1. virüs örnekleme tüplerinin üretimi hakkında
Virüs örnekleme tüpleri tıbbi cihaz ürünlerine aittir. Yerli üreticilerin çoğu birinci sınıf ürünlere göre kayıtlıdır ve birkaç şirket ikinci sınıf ürünlere göre kayıtlıdır. Son zamanlarda, Wuhan ve diğer yerlerin acil ihtiyaçlarını karşılamak için, birçok şirket “birinci sınıf kayıt izni için başvurur.
1. Örnekleme Swab: Örnekleme Swab doğrudan örnekleme bölgesine temas eder ve örnekleme kafasının malzemesi sonraki tespit ile yakından ilişkilidir. Örnekleme çubuk başlığı polyester (PE) sentetik lif veya suni raydan (insan yapımı lif) yapılmalıdır. Kalsiyum aljinat sünger veya ahşap çubuklu çubuklar (bambu çubuklar dahil) kullanılamaz ve sürüntü kafasının malzemesi pamuk ürünleri olamaz. Pamuk lifinin güçlü bir protein adsorpsiyonuna sahip olduğundan, sonraki depolama çözeltisine elüte etmek kolay değildir; Ve kalsiyum aljinat ve ahşap bileşenler içeren ahşap bir çubuk veya bambu çubuk kırıldığında, depolama çözeltisine batırmak da proteini adsorbe edecektir ve hatta sonraki PCR reaksiyonunu engelleyebilir. Swab kafasının malzemesi için PE lifi, polyester fiber ve polipropilen fiber gibi sentetik liflerin kullanılması önerilir. Pamuk gibi doğal lifler önerilmez. Naylon lifler de önerilmez çünkü naylon lifler (diş fırçalarına benzer) suyu emer. Zayıf, tespit oranını etkileyen yetersiz örnekleme hacmine neden olur. Kalsiyum aljinat süngeri, swab malzemesinin örneklenmesi için yasaktır! Swab sapının iki türü vardır: kırık ve yerleşik. Kırık sürüntü, örneklemeden sonra depolama tüpüne yerleştirilir ve tüp kapağı, örnekleme kafasının yakınındaki konumdan kırıldıktan sonra kırılır; Dahili swab, örnekleme sonrası örnekleme swabını doğrudan depolama tüpüne koyar ve depolama tüpü kapağı yerleşik küçük deliği sapın üstü ile hizalayın ve tüp kapağını sıkın. İki yöntem karşılaştırıldığında, ikincisi nispeten güvenlidir. Kırık swab daha küçük boyutlu bir depolama tüpü ile birlikte kullanıldığında, kırıldığında boruya sıvı sıçramasına neden olabilir ve ürünün uygunsuz kullanımının neden olduğu kontaminasyon riskine tam dikkat edilmelidir. Swab sapının malzemesi için içi boş polistiren (PS) ekstrüde tüp veya polipropilen (PP) enjeksiyon kırma tüpünün kullanılması önerilir. Hangi malzeme kullanılırsa kullanılırsa, kalsiyum aljinat katkı maddeleri eklenemez; ahşap çubuklar veya bambu çubuklar. Kısacası, örnekleme sürüsü, örnekleme miktarını ve serbest bırakma miktarını sağlamalı ve seçilen malzemelerin sonraki testi etkileyen maddelere sahip olmamalıdır.
2. Virüs koruma çözümü: Piyasada yaygın olarak kullanılan iki tür virüs koruma çözeltisi vardır, biri taşıma ortamına göre değiştirilmiş bir virüs bakım çözümüdür ve diğeri nükleik asit ekstraksiyon lizatı için modifiye edilmiş bir çözümdür.
Birincisinin ana bileşeni, virüs hayatta kalması için gerekli tuzlar, amino asitler, vitaminler, glikoz ve protein ile eklenen Eagle'ın temel kültür ortamı (MEM) veya Hank'in dengeli tuzudur. Bu depolama çözeltisi, bir gösterge ve çözelti olarak fenol kırmızı sodyum tuzu kullanır. PH değeri 6.6-8.0 olduğunda, çözüm pembe. Koruma çözeltisine gerekli glikoz, L-glutamin ve protein ilave edilir. Protein, virüsün protein kabuğunu stabilize edebilen fetal sığır serumu veya sığır serum albümini şeklinde sağlanır. Koruma çözeltisi besin maddeleri açısından zengin olduğundan, virüsün hayatta kalmasına elverişlidir, ancak bakterilerin büyümesine de faydalıdır. Koruma çözeltisi bakterilerle kontamine ise, büyük miktarlarda çoğalacaktır. Metabolitlerindeki karbondioksit, koruma çözeltisinin pH'ın pembe sarı dönmesine neden olacaktır. Bu nedenle, çoğu üretici formülasyonlarına antibakteriyel bileşenler eklemiştir. Önerilen antibakteriyel ajanlar penisilin, streptomisin, gentamisin ve polimiksin B. sodyum azid ve 2-metildir, 4-metil-4-izotiazolin-3-TE (MCI) ve 5-kloro-2-metil-4-izotiazolin-3 (bu), bu bileşenler gibi inhibitörlerdir. Bu koruma çözeltisi tarafından sağlanan numune temel olarak canlı bir virüs olduğundan, numunenin özgünlüğü en büyük ölçüde saklanabilir ve sadece virüs nükleik asitlerin ekstraksiyonu ve tespiti için değil, aynı zamanda virüslerin yetiştirilmesi ve izolasyonu için de kullanılabilir. Bununla birlikte, tespit için kullanıldığında, inaktivasyondan sonra nükleik asit ekstraksiyonu ve saflaştırmanın yapılması gerektiğine dikkat edilmelidir.
Nükleik asit ekstraksiyon lizatına dayanan başka bir tür koruma çözeltisi olan ana bileşenler, dengeli tuzlar, EDTA şelalan ajanı, guanidin tuzu (guanidin izotiyosiyanat, guanidin hidroklorür, vb.), Anyonik yüzey aktif madde (dodesan sodyum sülfat gibi), ila oksalamonik, gibi katationik oksitonik, gibi), katationik yüzeyseldir, katı oksalanzlardır. Fenol, 8-hidroksisinolin, ditiotrreitol (DTT), proteinaz K ve diğer bileşenler, bu depolama çözeltisi nükleik asidi serbest bırakmak ve RNazı ortadan kaldırmak için virüsü doğrudan bölmektir. Sadece RT-PCR için kullanılırsa, daha uygundur, ancak lizat virüsü inaktive edebilir. Bu tür bir numune virüs kültürü ayrılması için kullanılamaz.
Virüs koruma çözeltisinde kullanılan metal iyon şelatlama maddesi, EDTA tuzlarını (dipotasyum etilendiaminetraasetik asit, disodyum etilendiaminetraasetik asit, vb.) Kullanması önerilir ve heparin (sodyum heparin, lityum hepparin gibi), PCR tespiti etkilemeyecek şekilde kullanılması önerilmez.
3. Koruma Tüpü: Koruma tüpünün malzemesi dikkatle seçilmelidir. Polipropilenin (polipropilen) nükleik asidin adsorpsiyonu ile ilişkili olduğunu gösteren veriler vardır, özellikle yüksek gerilim iyonu konsantrasyonunda, polipropilenden (polipropilen) DNA/RNA'yı kavramak kolaydan daha fazla tercih edilir. Polietilen-propilen polimer (polialomer) plastik ve bazı özel işlenmiş polipropilen (polipropilen) plastik kaplar DNA/RNA depolama için daha uygundur. Buna ek olarak, kırılabilir bir sürüntü kullanırken, depolama tüpü, çubuk kırıldığında içeriğin sıçramasını ve kirlenmesini önlemek için 8 cm'den büyük bir yükseklikte bir kap seçmeye çalışmalıdır.
4. Üretim koruma çözeltisi için su: Üretim koruma çözeltisi için kullanılan ultra örgü su, RNaz, DNaz ve endotoksin gibi biyolojik kaynaklardan polimer safsızlıklarının uzaklaştırılmasını sağlamak için 13.000 moleküler ağırlığa sahip bir ultrafiltrasyon membranı ile filtrelenmelidir ve sıradan saflaştırma önerilmez. Su veya damıtılmış su.
2. Virüs örnekleme tüplerinin kullanımı
Virüs örnekleme tüpünü kullanan örnekleme esas olarak orofaringeal örnekleme ve nazofaringeal örneklemeye ayrılmıştır:
1. Orofaringeal örnekleme: Önce dili dil depresörü ile bastırın, daha sonra iki taraflı faringeal bademcikleri ve posterior faringeal duvarları silmek için örnekleme swabının başını boğazın içine uzatın ve arka faringeal duvarını ışık kuvveti ile silin, dil ünitesine dokunmaktan kaçının.
2. Nazofaringeal örnekleme: Burun ucundan kulak lobuna bir sürüntü ile kulak lobuna olan mesafeyi ölçün ve bir parmakla işaretleyin, örnekleme swabını dikey burun (yüz) yönünde burun boşluğuna yerleştirin, swab kulak lobunun en az yarısını, burnun ucuna, burun ucuna doğru salın ve burnun ucuna bırakmalıdır.
İster orofaringeal bir sürüntü veya nazofaringeal bir sürüntü olsun, kullanım yönteminden görmek zor değildir, örnekleme zor ve kontamine olan teknik bir görevdir. Toplanan numunenin kalitesi doğrudan sonraki tespit ile ilişkilidir. Toplanan numunenin düşük viral yükü düşükse, yanlış negatiflere neden olması kolaysa, tanıyı doğrulamak zordur.
Gönderme Zamanı:-21 Haziran-2020
