1. Virüs örnekleme tüplerinin imalatı hakkında
Virüs örnekleme tüpleri tıbbi cihaz ürünlerine aittir. Yerli üreticilerin çoğu birinci sınıf ürünlere göre kayıt yaptırırken, az sayıda firma da ikinci sınıf ürünlere göre kayıt yaptırıyor. Son dönemde Wuhan ve diğer yerlerin acil ihtiyaçlarını karşılamak amacıyla birçok şirket “acil durum kanalını” kullanarak “Birinci sınıf kayıt iznine başvurun. Virüs örnekleme tüpü bir örnekleme çubuğu, virüs koruma solüsyonu ve dış ambalajdan oluşur. Birleşik bir ulusal standart veya endüstri standardı bulunmadığından, çeşitli üreticilerin ürünleri büyük ölçüde farklılık gösterir.
1. Örnekleme çubuğu: Örnekleme çubuğu doğrudan örnekleme alanıyla temas eder ve örnekleme başlığının malzemesi sonraki tespitle yakından ilişkilidir. Numune alma çubuğu kafası Polyester (PE) sentetik elyaftan veya Rayon'dan (insan yapımı elyaf) yapılmalıdır. Kalsiyum aljinat sünger veya tahta çubuk çubuklar (bambu çubuklar dahil) kullanılamaz ve çubuk başlığının malzemesi pamuklu ürünler olamaz. Pamuk lifi güçlü bir protein adsorbsiyonuna sahip olduğundan, sonraki depolama çözeltisine elüte edilmesi kolay değildir; Kalsiyum aljinat ve ahşap bileşenler içeren bir tahta çubuk veya bambu çubuk kırıldığında, depolama solüsyonunda bekletilmesi proteini de adsorbe edecek ve hatta sonraki PCR reaksiyonunu engelleyebilir. Swab kafasının malzemesi olarak PE elyaf, polyester elyaf ve polipropilen elyaf gibi sentetik elyafların kullanılması tavsiye edilir. Pamuk gibi doğal liflerin kullanılması tavsiye edilmez. Naylon lifler (diş fırçası başlıklarına benzer) suyu emdiği için naylon lifler de önerilmez. Zayıf, yetersiz örnekleme hacmine neden oluyor ve tespit oranını etkiliyor. Swap malzemesinden numune almak için kalsiyum aljinat süngeri yasaktır! Çubukla sapının iki türü vardır: kırık ve yerleşik. Kırılan swab, numune alma işleminden sonra saklama tüpüne yerleştirilir ve numune alma başlığının yakınındaki pozisyondan kırıldıktan sonra tüp kapağı kırılır; Yerleşik çubuk, örnekleme sonrasında doğrudan örnekleme çubuğunu saklama tüpüne koyar ve saklama tüpü tüpü kapağı yerleşiktir. Küçük deliği sapın üst kısmıyla hizalayın ve tüp kapağını sıkın. İki yöntem karşılaştırıldığında ikincisi nispeten güvenlidir. Kırılan swabın daha küçük boyutlu bir saklama tüpüyle birlikte kullanılması kırıldığında tüpün içine sıvı sıçramasına neden olabilir ve ürünün yanlış kullanımından kaynaklanabilecek kontaminasyon riskine karşı tam dikkat gösterilmelidir. Swab sapının malzemesi olarak içi boş polistiren (PS) ekstrüde tüp veya polipropilen (PP) enjeksiyonlu katlama tüpünün kullanılması tavsiye edilir. Hangi malzeme kullanılırsa kullanılsın kalsiyum aljinat katkı maddeleri eklenemez; tahta çubuklar veya Bambu çubuklar. Kısacası numune alma swabı, numune alma miktarını ve salınım miktarını sağlamalı ve seçilen malzemeler daha sonraki testleri etkileyecek maddeler içermemelidir.
2. Virüs koruma çözümü: Piyasada yaygın olarak kullanılan iki tür virüs koruma çözümü vardır; biri taşıma ortamına göre modifiye edilmiş bir virüs bakım çözümü, diğeri ise nükleik asit ekstraksiyon lizatı için modifiye edilmiş bir çözümdür.
İlkinin ana bileşeni, virüsün hayatta kalması için gerekli olan tuzlar, amino asitler, vitaminler, glikoz ve protein ile eklenen Eagle'ın temel kültür ortamı (MEM) veya Hank'in dengeli tuzudur. Bu depolama çözümünde gösterge ve çözelti olarak fenol kırmızısı sodyum tuzu kullanılır. PH değeri 6,6-8,0 olduğunda çözelti pembedir. Koruma çözeltisine gerekli glikoz, L-glutamin ve protein eklenir. Protein, virüsün protein kabuğunu stabilize edebilen fetal sığır serumu veya sığır serum albümini formunda sağlanır. Koruma solüsyonu besin açısından zengin olduğundan virüsün hayatta kalmasına yardımcı olur, aynı zamanda bakterilerin büyümesine de faydalıdır. Koruma solüsyonu bakterilerle kirlenmişse büyük miktarlarda çoğalır. Metabolitlerindeki karbondioksit, koruma çözeltisinin pH'ının pembeden sarıya dönmesine neden olur. Bu nedenle çoğu üretici formülasyonlarına antibakteriyel bileşenler eklemiştir. Önerilen antibakteriyel ajanlar penisilin, streptomisin, gentamisin ve polimiksin B'dir. Sodyum azit ve 2-metil tavsiye edilmez 4-metil-4-izotiazolin-3-on (MCI) ve 5-kloro-2-metil-4 gibi inhibitörler -izotiazolin-3-on (CMCI) çünkü bu bileşenlerin PCR reaksiyonu üzerinde etkisi vardır. Bu koruma solüsyonunun sağladığı numune temelde canlı bir virüs olduğundan numunenin orijinalliği büyük ölçüde korunabilir ve sadece virüs nükleik asitlerinin ekstraksiyonu ve tespiti için değil, aynı zamanda kültivasyonu ve çoğaltılması için de kullanılabilir. virüslerin izolasyonu. Ancak tespit için kullanıldığında nükleik asit ekstraksiyonu ve saflaştırmasının inaktivasyondan sonra yapılması gerektiği unutulmamalıdır.
Nükleik asit ekstraksiyon lizatına dayalı olarak hazırlanan başka bir koruma çözeltisi türü, ana bileşenler dengeli tuzlar, EDTA şelatlama maddesi, guanidin tuzu (guanidin izotiyosiyanat, guanidin hidroklorür vb.), anyonik yüzey aktif madde (dodekan Sodyum sülfat gibi), katyoniktir. yüzey aktif maddeler (tetradesiltrimetilamonyum oksalat gibi), fenol, 8-hidroksikinolin, ditiyotreitol (DTT), proteinaz K ve diğer bileşenler. Bu depolama çözeltisi, nükleik asidi serbest bırakmak ve RNazı ortadan kaldırmak için virüsü doğrudan parçalamak içindir. Yalnızca RT-PCR için kullanılırsa daha uygundur ancak lizat, virüsü etkisiz hale getirebilir. Bu tür bir örnek virüs kültürü ayrımı için kullanılamaz.
Virüs koruma solüsyonunda kullanılan metal iyon şelatlama ajanının EDTA tuzlarının (dipotasyum etilendiamintetraasetik asit, disodyum etilendiamintetraasetik asit vb. gibi) kullanılması tavsiye edilir ve heparin (sodyum heparin, lityum heparin gibi) kullanılması tavsiye edilmez. PCR tespitini etkilemeyecek şekilde.
3. Muhafaza tüpü: Muhafaza tüpünün malzemesi dikkatli seçilmelidir. Polipropilenin (Polipropilen) nükleik asit adsorpsiyonu ile ilgili olduğunu öne süren veriler mevcuttur, özellikle yüksek gerilimli iyon konsantrasyonunda, polietilen (Polietilen) polipropilenden (Polipropilen) daha çok tercih edilir. Kolay kavranabilir DNA/RNA. Polietilen-propilen polimer (Polyalomer) plastik ve bazı özel işlenmiş polipropilen (Polipropilen) plastik kaplar, DNA/RNA depolaması için daha uygundur. Ayrıca kırılabilir bir swab kullanıldığında, swab kırıldığında içindekilerin sıçramasını ve kirlenmesini önlemek için saklama tüpü yüksekliği 8 cm'den büyük bir kap seçmeye çalışmalıdır.
4. Üretim koruma çözeltisi için su: Üretim koruma çözeltisi için kullanılan ultra saf su, RNaz, DNaz ve endotoksin gibi biyolojik kaynaklardan polimer yabancı maddelerin uzaklaştırılmasını sağlamak için 13.000 moleküler ağırlığa sahip bir ultrafiltrasyon membranından filtrelenmelidir ve sıradan arıtma önerilmez. Su veya damıtılmış su.
2. Virüs örnekleme tüplerinin kullanımı
Virüs örnekleme tüpü kullanılarak örnekleme esas olarak orofaringeal örnekleme ve nazofaringeal örneklemeye ayrılır:
1. Orofaringeal örnekleme: Önce dil bastırıcıyla dile bastırın, ardından numune alma çubuğunun başını boğaza doğru uzatarak iki taraflı faringeal bademcikleri ve arka faringeal duvarı silin ve arka faringeal duvarı hafif bir kuvvetle silin, dile dokunmaktan kaçının birim.
2. Nazofaringeal numune alma: burun ucundan kulak memesine kadar olan mesafeyi bir çubukla ölçün ve parmağınızla işaretleyin, numune alma çubuğunu burun boşluğuna dikey burun (yüz) yönünde yerleştirin, çubuk uzanmalıdır kulak memesi uzunluğunun en az yarısı kadar burun ucuna kadar, Swabı 15-30 saniye burunda bırakın, 3-5 kez yavaşça döndürün ve swabı geri çekin.
İster orofaringeal sürüntü ister nazofaringeal sürüntü olsun, kullanım yönteminden numune almanın teknik bir görev olduğunu, zor ve kontamine olduğunu anlamak zor değildir. Toplanan numunenin kalitesi daha sonraki tespitle doğrudan ilişkilidir. Toplanan örneğin viral yükü düşükse, yanlış negatiflere neden olması kolaydır, tanıyı doğrulamak zordur.
Gönderim zamanı: Haz-21-2020
