1. Virusdan namuna olish naychalarini ishlab chiqarish haqida
Virusdan namuna olish naychalari tibbiy asboblar mahsulotlariga tegishli. Mahalliy ishlab chiqaruvchilarning ko'pchiligi birinchi toifali mahsulotlar bo'yicha ro'yxatdan o'tgan, ikkinchi darajali mahsulotlar bo'yicha esa kam kompaniyalar ro'yxatga olingan. So'nggi paytlarda Vuxan va boshqa joylarning favqulodda ehtiyojlarini qondirish uchun ko'plab kompaniyalar "favqulodda vaziyatlar kanali" ni oldilar "Birinchi darajali rekord ruxsat olish uchun murojaat qiling. Virus namunasi olish trubkasi namuna olish tampon, virusni saqlovchi eritma va tashqi qadoqdan iborat. Yagona milliy standart yoki sanoat standarti mavjud emasligi sababli, turli ishlab chiqaruvchilarning mahsulotlari juda farq qiladi.
1. Namuna olish tampon: Namuna olish tampon to'g'ridan-to'g'ri namuna olish joyi bilan aloqa qiladi va namuna boshining materiali keyingi aniqlash bilan chambarchas bog'liq. Namuna oluvchi tampon boshi Polyester (PE) sintetik tola yoki rayon (sun'iy tola) dan tayyorlanishi kerak. Kaltsiy alginat shimgichni yoki yog'och tayoq tamponlarini (shu jumladan bambuk tayoqlarni) ishlatib bo'lmaydi va tampon boshining materiali paxta mahsulotlari bo'lishi mumkin emas. Paxta tolasi oqsilning kuchli adsorbsiyasiga ega bo'lganligi sababli, uni keyingi saqlash eritmasiga o'tkazish oson emas; va kaltsiy alginat va yog'och komponentlarini o'z ichiga olgan yog'och tayoq yoki bambuk tayoq sindirilganda, saqlash eritmasiga namlash ham oqsilni adsorbsiyalaydi va hatto keyingi PCR reaktsiyasini inhibe qilishi mumkin. Tampon boshining materiali uchun pe tolasi, poliester tolasi va polipropilen tolasi kabi sintetik tolalardan foydalanish tavsiya etiladi. Paxta kabi tabiiy tolalar tavsiya etilmaydi. Neylon tolalar ham tavsiya etilmaydi, chunki neylon tolalar (tish cho'tkasi boshlariga o'xshash) suvni o'zlashtiradi. Kambag'al, natijada namuna olish hajmi etarli emas, bu aniqlash tezligiga ta'sir qiladi. Kaltsiy alginat shimgichi tampon materialidan namuna olish uchun taqiqlangan! Tampon tutqichi ikki turga ega: singan va o'rnatilgan. Buzilgan tampon namuna olingandan keyin saqlash trubasiga joylashtiriladi va trubka qopqog'i namuna olish boshi yaqinidagi joydan sindirilgandan so'ng buziladi; o'rnatilgan tampon to'g'ridan-to'g'ri namuna olishdan keyin namuna olish tamponini saqlash trubasiga qo'yadi va saqlash trubkasi qopqog'i ichida qurilgan Kichik teshikni tutqichning yuqori qismi bilan tekislang va kolba qopqog'ini torting. Ikki usulni solishtirganda, ikkinchisi nisbatan xavfsizdir. Buzilgan tampon kichikroq o'lchamdagi saqlash trubkasi bilan birgalikda ishlatilsa, u singanida trubkada suyuqlik sachrashiga olib kelishi mumkin va mahsulotni noto'g'ri ishlatish natijasida yuzaga keladigan ifloslanish xavfiga to'liq e'tibor qaratish lozim. Tampon tutqichining materiali uchun ichi bo'sh polistirol (PS) ekstrudirovka qilingan quvur yoki polipropilen (PP) in'ektsiya trubkasidan foydalanish tavsiya etiladi. Qaysi materialdan foydalanmasin, kaltsiy alginat qo'shimchalarini qo'shib bo'lmaydi; yog'och tayoqlar yoki bambuk tayoqchalar. Muxtasar qilib aytganda, namuna olish tamponida namuna olish miqdori va chiqarish miqdorini ta'minlashi kerak va tanlangan materiallarda keyingi sinovlarga ta'sir qiluvchi moddalar bo'lmasligi kerak.
2. Virusni saqlash yechimi: Bozorda keng qo'llaniladigan ikki turdagi virusni saqlash yechimlari mavjud bo'lib, biri transport vositasi asosida o'zgartirilgan virusga xizmat ko'rsatish eritmasi, ikkinchisi esa nuklein kislota ekstraktsiyasi lizati uchun o'zgartirilgan eritma.
Birinchisining asosiy komponenti burgutning asosiy madaniy muhiti (MEM) yoki virusning omon qolishi uchun zarur bo'lgan tuzlar, aminokislotalar, vitaminlar, glyukoza va oqsil bilan qo'shilgan Hankning muvozanatli tuzidir. Ushbu saqlash eritmasi indikator va eritma sifatida fenol qizil natriy tuzidan foydalanadi. PH qiymati 6,6-8,0 bo'lsa, eritma pushti rangga ega. Konservalash eritmasiga kerakli glyukoza, L-glutamin va oqsil qo'shiladi. Protein xomilalik sigir zardobi yoki sigir zardobi albumini shaklida taqdim etiladi, bu virusning oqsil qobig'ini barqarorlashtirishi mumkin. Konservatsiya eritmasi ozuqa moddalariga boy bo'lgani uchun u virusning omon qolishiga yordam beradi, lekin bakteriyalarning ko'payishi uchun ham foydalidir. Agar konserva eritmasi bakteriyalar bilan ifloslangan bo'lsa, u ko'p miqdorda ko'payadi. Uning metabolitlaridagi karbonat angidrid saqlovchi eritma pH ning pushti rangdan tushishiga olib keladi, sariq rangga aylanadi. Shuning uchun ko'pchilik ishlab chiqaruvchilar o'zlarining formulalariga antibakterial ingredientlarni qo'shdilar. Tavsiya etilgan antibakterial vositalar penitsillin, streptomitsin, gentamitsin va polimiksin B. Natriy azid va 2-metil tavsiya etilmaydi. 4-metil-4-izotiyazolin-3-on (MCI) va 5-xloro-2-metil-4 kabi inhibitorlar. -izotiyazolin-3-on (CMCI), chunki bu komponentlar PCR reaktsiyasiga ta'sir qiladi. Ushbu himoya eritmasi tomonidan taqdim etilgan namuna asosan tirik virus bo'lganligi sababli, namunaning o'ziga xosligi maksimal darajada saqlanishi mumkin va u nafaqat virus nuklein kislotalarini olish va aniqlash uchun, balki etishtirish va etishtirish uchun ham ishlatilishi mumkin. viruslarni izolyatsiya qilish. Ammo shuni ta'kidlash kerakki, aniqlash uchun foydalanilganda, nuklein kislotani ekstraktsiyalash va tozalash inaktivatsiyadan keyin amalga oshirilishi kerak.
Nuklein kislotasi ekstraktsiyasi lizatiga asoslangan boshqa turdagi himoya eritmasi, asosiy komponentlar muvozanatli tuzlar, EDTA xelatlash agenti, guanidin tuzi (guanidin izotiyosiyanat, guanidin gidroxlorid va boshqalar kabi), anion sirt faol moddasi (masalan, dodekan natriy sulfat), sirt faol moddalar (masalan tetradesiltrimetilamonyum oksalat), fenol, 8-gidroksikinolin, ditiotreitol (DTT), proteinaz K va boshqa komponentlar, Bu saqlash eritmasi virusni to'g'ridan-to'g'ri nuklein kislotani chiqarish va RNazni yo'q qilish uchun parchalashdir. Agar faqat RT-PCR uchun ishlatilsa, u ko'proq mos keladi, ammo lizat virusni faolsizlantirishi mumkin. Ushbu turdagi namunani virus madaniyatini ajratish uchun ishlatib bo'lmaydi.
Virusni saqlovchi eritmada ishlatiladigan metall ion xelatlovchi agenti EDTA tuzlarini (masalan, dikaliy etilendiamintetraasetik kislota, disodiy etilendiamintetraasetik kislota va boshqalar) ishlatish tavsiya etiladi va geparinni (natriy geparin, lityum geparin kabi) ishlatish tavsiya etilmaydi. PCRni aniqlashga ta'sir qilmaslik uchun.
3. Himoya trubkasi: saqlovchi trubaning materialini ehtiyotkorlik bilan tanlash kerak. Polipropilen (Polipropilen) nuklein kislotaning adsorbsiyasi bilan bog'liqligini ko'rsatadigan ma'lumotlar mavjud, ayniqsa yuqori kuchlanishli ion konsentratsiyasida, polietilen (Polietilen) polipropilendan (Polipropilen) DNK / RNKni tushunish oson. DNK/RNK saqlash uchun polietilen-propilen polimer (Polyallomer) plastmassa va ba'zi maxsus qayta ishlangan polipropilen (Polipropilen) plastik idishlar ko'proq mos keladi. Bundan tashqari, sinishi mumkin bo'lgan tampondan foydalanganda, saqlash trubkasi tampon sindirilganda tarkibning chayqalishi va ifloslanishini oldini olish uchun balandligi 8 sm dan ortiq bo'lgan idishni tanlashga harakat qilishi kerak.
4. Ishlab chiqarishni saqlash eritmasi uchun suv: ishlab chiqarishni saqlash eritmasi uchun ishlatiladigan o'ta toza suv RNase, DNase va endotoksin kabi biologik manbalardan polimer aralashmalarini olib tashlashni ta'minlash uchun molekulyar og'irligi 13000 bo'lgan ultrafiltratsiya membranasi orqali filtrlanishi kerak va oddiy tozalash tavsiya etilmaydi. Suv yoki distillangan suv.
2. Virusdan namuna olish naychalaridan foydalanish
Virus namuna olish trubkasi yordamida namuna olish asosan orofaringeal namuna olishga va nazofarengeal namuna olishga bo'linadi:
1. Orofaringeal namuna olish: Avval tilni depressor bilan bosing, so'ngra ikki tomonlama faringeal bodomsimon bezlar va orqa faringeal devorni artib olish uchun namuna olish tamponining boshini tomoqqa cho'zing va orqa faringeal devorni engil kuch bilan artib oling, tilga tegmang. birlik.
2. Nazofarengeal namuna olish: tampon bilan burun uchidan quloq bo'lagigacha bo'lgan masofani o'lchab, barmoq bilan belgilang, namuna olish tamponini burun bo'shlig'iga vertikal burun (yuz) yo'nalishi bo'yicha kiriting, tampon uzayishi kerak. quloq bo'lagi uzunligining kamida yarmini burun uchigacha, tamponni burunga 15-30 soniya davomida yumshoq qilib qo'ying. 3-5 marta aylantiring va tamponni oling.
Qo'llash usulidan ko'rish qiyin emas, u orofaringeal tampon yoki nazofarengeal tampon bo'ladimi, namuna olish texnik vazifa bo'lib, qiyin va ifloslangan. Yig'ilgan namunaning sifati keyingi aniqlash bilan bevosita bog'liq. Agar to'plangan namunada virusli yuk bo'lsa, past, noto'g'ri negativlarni keltirib chiqarish oson, tashxisni tasdiqlash qiyin.
Yuborilgan vaqt: 21-iyun-2020
