampling swab ang dami ng sampling at ang dami ng ilalabas, at ang mga napiling materyales ay dapat walang mga substance na makakaapekto sa kasunod na pagsusuri.
2. Virus preservation solution: Mayroong dalawang uri ng virus preservation solutions na malawakang ginagamit sa merkado, ang isa ay ang virus maintenance solution na binago batay sa transport medium, at ang isa ay binagong solusyon para sa nucleic acid extraction lysate.
Ang pangunahing bahagi ng una ay ang pangunahing kultura ng Eagle's medium (MEM) o balanseng asin ni Hank, na idinagdag sa mga asin, amino acid, bitamina, glucose at protina na kinakailangan para sa kaligtasan ng virus. Gumagamit ang storage solution na ito ng phenol red sodium salt bilang indicator at solusyon. Kapag ang pH value ay 6.6-8.0, ang solusyon ay pink. Ang kinakailangang glucose, L-glutamine at protina ay idinagdag sa preservation solution. Ang protina ay ibinibigay sa anyo ng fetal bovine serum o bovine serum albumin, na maaaring patatagin ang protina shell ng virus. Dahil ang preservation solution ay mayaman sa nutrients, ito ay nakakatulong sa kaligtasan ng virus ngunit kapaki-pakinabang din sa paglaki ng bacteria. Kung ang preservation solution ay kontaminado ng bacteria, ito ay dadami sa maraming dami. Ang carbon dioxide sa mga metabolite nito ay magiging sanhi ng pagbagsak ng pH ng preservation solution mula sa pink Nagiging dilaw. Samakatuwid, ang karamihan sa mga tagagawa ay nagdagdag ng mga sangkap na antibacterial sa kanilang mga pormulasyon. Ang mga inirerekomendang antibacterial agent ay penicillin, streptomycin, gentamicin at polymyxin B. Ang sodium azide at 2-methyl ay hindi inirerekomenda Mga inhibitor tulad ng 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) at 5-chloro-2-methyl-4 -isothiazolin-3-one (CMCI) dahil ang mga sangkap na ito ay may epekto sa reaksyon ng PCR. Dahil ang sample na ibinigay ng solusyon sa pangangalaga na ito ay karaniwang isang live na virus, ang pagka-orihinal ng sample ay maaaring panatilihin sa pinakamalaking lawak, at maaari itong gamitin hindi lamang para sa pagkuha at pagtuklas ng mga nucleic acid ng virus, kundi pati na rin para sa paglilinang at paghihiwalay ng mga virus. Gayunpaman, dapat tandaan na kapag ginamit para sa pagtuklas, ang pagkuha at paglilinis ng nucleic acid ay dapat isagawa pagkatapos ng hindi aktibo.
Isa pang uri ng preservation solution na inihanda batay sa nucleic acid extraction lysate, ang mga pangunahing bahagi ay balanseng salts, EDTA chelating agent, guanidine salt (tulad ng guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, atbp.), anionic surfactant (tulad ng dodecane Sodium sulfate), cationic surfactants (tulad ng tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K at iba pang mga bahagi, Ang solusyon sa imbakan na ito ay direktang hiwain ang virus upang palabasin ang nucleic acid at alisin ang RNase. Kung gagamitin lamang para sa RT-PCR, ito ay mas angkop, ngunit ang lysate ay maaaring mag-inactivate ng virus. Hindi maaaring gamitin ang ganitong uri ng sample para sa paghihiwalay ng kultura ng virus.
Ang metal ion chelating agent na ginamit sa virus preservation solution ay inirerekomendang gumamit ng EDTA salts (tulad ng dipotassium ethylenediaminetetraacetic acid, disodium ethylenediaminetetraacetic acid, atbp.), at hindi inirerekomenda na gumamit ng heparin (tulad ng sodium heparin, lithium heparin), para hindi maapektuhan ang PCR detection.
3. Preservation tube: Ang materyal ng preservation tube ay dapat piliin nang mabuti. May mga data na nagmumungkahi na ang polypropylene (Polypropylene) ay nauugnay sa adsorption ng nucleic acid, lalo na sa mataas na tension na konsentrasyon ng ion, ang polyethylene (Polyethylene) ay mas ginustong kaysa polypropylene (Polypropylene) Madaling hawakan ang DNA/RNA. Ang polyethylene-propylene polymer (Polyallomer) na plastik at ilang espesyal na naprosesong polypropylene (Polypropylene) na mga plastic na lalagyan ay mas angkop para sa imbakan ng DNA/RNA. Bilang karagdagan, kapag gumagamit ng nabasag na pamunas, ang storage tube ay dapat subukang pumili ng isang lalagyan na may taas na higit sa 8 cm upang maiwasan ang mga nilalaman mula sa splashed at kontaminado kapag ang pamunas ay nasira.
4. Tubig para sa solusyon sa pangangalaga sa produksyon: Ang ultrapure na tubig na ginagamit para sa solusyon sa pagpapanatili ng produksyon ay dapat na salain sa pamamagitan ng ultrafiltration membrane na may molekular na timbang na 13,000 upang matiyak ang pag-aalis ng mga polymer impurities mula sa biological na pinagmumulan, tulad ng RNase, DNase, at endotoxin, at hindi inirerekomenda ang ordinaryong paglilinis. Tubig o distilled water.
2. Paggamit ng mga virus sampling tubes
Ang sampling gamit ang virus sampling tube ay pangunahing nahahati sa oropharyngeal sampling at nasopharyngeal sampling:
1. Oropharyngeal sampling: Pindutin muna ang dila gamit ang tongue depressor, pagkatapos ay i-extend ang ulo ng sampling swab papunta sa lalamunan para punasan ang bilateral pharyngeal tonsils at posterior pharyngeal wall, at punasan ang posterior pharyngeal wall ng light force, iwasang hawakan ang dila. yunit.
2. Nasopharyngeal sampling: sukatin ang distansya mula sa dulo ng ilong hanggang sa umbok ng tainga gamit ang isang pamunas at markahan ng isang daliri, ipasok ang sampling pamunas sa lukab ng ilong sa direksyon ng patayong ilong (mukha), ang pamunas ay dapat na pahabain hindi bababa sa kalahati ng haba ng umbok ng tainga hanggang sa dulo ng ilong, Iwanan ang pamunas sa ilong sa loob ng 15-30 segundo, dahan-dahang paikutin ng 3-5 beses, at bawiin ang pamunas.
Ito ay hindi mahirap makita mula sa paraan ng paggamit, kung ito ay isang oropharyngeal swab o isang nasopharyngeal swab, ang sampling ay isang teknikal na gawain, na mahirap at kontaminado. Ang kalidad ng nakolektang sample ay direktang nauugnay sa kasunod na pagtuklas. Kung ang nakolektang sample ay may viral load Mababa, madaling magdulot ng mga maling negatibo, mahirap kumpirmahin ang diagnosis.
Oras ng post: Hun-21-2020
