1. Про виготовлення труб для відбору вірусів
Пробірки для відбору вірусів належать до продуктів медичних пристроїв. Більшість вітчизняних виробників зареєстровані відповідно до першокласних продуктів, і мало компаній зареєстровані відповідно до продукції другого класу. Нещодавно, щоб задовольнити аварійні потреби Вухана та інших місць, багато компаній взяли "канал аварійних аварійних" "подати заявку на дозвіл на першокласний рекорд. Пробірка для відбору вірусу складається з розчину для збереження вірусу та зовнішньої упаковки. Оскільки не існує єдиного національного стандарту або галузевого стандарту, продукти різних виробників різняться.
1. Збірна тампона: тампон з відбору проб безпосередньо контактує з місцем відбору проб, а матеріал головки вибірки тісно пов'язаний з подальшим виявленням. Головка для відбору проб повинна бути виготовлена з поліестерного (ПЕ) синтетичного волокна або Района (техногенного волокна). Альгінатна губка кальцію або дерев’яні палички (включаючи бамбукові палички) не можуть бути використані, а матеріал головки тампона не може бути бавовняними продуктами. Оскільки бавовняне волокно має сильну адсорбцію білка, в наступному розчині зберігання нелегко елу елюту; і коли дерев’яна паличка або бамбукова паличка, що містить альгінат кальцію та дерев’яні компоненти, зламана, замочування в розчині зберігання також буде адсорбувати білок, і навіть він може інгібувати наступну реакцію ПЛР. Рекомендується використовувати синтетичні волокна, такі як PE волокно, поліефірне волокно та поліпропіленове волокно для матеріалу головки тампона. Натуральні волокна, такі як бавовна, не рекомендуються. Нейлонові волокна також не рекомендуються, оскільки нейлонові волокна (схожі на головки зубної щітки) поглинають воду. Поганий, що призводить до недостатнього обсягу вибірки, що впливає на швидкість виявлення. Губка альгінату кальцію забороняється для відбору проб матеріалу! Ручка тампона має два типи: зламаний та вбудований. Зламаний тампон поміщається в трубку для зберігання після відбору проб, а ковпачок трубки зламається після того, як зламана з положення біля головки відбору проб; Вбудований тампон безпосередньо вкладає тампон для відбору проб у трубку для зберігання після відбору проб, а кришка трубки для зберігання вбудована у вирівнювання невеликого отвору з верхньою ручкою і затягніть кришку трубки. Порівнюючи два методи, останні відносно безпечні. Коли зламаний тампон використовується спільно з трубкою для зберігання менших розмірів, це може спричинити бризок рідини в трубці при розбитті, а повну увагу слід приділяти ризику забруднення, спричиненого неправильним використанням продукту. Рекомендується використовувати порожнисту полістирол (PS) екструдовану трубку або поліпропіленову (ПП) впорскувальну трубку для матеріалу для ручки тампона. Незалежно від того, який матеріал використовується, альгінатні добавки кальцію не можуть бути додані; дерев’яні палички або бамбукові палички. Коротше кажучи, тампон для відбору проб повинен забезпечити кількість вибірки та кількість вивільнення, а вибрані матеріали не повинні мати речовин, які впливають на подальші випробування.
2. Розчин для збереження вірусів: Існує два види розчинів для збереження вірусів, широко використовуваних на ринку, один - це розчин для підтримки вірусу на основі транспортного середовища, а інший - модифікований розчин для лізату екстракції нуклеїнової кислоти.
Основним компонентом першого є основне культуральне середовище Eagle (MEM) або збалансована сіль Хенка, яку додають солі, амінокислоти, вітаміни, глюкозу та білок, необхідні для виживання вірусів. Цей розчин для зберігання використовує фенол червону солі натрію як індикатор і розчин. Коли значення pH становить 6,6-8,0, рішення рожеве. До розчину збереження додаються необхідні глюкози, глютамін та білок. Білок надається у вигляді сироватки великої рогатої худоби або альбуміну сироватки великої рогатої худоби, що може стабілізувати білкову оболонку вірусу. Оскільки розчин для збереження багатий поживними речовинами, він сприятливий для виживання вірусу, але також сприятливо для росту бактерій. Якщо розчин для збереження забруднений бактеріями, він помножиться у великих кількостях. Вуглекислий газ у його метаболітах призведе до падіння рН для збереження з рожевого кольору жовтого кольору. Тому більшість виробників додали антибактеріальні інгредієнти до своїх рецептур. Рекомендованими антибактеріальними агентами є пеніцилін, стрептоміцин, гентаміцин та поліміксин В. Азід натрію та 2-метил не рекомендуються інгібіторами, такими як 4-метил-4-іізотіазолін-3-one (MCI) та 5-хлоро-2-метил-4-iSothiazolin-3-one (cmci), оскільки ці компоненти-anconents in the thelcon. Оскільки зразок, що надається цим розчином для збереження, є в основному живим вірусом, оригінальність зразка може зберігатися в найбільшій мірі, і його можна використовувати не тільки для вилучення та виявлення вірусних нуклеїнових кислот, але і для вирощування та виділення вірусів. Однак слід зазначити, що при використанні для виявлення після інактивації необхідно проводити вилучення та очищення нуклеїнової кислоти.
Another kind of preservation solution prepared based on nucleic acid extraction lysate, the main components are balanced salts, EDTA chelating agent, guanidine salt (such as guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, etc.), anionic surfactant (such as dodecane Sodium sulfate), cationic surfactants (such as tetradecyltrimethylammonium oxalate), Цей розчин для зберігання полягає в тому, щоб безпосередньо розщеплювати вірус для вивільнення нуклеїнової кислоти та усунення RNASE полягає в тому Якщо використовується лише для RT-PCR, він є більш підходящим, але лізат може інактивувати вірус. Цей вид зразка не може бути використаний для розділення вірусної культури.
Хелатура іонів металів, що використовується в розчині збереження вірусу, рекомендується використовувати солі EDTA (наприклад, етилендіандіамінеттрацтова кислота, диполяція етилентетрацтова кислота тощо), і не рекомендується використовувати гепарин (наприклад, гепепарін натрію, літієвий гепарін), так що не впливає на PCR.
3. Трубка збереження: Матеріал консерваційної трубки слід обрати обережно. Існують дані, що свідчать про те, що поліпропілен (поліпропілен) пов'язаний з адсорбцією нуклеїнової кислоти, особливо при концентрації іонів високої напруги, поліетилен (поліетилен) є більш бажаним, ніж поліпропілен (поліпропілен), легко розуміючи ДНК/РНК. Пластик поліетилен-пропіленового полімеру (поліалломмеру) та деякі спеціально оброблені поліпропіленові (поліпропіленові) пластикові контейнери є більш придатними для зберігання ДНК/РНК. Крім того, при використанні зламаного тампона трубка для зберігання повинна спробувати вибрати контейнер з висотою, що перевищує 8 см, щоб запобігти розбиттям вмісту та забрудненим, коли тампон зламано.
. Вода або дистильована вода.
2. Використання труб для відбору вірусів
Відбір проб за допомогою пробірки для відбору проб в основному поділяється на відбір проб орофарингеалу та відбір проб носоглотки:
1. Орофарингеальна відбір проб: спочатку натисніть язик депресіром язика, а потім розкажи голову тампона для відбору проб у горло, щоб витерти двосторонній глотковий гуртовину та задню стінку глотки, і витерти задню стінку глотної глотки легкою силою, уникаючи дотику до язикової одиниці.
2. Назофарингеальна відбір проб: відміряйте відстань від кінчика носа до вушної долі з тампоном і позначкою пальцем, вставте зразок для відбору проб у порожнину носа у напрямку вертикального носа (обличчя), тампом повинен простягнути щонайменше половину довжини вузької частини до кінчика носа, а також вилучити в ніс на 15-30.
Не важко зрозуміти з методу використання, будь то орофарингеальний тампон чи носоглотковий тампон, відбір проб - це технічне завдання, яке складне і забруднене. Якість зібраного зразка безпосередньо пов'язана з подальшим виявленням. Якщо зібраний зразок має вірусне навантаження з низьким, простим спричинити помилкові негативи, важко підтвердити діагноз.
Час посади: 21-2020 червня
